梁慧芳
- 作品数：57 被引量：99H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 慢性排斥肾移植大鼠继发对自身组织蛋白vimentin的细胞和体液免疫反应被引量：4
- 2012年
- 目的:研究慢性排斥肾移植受体对自身组织抗原——波形蛋白(vimentin)的细胞和体液免疫反应。方法:近交系Lewis大鼠接受F344大鼠供肾行左侧原位肾移植,7天后对侧肾切除,建立肾移植慢性排斥反应模型。术后每2周检测受体蛋白尿水平,术后第49天与98天取供肾作病理检查,观察慢性移植肾肾病(CAN)进程。术后第14、49、98天收获受体脾细胞,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测vimentin特异性IFN-γ分泌T细胞的数量;收获受体血清以酶联免疫吸附法(ELISA)检测vimentin特异性抗体水平。自体肾移植Lewis大鼠持续行肾功能检测,第98天收获肾脏、脾脏、血清作病理及免疫检测。结果:同种肾移植受体蛋白尿水平在6周后逐渐升高,49天时病理检查发现肾间质纤维化、肾小管萎缩等典型CAN病变,CAN病情逐渐加重。而自体肾移植大鼠术后98天蛋白尿水平无改变,无CAN病变。经体外vimentin特异性刺激,同种肾移植大鼠IFN-γ分泌T细胞的数量在肾移植后49天明显增多(28.3±2.0 vs.10.1±2.1),98天时其数量显著上升(126.0±10.4vs.26.3±4.1,P<0.01)。而自体肾移植大鼠vimentin特异性IFN-γ分泌T细胞数量无明显变化。同种肾移植大鼠vimentin特异性抗体水平术后14天即显著升高(0.230±0.018 vs.0.063±0.008,P<0.05),并维持在较高水平。而自体肾移植大鼠vimentin特异性抗体水平无明显改变。结论:慢性排斥肾移植受体继发针对自身抗原vimentin的细胞与体液免疫反应,继发自身免疫可能参与CAN的发展。
- 方成李琦刘立陈薇胡汉宁梁慧芳王加谋瞿永华谢德芳
- 关键词：波形蛋白肾移植慢性排斥
- 缺氧诱导因子-3的研究进展被引量：2
- 2007年
- 缺氧诱导因子（hypoxia-inducible factor，HIF）是广泛存在于人和哺乳动物体内的一种转录因子，可以上调多达150种靶基因的表达，是细胞在缺氧应答反应中最重要的调节因子。目前发现的缺氧诱导因子成员有HIF-1、HIF-2、HIF-33种，其中HIF-3是1998年Gu等首先发现，目前国内外研究的较少。现有的研究显示HIF-3主要在心脏、胎盘、骨骼肌和肺组织中表达，在肝脏和肾脏组织中表达量较低，可能是缺氧调控靶基因表达的负性调节因子。
- 杨盛力张万广陈孝平梁慧芳
- 关键词：转录因子
- TNF-α结合肽和TNFR1封闭肽及其在治疗TNF相关疾病中的应用
- 本发明涉及一条TNFR1封闭肽及其与人IgG1Fc段基因重组后形成的TNFR1-Fc融合蛋白。该TNFR1封闭肽为12线肽；本发明还涉及一条TNF结合环肽和一条TNFR1封闭环肽，二者均为环9肽(即C7C)；该TNFR1...
- 李卓娅尹丙姣王晶梁慧芳黄丽霞何亚萍
- TNFR1BP/IgGFc融合蛋白载体的构建、表达及其生物学活性研究
- 2008年
- 目的构建肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)封闭肽与IgGFc融合蛋白的真核表达载体,检测其表达和生物学活性。方法将合成的TNFR1封闭肽(TNFR1BP)基因片段插入质粒pIG/3C,构建真核表达载体pIG/3C-TNFR1BP;脂质体法将重组载体转染COS-7细胞;ELISA和Western blot法检测转染细胞的培养上清中TNFR1BP/IgGFc融合蛋白的表达;间接免疫荧光抑制实验、细胞毒抑制实验检测融合蛋白对TNFR1的封闭作用。结果经PCR和核苷酸序列测定证实TNFR1BP基因正确插入质粒pIG/3C。ELISA检测证实,在转染细胞培养上清中有融合蛋白的表达;间接免疫荧光抑制实验和细胞毒抑制实验证实融合蛋白能结合L929细胞表面的TNFR1,并能抑制分泌型肿瘤坏死因子α(sTNF-α)介导的细胞毒作用。结论成功构建并实现TNFR1BP/IgGFc融合蛋白真核表达;体外实验证实此融合蛋白可通过与细胞表面TNFR1结合,从而拮抗sTNF-α介导的生物学效应。
- 黄丽霞尹丙姣王晶梁慧芳曾庆岭姜小丹李卓娅
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α真核表达
- 乙肝病毒X蛋白激活NF-κB信号通路对AFP表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的研究乙肝病毒X蛋白(HBx)通过核因子-κB(NF-κB)信号通路对甲胎蛋白(AFP)的调节作用。方法建立稳定转染HBx基因的L02细胞系(L02-HBx),用特异性的NF-κB信号通路阻断剂PDTC阻断该信号通路,荧光双标激光扫描共聚焦显微镜观察转染前后及加入PDTC前后NF-κB信号通路的激活、失活情况,同时用实时定量PCR和WesternBlot技术检测转染前后及加入PDTC前后AFP在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果以L02细胞为参照,转染HBx基因后的L02-HBx细胞NF-κB信号通路被激活,AFPmRNA和蛋白水平较转染前分别增加(2.78±0.43)倍和(4.72±0.53)倍,差异有统计学意义(P<0.05);PDTC作用24h后L02/HBx细胞NF-κB信号通路阻断,AFPmRNA和蛋白表达分别为(1.40±0.16)倍和(3.12±0.44)倍,与未加入PDTC作用的L02-HBx细胞相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB信号通路是HBx上调AFP表达的途径之一。
- 任利陈孝平张万广刘利平杨盛力梁慧芳
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白甲胎蛋白核因子-ΚB信号通路肝细胞
- HIF-3α在肝癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2008年
- 杨盛力陈孝平张万广刘利平梁慧芳任利占大钱
- 关键词：肝脏肿瘤缺氧诱导因子
- 沉默缺氧诱导因子-1α对肝癌细胞化疗敏感性影响及相关机理的研究被引量：4
- 2008年
- 目的观察应用短发夹RNA(shRNA)沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α对肝癌细胞化疗敏感性的影响并探讨其相关机理。方法脂质体包裹HIF-1αshRNA表达载体(pshRNA-HIF-1α)转染到肝癌细胞HepG2细胞中,G418筛选,建立稳定的HIF-1α沉默的细胞系,并以转染空白质粒(pHK)作对照。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测沉默HIF-1α后HIF-1αmRNA和多药耐药基因1(mdr1)mRNA变化;免疫印迹(Western blot)检测细胞HIF-1α及P-糖蛋白(P-gp)的变化。CoCl2模拟缺氧环境下,MTT和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物(阿霉素)在HIF-1α沉默后对细胞生长抑制率和凋亡率的影响。结果pshRNA-HIF-1α转染细胞后HIF-1α干扰率在mRNA水平和蛋白水平分别为82.18%和75.51%。沉默HIF-1α后细胞mdr1 mRNA和P-gp表达显著降低(P<0.05),生长抑制率和凋亡率明显增高(P<0.05)。结论shRNA沉默HepG2细胞HIF-1α可以通过下调mdr1 mRNA和P-gp表达逆转肝癌化疗耐药,增强肝癌细胞对化疗的敏感性;可通过沉默HIF-1α作为肝癌基因治疗的一种新途径。
- 刘利平陈孝平杨盛力张万广徐涛金炜东梁慧芳
- 关键词：肝脏肿瘤缺氧诱导因子-1Α化疗敏感性
- 胆管前壁套入式（或插入式）肝肠吻合术的动物实验研究被引量：2
- 2009年
- 肝肠吻合术是肝胆外科常用的肝内胆管重建手术方式，传统的肝肠吻合术对于单个较粗胆管的胆道重建可以达到较好的治疗目的，但较细的胆管及多个胆管重建手术操作困难、术后吻合口狭窄、胆瘘等并发症发生率较高，尤其是多个较细的、无法整形合一的肝内胆管重建更为困难。经过多年临床研究，我们设计了一种简单的肝肠吻合方法用于多个断端开口的较细的肝内胆道重建，将其命名为胆管前壁套人式（或插入式）肝肠吻合术，并进行了动物实验模型对照研究，现将研究结果报告如下。
- 杨宏强陈孝平张志伟张万广彭心宇梁慧芳王恒毅陈琳
- 关键词：动物实验模型胆管重建插入式前壁套入式术后吻合口狭窄
- TNF-α结合肽和TNFR1封闭肽及其在治疗TNF相关疾病中的应用
- 本发明涉及一条TNFR1封闭肽及其与人IgG1Fc段基因重组后形成的TNFR1-Fc融合蛋白。该TNFR1封闭肽为12线肽；本发明还涉及一条TNF结合环肽和一条TNFR1封闭环肽，二者均为环9肽(即C7C)；该TNFR1...
- 李卓娅尹丙姣王晶梁慧芳黄丽霞何亚萍
- 文献传递
- 肝癌生物样本库的建立和质量鉴定被引量：9
- 2013年
- 目的:利用华中地区最大的肝癌治疗中心的优势,建立一个较完善的以肝癌为主的肝脏外科生物样本库,为肝癌转化医学研究提供高质量和充足的生物资源。方法:收集武汉同济医院肝脏外科2007年以来手术切除的肝胆系统肿瘤组织和血液样本。随机抽取40例-80℃保存的肝癌冰冻组织进行组织切片染色以及RNA和DNA提取和电泳分析。结果:随机抽取的样本RNA电泳28S和18S条带清晰,且28S条带亮度约为18S的2倍,无杂质拖尾现象。DNA电泳条带清晰,无明显降解小片段。肝癌组织镜下癌细胞染色面积均大于85%,坏死组织面积均<10%。结论:初步建立起了一个信息化较完整、实用性较强的肝癌生物样本库,以便进一步探索和利用生物样本资源,为今后肝癌转化医学的研究提供更先进的平台。
- 高丹喻晶晶梁慧芳陈孝平张志伟靖凯
- 关键词：肝肿瘤标本库
