李小康
- 作品数：11 被引量：84H指数：5
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项河南省科技攻关计划河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 中红杨叶色变化的生理生化研究
- 中红杨(原名中华红叶杨)(Populus xeuramerieana‘zhonghong’)是黑杨派杨树2025的芽变品种。本文采用不同光照强度下喷施3‰OKH2PO4、3‰柠檬酸及3‰糖营养液的方法，研究外界环境和栽培...
- 李小康
- 关键词：中红杨叶色变化生理生化
- 文献传递
- 多重PCR检测猪细小病毒和猪伪狂犬病毒的研究
- 本文根据Genbank上已发表的猪细小病毒(PPV)的VP2基因序列和猪伪狂犬病毒(PRV)的gH基因序列,设计合成了两对特异引物,分别建立了PPV和PRV的单项PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选,最终成功地建立了PP...
- 李小康崔保安赵丽陈红英魏战勇
- 关键词：复合PCRPPVPRV猪伪狂犬病毒
- 文献传递
- PCR检测猪伪狂犬病病毒方法的研究被引量：24
- 2007年
- 根据编码猪伪狂犬病病毒gH基因保守序列,设计合成一对引物,通过改进病毒核酸提取方法和优化PCR反应条件,成功的从猪伪狂犬病毒感染的细胞中扩增出预期的355bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒和正常细胞均未扩增出相应的片段,经NaeⅠ酶切鉴定,证实了该扩增片段的特异性;敏感性实验表明,该体系可检测到0.48pg的猪伪狂犬病毒DNA。本方法的建立使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、简便、经济、实用。
- 赵丽崔保安方忠意李小康陈红英夏平安朱瑞芳
- 关键词：PCR猪伪狂犬病毒
- 猪白细胞介素-18基因克隆、序列分析及其真核表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 采集6月龄河南良杂猪脾脏,分离淋巴细胞后直接提取总RNA,进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行T-A克隆、测序,获得了河南良杂猪IL-18全基因序列。序列测定表明,plL-18全基因核苷酸长度为579bp,编码192个氨基酸。与GenBank上已发表序列ABO10003进行比较,核苷酸同源性为99.8%,在第550位处(以ATG为1计)存在A→G的有意义突变。与从GenBank下载读取的ABO10003、AF176949、AY262109、NM1997序列进行比较分析,氨基酸同源性分别为99%、98.5%和99.8%、99%。将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA-ILl8m,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为核酸疫苗的研究应用奠定了基础。
- 郑兰兰崔保安陈红英贾云飞陈瑞亮方忠意李小康赵丽
- 关键词：克隆
- 猪白细胞介素18全基因的克隆、真核表达质粒的构建及其在猪肾细胞中的表达被引量：6
- 2009年
- 通过RT-PCR方法自猪脾脏淋巴细胞中扩增mpIL-18基因,序列测定表明,plL-18全基因核苷酸长度为579bp,编码192个氨基酸。将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组质粒pcDNA-ILl8m,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。阳性克隆鉴定后,在脂质体作用下转染猪肾细胞(PK15),通过提取RNA检测到了mpIL-18在PK15细胞中的表达。
- 郑兰兰崔保安陈红英陈瑞亮方忠意李小康赵丽
- 关键词：IL-18基因克隆转染
- 多重PCR检测猪细小病毒和猪伪狂犬病毒的研究
- 根据Genbank上已发表的猪细小病毒(PPV)的VP2基因序列和猪伪狂犬病毒(PRV)的gH基因序列,设计合成了两对特异引物,分别建立了PPV和PRV的单项PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选, 最终成功地建立了PPV...
- 李小康崔保安赵丽陈红英魏战勇
- 关键词：复合PCRPPVPRV
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测猪细小病毒被引量：8
- 2008年
- 根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了引物和探针,从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中提取DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌JM109,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定,表明目的片段已经成功克隆。将104～108拷贝反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度为102拷贝。本方法的建立为猪细小病毒感染的早期诊断奠定了基础。
- 李小康崔保安陈红英魏战勇郑兰兰赵丽吕晓丽
- 关键词：猪细小病毒实时荧光定量PCR
- 猪细小病毒PCR诊断方法建立及标准制订
- 猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍的主要病原体之一,其特征是孕前期受到感染,经胎盘使胚胎受到侵袭,引起初产母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等,同时还可以引起仔猪的...
- 李小康
- 关键词：猪细小病毒PCR荧光定量PCR复合PCR
- 文献传递
- 1起猪细小病毒病的PCR诊断与防制被引量：1
- 2006年
- 2005年10月,郑州市某猪场发生了一种以初产母猪流产、死产为特征的疾病,经PCR检测猪细小病毒阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪细小病毒病。对该猪场采取了综合防制措施,取得了较好的效果。
- 李小康崔保安魏战勇赵丽
- 关键词：猪细小病毒PCR防制
- 多重PCR检测猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒的研究被引量：25
- 2007年
- 根据GenBank上已发表的猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)的VP2基因序列和猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的gH基因序列,设计合成了两对特异引物,分别建立了PPV和PRV的单项PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选,最终成功地建立了PPV和PRV的复合PCR诊断方法,即利用一次PCR反应,可同时扩增PPV的751bp和PRV355bp的特异性片段,而扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)及相应的培养细胞(PK-15)核酸结果均为阴性,对PPV和PRV的最低检出量分别为100pg和10pg的DNA。该方法适合对PPV和PRV的联合检测和鉴别诊断。
- 李小康赵丽崔保安陈红英魏战勇
- 关键词：复合PCRPPVPRV
