方忠意
- 作品数：41 被引量：110H指数：6
- 供职机构：河南省兽药监察所更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家科技重大专项河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 河南良杂猪白细胞介素-18全基因的克隆与序列分析
- 白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)是一种能诱导产生IFN-γ的新型细胞因子．参照GenBank发表的猪IL-18cDNA基因序列,设计一对引物,采集6月龄河南良杂猪的脾脏,分离淋巴细胞后直接提取...
- 郑兰兰崔保安陈红英方忠意陈瑞亮赵现敏冯向杰
- 关键词：克隆
- 文献传递
- 应用PCR检测鸡传染性喉气管炎病毒被引量：2
- 2007年
- 根据传染性喉气管炎病毒（ILTV）TK基因序列,设计、合成1对引物,应用PCR技术对ILTV以色列疫苗株、河南分离株（ILTV-CG和ILTV-XY）进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的目的片段,测序分析和酶切分析证实了PCR产物的特异性,而对其它禽病原体的扩增均为阴性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为21 pg。应用PCR检测人工接种后不同天数采集的鸡的结膜拭子,接种后第2-5 d均能检测到ILTV。该方法可用于鸡传染性喉气管炎病的诊断和临诊样品检测。
- 陈红英李新生张红英方忠意王东方崔保安
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒PCR
- 高效液相色谱法测定氟苯尼考预混剂中喹诺酮类药物的方法研究
- 2013年
- 建立了高效液相色谱法检测氟苯尼考预混剂中非法添加氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星的方法。用十八烷基键合硅胶色谱柱,以流动相A(磷酸3.0ml加水至1000ml,用三乙胺调pH值至3.0±0.1,加乙腈50ml)-甲醇(88∶12)为流动相,采用二极管阵列检测器,采集波长为200～400nm,分辨率为1.2nm,记录光谱图和283nm波长处的色谱图,流速1.0ml/min,柱温30℃。结果显示,4种喹诺酮类药物的浓度在0.5～200μg/ml范围内呈良好的线性关系,添加回收率在99.2%～100.2%之间,相对标准偏差在0.18%～0.85%之间,检测限0.5mg/g。本方法快速、准确,可用于氟苯尼考预混剂中非法添加喹诺酮类药物的定性和定量检测。
- 方忠意刘素梅
- 关键词：喹诺酮类药物高效液相色谱法
- 鸽新城疫的诊断和防制
- 2007年
- 杨明凡陈红英方忠意崔保安
- 关键词：鸽新城疫防制病毒灭活苗发病情况白色稀粪
- 超高效液相色谱—串联质谱法测定原料奶中苯并咪唑类药物被引量：9
- 2009年
- 建立了超高效液相色谱—串联四级杆质谱法测定原料奶中苯并咪唑类药物残留量的检测方法。原料奶经乙酸乙酯提取,MCX固相萃取柱净化,用UPLC-MS/MS进行检测。色谱条件为:色谱柱为ACQUITYUPLCTMBEHC18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相为:乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min。采用ESI正离子模式,多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。本方法检测测苯并咪唑类药物残留的检测限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg。
- 方忠意班付国刘素梅
- 关键词：苯并咪唑类药物原料奶
- 猪白细胞介素18成熟蛋白基因克隆及在不同原核表达系统中的表达
- 2008年
- RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18成熟蛋白基因的cDNA,克隆到pGEM-T载体,构建重组质粒pGEM-TpIL18,转化E.coliJM109感受态细胞,取PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定.测序结果表明,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为474 bp,编码157个氨基酸.将其分别克隆到表达载体pQE30、pET-28a、pGEX6P-1中,构建重组表达质粒pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18.用IPTG诱导表达,重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子质量分别为19 000、21 000、45 000的重组蛋白.经薄层扫描分析,pQE-mpIL18、pET-mpIL18、pGEX-mpIL18菌体裂解物分别占菌体总蛋白的17%、28%、27%,均以包涵体形式存在.
- 郑兰兰崔保安陈红英贾云飞陈瑞亮方忠意
- 关键词：成熟蛋白原核表达
- 超高效液相色谱法测定鸡蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的残留
- 建立了鸡蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ残留测定的超高效液相色谱法。样品经乙腈提取后，反相液相色谱分离测定，本方法的检出限为10μg/kg。四种苏丹红染料在50～2000ng/mL范围内呈线性相关。在添加平均回收率为80％～10...
- 陈蔷班付国贾振民吴宁鹏宋志超方忠意刘素梅
- 关键词：鸡蛋超高效液相色谱检出限
- 文献传递
- 某养鸽场发生非典型新城疫的诊断和防制
- 2007年
- 鸽新城疫是由鸽源Ⅰ型副黏病毒（新城疫病毒）引起的急性、热性、接触性传染病，主要特征是呼吸困难，下痢，神经紊乱，黏膜和浆膜出血。本病尚无有效的方法治疗，预防本病乃是工作的重点，对于集约化养殖场来说，更是如此。笔者将我省荥阳某养鸽场发生非典型新城疫的诊断及有效措施控制本病的情况报道如下。
- 杨明凡陈红英方忠意崔保安
- 关键词：非典型新城疫鸽场防制集约化养殖场
- 高效液相色谱法测定鸡蛋中4种四环素类抗生素残留量
- 建立了高效液相色谱分析法测定鸡蛋中四环素类抗生素残留量的方法。方法将鸡蛋样品用NaEDTA—Mcllvaine缓冲溶液提取,通过HLB固相萃取柱进行净化,采用高效液相色谱分离,检测波长为350 nm,流动相为乙睛和0.0...
- 方忠意刘素梅宋志超陈蔷杜红鸽朱红继
- 关键词：鸡蛋土霉素四环素金霉素多西环素
- 文献传递
- 动物基因工程疫苗研究进展
- 随着分子生物学及重组DNA技术研究的发展，基因工程疫苗的研究不断深入，新型疫苗种类日益繁多。本文对传统疫苗、新型疫苗发展方向及进展情况作以综述，重点阐述了基因工程疫苗种类及其应用利弊。
- 方忠意崔保安
- 关键词：基因工程疫苗生物制品
- 文献传递
