曹西南
- 作品数:23 被引量:59H指数:5
- 供职机构:昆明医学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学机械工程文化科学更多>>
- 高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害被引量:4
- 2006年
- 目的探讨高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害。方法以体外浸泡式培养的人皮肤表皮细胞为生物材料,以培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性为指标,检测了在不同染毒浓度条件下培养基中的LDH活性,并进行了电镜观察。结果随着染毒剂量的增加,培养基中LDH活性升高,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与阳性对照组相比,差异亦有统计学意义(P<0.01);电镜观察显示,在低浓度条件下,细胞虽可保持结构完整,但表面的绒毛状突起减少,少数细胞胞核内出现空泡(水肿),细胞受到轻微损害。随染毒剂量增加,细胞胞膜破裂,细胞核溶解呈空泡状,乃至细胞大量坏死。结论高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞有直接刺激损害作用,在一定条件下,可损害皮肤屏障,使其更易被吸收,造成机体中毒,应特别注意劳动防护。
- 杨远和周梅贺铭李文辉曹西南
- 关键词:高效氯氰菊酯表皮细胞乳酸脱氢酶电镜观察
- 二磷酸果糖对低温保存兔心肌组织蛋白质的影响被引量:2
- 2006年
- 目的研究二磷酸果糖(FDP)对低温保存兔心肌组织蛋白质的影响。方法兔心肌组织分别在4℃保存于含5mmol.L-1FDP或无FDP的StThomas液中,提取心肌组织蛋白质经SDS凝胶电泳比较,肽质量指纹谱质谱分析和Westernblot鉴定蛋白质分子。结果肽质量指纹谱分析鉴定到β-肌球蛋白重链、莱恩素受体(ryanodinereceptor)、α肌动蛋白、电压依赖的阴离子通道蛋白1(VDAC1)和腺苷酸激酶3等5种蛋白质差异,Westernblot鉴定到β-肌球蛋白重链、蛋白激酶Cε(PKCε)和IgG重链3种蛋白质差异。加入FDP后心肌组织中β-肌球蛋白重链、α肌动蛋白和PKCε得到更好保存。结论FDP可以增加低温保存的兔心肌组织中一些与心功能相关的重要的蛋白质的保存量,以上所述的存在差异的蛋白质,在心脏低温保存条件研究中,具有作为生物标记分子的潜在应用价值。
- 曹西南杨远和
- 关键词:二磷酸果糖心脏肽质量指纹谱
- PKCε与Lck在细胞内直接相互作用的荧光共振能量转移证据被引量:2
- 2002年
- 蛋白激酶Cε亚型 (PKCε)和蛋白酪氨酸激酸Lck均在心肌缺血预适应的信号转导中起着十分重要的作用 .构建PKCε和Lck与绿色荧光蛋白的融合蛋白的真核细胞表达载体 .将其共转染H2 93细胞进行表达 .用荧光显微镜观察到荧光共振能量转移现象 。
- 曹西南平佩佩宋昌旭
- 关键词:PKCΕLCK荧光共振能量转移缺血预适应蛋白质相互作用HELA细胞
- 受精卵原核显微穿刺导入DNA制备转基因兔被引量:2
- 2005年
- 目的:受精卵原核显微DNA注射是转基因动物制备的最常用、最可靠的方法.研究技术上更为简易的受精卵原核显微穿刺导入DNA制备转基因兔的可行性.方法:重组转基因载体pCA-CHA,采用细胞原核显微穿刺将DNA导入兔受精卵制备转基因兔,用PCR和Southern Blot方法鉴定转基因兔.结果:转基因处理后获得仔兔92只,以PCR检测结果计算,转基因总效率为1.63%~2.40%,整合率为11.54%~16.13%;以Southern Blot检测结果计算,转基因总效率为0.27%,整合率为1.92%.结论:受精卵原核显微穿刺导入DNA与受精卵原核显微DNA注射制备转基因兔的结果相当.
- 曹西南熊亚隆纳冬荃
- 关键词:转基因
- 重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达条件的优化
- 2004年
- 目的 :优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒 pUC -CK在大肠杆菌中表达的最佳条件 方法 :含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS -PAGE电泳及Westernblot检测 结果 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的最佳条件为 :含重组质粒大肠杆菌过夜培养时加入 0 1%的葡萄糖增加质粒拷贝数 ;诱导剂(IPTG)的最适工作浓度为 0 5mmol/L ;诱导最适培养温度为 30℃ ;诱导培养时间为 2~ 3h用于检测 ,6~2 4h用于分离纯化 结论 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中成功表达 ,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫 .
- 王芳曹西南
- 关键词:重组质粒CK大肠杆菌质粒拷贝数IPTG
- 离体心脏保存技术的研究进展被引量:1
- 2009年
- 心脏保存在心脏移植过程中维持离体心脏的正常生理功能扮演重要的角色。改进供心的保存技术可以延长供心的保存时间,扩大供心的来源。本文简介了心脏保存的现状和原则;总结了各种离体心脏保存方法,从保护离体心脏功能的角度分析各种保存方法的机制和优缺点。但是,目前心脏保存并没有取得实质性进展,在一些方面仍然存在诸多不明和争议,尚需进一步探究。
- 贺铭曹西南
- 关键词:心脏移植心脏保存
- 通过电子邮件检索文献和获取核酸蛋白质数据
- 1999年
- 简要介绍通过电子邮件, 经济、快捷、方便地进行文献检索和核酸、蛋白质序列及结构数据获取的实用方法. 此方法适合我国国情, 易为广大研究人员采用, 有利于工作和研究.
- 曹西南
- 关键词:电子邮件DNA序列数据
- 二磷酸果糖对心脏作用及机制研究进展被引量:8
- 2004年
- 二磷酸果糖 (FDP)是糖经无氧酵解途径产生的一个重要的中间代谢产物。FDP对缺血缺氧的心脏具保护作用 ,可解除某些药物和化学物质对心肌的毒性作用 ,并有益于低温保存后心脏功能的恢复。外源性FDP能透过心肌细胞膜 ,对心脏有保护作用 ,能防止心肌细胞内钾的外流 ,并与维持心肌细胞内三磷腺苷 (ATP)在较高的稳态水平有密切关系。
- 曹西南杨远和
- 关键词:二磷酸果糖心脏心肌细胞心脏功能恢复
- 兔PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达与部分纯化
- 2004年
- 目的通过构建蛋白激酶Cε原核表达载体以获得纯化的PKCε蛋白。方法将PKCε催化功能域(野生型和突变型)构建至原核表达载体pUC18上形成重组质粒pUC-CK和pUC-CR,将其转化至大肠杆菌DH5α细胞中诱导其高效表达。结果表达产物的SDS-PAGE电泳及Westernblot检测表明,催化功能域在大肠杆菌中成功表达,并对其进行了部分纯化。结论获得纯化的PKCε蛋白,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫。
- 王芳曹西南
- 关键词:PKCΕ催化结构域大肠杆菌
- 兔心肌细胞蛋白质中可能的PKCε直接底物的鉴定被引量:2
- 2003年
- 目的 :利用PKCε酶促放射性磷酸化标记兔心肌细胞蛋白质 ,鉴定出其可能的直接底物 ,为进一步研究奠定基础 .结果 :通过PKCε特异底物竞争抑制、PKCε特异抑制剂Ro 31- 82 2 0、兔心肌细胞蛋白质热变性等分析措施 ,初步用PKCε酶促放射性磷酸化标记 ,从兔心肌细胞蛋白质中鉴定出表观分子量为 5 7kd ,35kd ,2 3kd和 2 0kd的蛋白质的磷酸化与PKCε酶活性相关 ,其中 5 7kd ,2 3kd和 2 0kd 3种蛋白质可被PKCε在体外直接磷酸化 ,并且其磷酸化不受蛋白激酶抑制剂PD980 5 9和SB2 0 35 8的影响 .结论 :5 7kd ,2 3kd和2 0kd 3种蛋白质有可能是PKCε直接底物 .
- 曹西南杨远和孔德瀛李长宣平佩佩
- 关键词:心肌细胞蛋白质蛋白激酶C心肌缺血