王芳
- 作品数：25 被引量：107H指数：5
- 供职机构：昆明医学院更多>>
- 发文基金：云南省教育厅自然科学研究基金云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 个旧矿粉诱导的支气管上皮转化细胞cDNA消减文库的构建
- 2009年
- 目的构建永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B与其受个旧矿粉体外诱导的恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库。方法以BEAS-2B为对照组，以采自个旧井下作业面的矿粉为染毒物在体外成功诱导的恶性转化细胞为实验组，分别提取总RNA；应用SMARTcDNA合成技术，获得充足的dscDNA；应用抑制性消减杂交（SSH）技术分离BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段；再通过T／A克隆和蓝白筛选实验，克隆BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的基因片段，构建二者之间差异表达的cDNA消减文库。结果通过SSH和T／A克隆等技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，文库经扩增后得到107个白色克隆和41个蓝色克隆。结论应用SSH技术成功构建了具有较高消减效率的BEAS-2B与其恶性转化细胞之间差异表达的cDNA消减文库，为进一步研究个旧矿粉致肺癌发生的分子生物学机制奠定了基础。
- 梁锐金克炜王志强高倩阮永华王芳
- 关键词：抑制性消减杂交支气管上皮细胞恶性转化
- 同型半胱氨酸对骨骼肌细胞GLUT4表达和分布的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究高同型半胱氨酸血症对骨骼肌细胞GLUT4表达和膜分布的改变,探讨同型半胱氨酸对葡萄糖摄取的影响.方法 20只6周健康小鼠随机分为对照组(10只)和高同型半胱氨酸血症组(10只),含1.5%的蛋氨酸饮水3个月制造高同型半胱氨酸血症模型;测定空腹状态下血糖和胰岛素;HE染色观察骨骼肌组织形态改变;免疫组织化学和Western Blot检测骨骼肌细胞GLUT4表达和细胞膜上分布.结果高同型半胱氨酸血症组与对照组比较空腹血糖和空腹胰岛素增加(P<0.05),骨骼肌组织结构完整,细胞膜上GLUT4分布降低,GLUT4蛋白质表达无明显差异(P>0.05).结论在骨骼肌组织中,同型半胱氨酸可能通过抑制GLUT4在细胞膜上分布,降低骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取.
- 王雅楠顾玉黄尤光韩毅王芳李树德
- 关键词：高同型半胱氨酸血症骨骼肌细胞GLUT4葡萄糖
- 云锡矿工非小细胞肺癌形态计量和DNA定量检测研究被引量：5
- 1997年
- 对云南锡矿矿工（Ｍ组）、其它地区非矿工（ＮＭ组）非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）不同病变阶段及正常对照（Ｃ组）细胞进行形态计量和ＤＮＡ定量测定比较研究，采用ＣＭＩＡＳ－００７型多功能真彩色病理图像分析仪，选择１６项几何学参数，结合ＤＮＡ含量五项指标对Ｍ、ＮＭ组进行动态观察。结果表明：１云锡矿工和其它地区非矿工ＩＮＳＣＬＣ尽管致癌因素不尽相同，但其形态计量和ＤＮＡ含量测定具有相似变化，ＤＮＡ含量变化与组织学类型也无明显关系。２ＤＮＡ含量的检测是鉴别不典型增生支气管粘膜上皮与肺癌的手段之一。３肺鳞癌癌周有活跃的Ⅱ型肺泡上皮增生，ＤＮＡ定量检测表明其核酸代谢活跃，染色体增殖能力增强，故其可能也是肺鳞癌的组织起源之一。４对有Ⅱ型肺泡上皮增生的患者临床上应严密监测，以利早期预防、早期诊断、早期治疗。５应用多功能真彩色图像分析仪将形态参数和ＤＮＡ定量测定结合起来，配以多因素统计学方法，对于非小细胞肺癌发生发展过程中各个病变阶段的诊断和鉴别诊断有较高的可重复性、可靠性和客观性。
- 金克炜张志勇王芳王芳王芳章宗籍魏永丽
- 关键词：云锡矿工肺癌DNA
- 滇重楼内生细菌分离及抑制人体病原菌活性菌株筛选被引量：15
- 2010年
- 目的分离滇重楼内生细菌,研究其抑制人体病原菌的能力.方法从表面消毒的滇重楼新鲜植株中分离内生细菌.在体外,用提取物抑制金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、普通变形杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌及白色念珠菌生长.结果来自温室的植株分离到更多的内生细菌,植株地下部位中内生细菌比地上部位更多;约60%内生细菌对指示菌有一定抑制作用,其中LRB11抑菌效果较明显.结论由于内生细菌与宿主相互作用,故具抑菌作用的内生细菌可用于新药的开发或中药植物的生防.
- 宣群王芳杨娟
- 关键词：滇重楼内生细菌抑菌活性
- 复方中药康赛德对海洛因依赖猴血清睾酮及睾丸结构病理变化的疗效观察被引量：1
- 2000年
- 目的··:探讨海洛因依赖恒河猴经复方中药康赛德戒断治疗后睾丸结构和功能的恢复情况。方法··:HE染色 ,光镜观察。结果··:在海洛因依赖形成过程中 ,生理盐水对照组(NS组)和康赛德治疗组(CDC组)睾丸均逐渐萎缩变小 ,血清睾酮水平渐进性下降。NS组自然戒断后 ,睾丸体积虽有所恢复 ,但血清睾酮水平持续性下降。自然戒断3个月时 ,睾丸曲细精管全部萎缩 ,成熟精子少或无 ,间质细胞减少或消失 ,间质纤维组织明显增生。在CDC组 ,康赛德治疗后 ,睾丸体积迅速恢复 ,明显大于对照组 (P<0.05) ,血清睾酮水平回升至正常或接近正常(与NS组相比 ,P<0.05)。治疗3个月时 ,睾丸结构基本正常或仅为部分曲细精管萎缩 ,成熟精子较多 ,并可见间质细胞。结论·· :复方中药康赛德能帮助海洛因依赖猴速度更快。
- 王芳杨耘高倩郭玲蒋家雄郭晓红张晓冬张正仙张肇玖侯云成赵永娜徐葵郑春兰董捷
- 关键词：海洛因依赖睾丸睾酮
- 重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达条件的优化
- 2004年
- 目的 :优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒 pUC -CK在大肠杆菌中表达的最佳条件 方法 :含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS -PAGE电泳及Westernblot检测 结果 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的最佳条件为 :含重组质粒大肠杆菌过夜培养时加入 0 1%的葡萄糖增加质粒拷贝数 ;诱导剂(IPTG)的最适工作浓度为 0 5mmol/L ;诱导最适培养温度为 30℃ ;诱导培养时间为 2～ 3h用于检测 ,6～2 4h用于分离纯化 结论 :PKCε催化功能域在大肠杆菌中成功表达 ,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫 .
- 王芳曹西南
- 关键词：重组质粒CK大肠杆菌质粒拷贝数IPTG
- 实验性肝硬化中Leptin及其受体的检测与表达意义被引量：1
- 2005年
- 目的观察Leptin在实验性肝硬化大鼠血清水平及其受体在肝脏免疫组化表达和定位情况,探讨Leptin及其受体在实验性肝硬化发生病理机制中的作用。方法采用硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)腹腔注射诱导肝硬化动物模型,同时设立正常对照组;测量大鼠体长、体重、Lee’指数,分别测定血清血脂水平;采用酶联免疫分析法(enzymelinkedimmunosorbantassay,ELISA)检测血清Leptin含量;免疫组化与计算机图像分析技术观察Leptin受体在肝硬化组、正常对照组的表达和定位特点;各组间进行统计学分析。结果肝硬化动物模型复制成功。肝硬化组血清Leptin增高,与对照组比较差异有非常显著性(t=4.338,P<0.01);肝硬化组Leptin受体表达增高,与正常组比较差异有非常显著性(t=8.104,P<0.01);肝硬化组血清Leptin水平与胆固醇(TC)正相关(r=0.918,P<0.05)。肝硬化组血清Leptin水平与Leptin受体灰度值呈负相关(r=0.-0.80,P<0.01)。结论Leptin受体在肝硬化的肝脏中表达异常升高,尤其见于再生的肝细胞及窦内皮细胞等,提示Leptin参与肝纤维化的发生。
- 屈文东柳利明黄华廖俊赵公芳王芳
- 关键词：LEPTINLEPTIN受体肝硬化
- 海洛因与吗啡依赖恒河猴的病理组织学研究被引量：13
- 1999年
- 目的··：比较海洛因与吗啡恒河猴依赖模型。方法··：利用光镜对恒河猴海洛因及吗啡依赖形成过程中垂体、睾丸、肾上腺等器官组织进行病理形态观察。结果··：在注射海洛因３个月内，垂体从无明显病变转为个别嗜酸性细胞坏死到部分嗜酸性和嗜碱性细胞坏死；下丘脑从无明显病变转为少数神经细胞坏死；肾上腺从无明显病变转为个别束状带细胞水肿到大多数束状带细胞水肿；睾丸从无明显病变转为个别曲细精管萎缩，见成熟精子和间质细胞到大部分曲细精管萎缩到全部曲细精管萎缩，无成熟精子和间质细胞，且自然戒断３个月时垂体、睾丸的病变未得到恢复。注射吗啡３个月时，垂体仅有个别嫌色细胞水肿；下丘脑结构基本正常；睾丸仅为部分曲细精管萎缩，有成熟精子；肾上腺个别束状带细胞水肿，且自然戒断３个月时病变已恢复。结论··：海洛因依赖猴造成垂体、睾丸、肾上腺等组织器官损伤的程度比吗啡依赖猴的更重；在恒河猴海洛因依赖形成过程中，随注射时间延长，组织损伤程度加重。
- 王芳郭晓红郭晓红杨耘高倩张晓冬高倩徐贵丽张肇玖
- 关键词：海洛因依赖吗啡依赖病理组织学
- 兔PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达与部分纯化
- 2004年
- 目的通过构建蛋白激酶Cε原核表达载体以获得纯化的PKCε蛋白。方法将PKCε催化功能域(野生型和突变型)构建至原核表达载体pUC18上形成重组质粒pUC-CK和pUC-CR,将其转化至大肠杆菌DH5α细胞中诱导其高效表达。结果表达产物的SDS-PAGE电泳及Westernblot检测表明,催化功能域在大肠杆菌中成功表达,并对其进行了部分纯化。结论获得纯化的PKCε蛋白,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫。
- 王芳曹西南
- 关键词：PKCΕ催化结构域大肠杆菌
- TAA诱导大鼠肝硬化bFGF的动态表达及作用被引量：1
- 2007年
- 目的:动态观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在TAA(thioacetamide,TAA)诱导大鼠肝硬化形成中不同时期的免疫组化表达和定位情况,探讨其在肝纤维化发生病理机制中的作用及机制。方法:用硫代乙酰胺诱导肝硬化大鼠模型,同时设立正常对照组,采用免疫组化、计算机图像分析等技术,动态观察bFGF在正常对照组及肝硬化模型组不同时期的表达和定位特点,各组间进行统计学比较。结果:肝硬化模型复制成功,bFGF在TAA诱导肝硬化不同发展阶段,其表达逐渐增高,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01),bFGF的表达在肝硬化模型组各个不同阶段与正常组比较,差异有高度显著性(P<0.01)。结论:bFGF在TAA诱导肝硬化发生发展过程中,其表达逐渐增高,提示bFGF在肝纤维化的发生发展过程中起着重要促进作用。
- 张愚曲文东黄华王芳
- 关键词：BFGFTAA肝硬化免疫组化
