徐远峰
- 作品数：10 被引量：11H指数：3
- 供职机构：海南大学农学院更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金海南省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 红海榄液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆与分析
- 2011年
- 根据液泡膜Na+/H+反转运蛋白基因(NHX1)的保守序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到红海榄Na+/H+反转运蛋白基因的cDNA片段,然后采用cDNA末端快速扩增法(RACE)得到RsNHX1基因的全长cDNA序列,GenBank登录号为FJ627273,被命名为RsNHX1。该基因序列的长度为2 094 bp,包含有1个1 614 bp的开放阅读框,编码538个氨基酸。该基因生物信息学分析表明:其氨基酸序列与胡杨PeNHX1(ABY86892)和拟南芥AtNHX1(AAM34759)基因的同源性分别为74%和69%,序列存在较大差异。
- 翟金玲徐远峰马宏伟陈旭峰黄惜
- 关键词：红海榄耐盐
- 红海榄逆转运蛋白基因全长cDNA的克隆与鉴定
- 黄惜翟金玲邓用川徐远峰高艳梅
- 该项目根据液泡膜Na+/H+反转运蛋白基因(NHX1)的保守序列设计引物，通过RT-PCR扩增得到红海榄Na+/H+反转运蛋白基因的cDNA片段，然后cDNA末端快速扩增法(RACE)得到RsNHX1基因的全长cDNA序...
- 关键词：
- 关键词：基因克隆基因序列烟草
- 红树cDNA文库的建立和红树耐盐相关基因的克隆
- 徐远峰
- 关键词：红海榄耐盐CDNA文库NA+/H+逆向转运蛋白
- 红海榄脱水素基因(RsDHN1)的克隆及表达分析被引量：4
- 2010年
- 采用RT-PCR和RACE技术对已获得的红海榄根部其中一个差异表达基因进行克隆,通过Blast分析和序列比对可知,该基因全长cDNA序列包括146bp的5'端非编码区,43bp的3'端非编码区和一个编码241个氨基酸的开放阅读框,命名为RsDHN1基因。该cDNA编码的蛋白具有植物脱水素蛋白的特征性结构,属于SKn类脱水素蛋白,与其它植物的SKn类脱水素蛋白具有43%～55%的氨基酸序列同源性。半定量RT-PCR分析表明,盐胁迫对RsDHN1基因的表达有明显上调作用。
- 马宏伟徐远峰翟金玲翟金玲黄惜
- 关键词：红海榄脱水素RACE耐盐基因
- 抗PRSV转基因番木瓜研究进展被引量：3
- 2009年
- 番木瓜花叶环斑病毒(PRSV)严重影响着热带亚热带的重要水果番木瓜的生产,在物理和化学防治措施效果不佳的情况下,利用病原获得抗性防治PRSV的方法给番木瓜的生产带来一线生机。综述了近年来转基因番木瓜中所采用的PRSV病毒的几个基因及其优缺点。
- 高艳梅翟金玲徐远峰黄惜
- 关键词：番木瓜环斑病毒外壳蛋白复制酶运动蛋白
- 一种快捷有效的构建cDNA文库的方法
- 2009年
- 构建cDNA文库是研究基因组功能基因一种有效的手段，传统的建库方法通常需要在双链cDNA两端分别加上带限制性酶切位点的接头序列，通过酶切使之产生与质粒匹配的粘性末端，然后与质粒连接构成文库。本文介绍一种简单而且不需要核酸内切酶的构建cDNA文库的方法。该方法的主要步骤包括：（1）通过反转录合成cDNA第一条链，通过置换底物的方式在cDNA3’末端合成接头序列。（2）利用cDNA两端的接头引物，通过TaqDNA合成酶PER扩增合成cDNA第二条链。（3）将PCR产生的双链cDNA直接与T-载体连接。（4）将连接物转化大肠杆菌，得到cDNA文库。利用本方法，我们成功构建红树植物红海榄的cDNA文库。PCR结果显示插入的片段分布在O．5～3．0kb之间，大部分cDNA的长度在500—1000bp之间，表明cDNA具有较好的完整性。本方法具有操作简单、高效率、低成本、RNA模板需要量少的特点，而且适用于任何高等生物RNA样品。
- 徐远峰黄文峰高艳梅翟金玲黄惜
- 关键词：红海榄CDNA文库
- 一种构建cDNA文库的方法
- 本发明公开一种构建cDNA文库的方法，其特点是简单快速而且不需要核酸内切酶。该方法的主要步骤包括：(1)以总RNA(或者mRNA)为模板，利用这对引物通过反转录合成cDNA第一条链。(2)利用这对引物通过Taq DNA合...
- 黄惜翟金玲徐远峰
- 文献传递
- 橡胶树HbDHN1基因克隆及表达分析被引量：4
- 2009年
- 采用Macroarray印迹杂交技术从本实验室构建的橡胶树机械伤害诱导的树皮抑制性差减杂交(SSH)cDNA文库中检测到1个差异表达EST。采用RT-PCR和RACE技术获得了该基因全长cDNA序列,包括124bp的5'端非编码区,337bp的3'端非编码区和1个编码224个氨基酸的开放阅读框。该cDNA编码的蛋白具有植物脱水素蛋白的特征性结构,属于SKn类脱水素蛋白,命名为HbDHN1,与其它植物的SKn类脱水素蛋白具有49.0%～68.2%的氨基酸序列同源性。RT-PCR分析表明,机械伤害对HbDHN1基因的表达没有明显影响,受伤组织的脱水显著上调该基因的表达。
- 黄文峰徐远峰黄惜王立丰田维敏
- 关键词：巴西橡胶树脱水素乳管分化机械伤害
- 利用GATEWAYTM技术构建番木瓜环斑病毒CP基因的RNAi表达载体
- 针对传统的通过酶切和连接的构建方法相当耗时费力等缺点,以番木瓜环斑病毒 CP 基因为供试材料,利用 GATEWAY技术快速高效构建双链 RNA 的表达载体的方法,即利用λ噬菌体插入/切除特异序列重组系统将目标基因序列插入...
- 翟金玲高艳梅徐远峰罗越华邓用川林栖凤黄惜
- 关键词：RNAI番木瓜环斑病毒
- 文献传递
- 红海榄逆转运蛋白基因及其克隆与应用
- 本发明公开一种红海榄钠离子逆向转运蛋白基因及其克隆与应用。本发明所提供的红海榄中Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>逆向转运蛋白来源于红海榄Rhizophora stylosa，命名为RsNHX1。R...
- 黄惜徐远峰翟金玲林栖凤
- 文献传递
