高艳梅
- 作品数：7 被引量：5H指数：1
- 供职机构：海南大学更多>>
- 发文基金：海南省教育厅高等学校科学研究项目海南省自然科学基金海南省耐盐作物生物技术重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学理学农业科学医药卫生更多>>
- 红海榄逆转运蛋白基因全长cDNA的克隆与鉴定
- 黄惜翟金玲邓用川徐远峰高艳梅
- 该项目根据液泡膜Na+/H+反转运蛋白基因(NHX1)的保守序列设计引物，通过RT-PCR扩增得到红海榄Na+/H+反转运蛋白基因的cDNA片段，然后cDNA末端快速扩增法(RACE)得到RsNHX1基因的全长cDNA序...
- 关键词：
- 关键词：基因克隆基因序列烟草
- 利用GATEWAYTM技术构建番木瓜环斑病毒CP基因的RNAi表达载体
- 针对传统的通过酶切和连接的构建方法相当耗时费力等缺点,以番木瓜环斑病毒 CP 基因为供试材料,利用 GATEWAY技术快速高效构建双链 RNA 的表达载体的方法,即利用λ噬菌体插入/切除特异序列重组系统将目标基因序列插入...
- 翟金玲高艳梅徐远峰罗越华邓用川林栖凤黄惜
- 关键词：RNAI番木瓜环斑病毒
- 文献传递
- PRSV病毒基因RNAi表达载体构建及番木瓜抗病初步研究
- 高艳梅
- 关键词：番木瓜环斑病毒HC-PRO基因GATEWAY技术
- 抗PRSV转基因番木瓜研究进展被引量：3
- 2009年
- 番木瓜花叶环斑病毒(PRSV)严重影响着热带亚热带的重要水果番木瓜的生产,在物理和化学防治措施效果不佳的情况下,利用病原获得抗性防治PRSV的方法给番木瓜的生产带来一线生机。综述了近年来转基因番木瓜中所采用的PRSV病毒的几个基因及其优缺点。
- 高艳梅翟金玲徐远峰黄惜
- 关键词：番木瓜环斑病毒外壳蛋白复制酶运动蛋白
- 一种快捷有效的构建cDNA文库的方法
- 2009年
- 构建cDNA文库是研究基因组功能基因一种有效的手段，传统的建库方法通常需要在双链cDNA两端分别加上带限制性酶切位点的接头序列，通过酶切使之产生与质粒匹配的粘性末端，然后与质粒连接构成文库。本文介绍一种简单而且不需要核酸内切酶的构建cDNA文库的方法。该方法的主要步骤包括：（1）通过反转录合成cDNA第一条链，通过置换底物的方式在cDNA3’末端合成接头序列。（2）利用cDNA两端的接头引物，通过TaqDNA合成酶PER扩增合成cDNA第二条链。（3）将PCR产生的双链cDNA直接与T-载体连接。（4）将连接物转化大肠杆菌，得到cDNA文库。利用本方法，我们成功构建红树植物红海榄的cDNA文库。PCR结果显示插入的片段分布在O．5～3．0kb之间，大部分cDNA的长度在500—1000bp之间，表明cDNA具有较好的完整性。本方法具有操作简单、高效率、低成本、RNA模板需要量少的特点，而且适用于任何高等生物RNA样品。
- 徐远峰黄文峰高艳梅翟金玲黄惜
- 关键词：红海榄CDNA文库
- 甲基丙烯酸甲酯的原子转移自由基聚合的研究
- 过渡金属催化的原子转移自由基聚合是1995年发现的一种新的活性自由基聚合方法,它以RX(X=C1或Br)为引发剂,过渡金属配位化合物为催化剂,可成功地进行甲基丙烯酸甲酯、苯乙烯等单体的活性自由基聚合。
本文以溴乙酸...
- 高艳梅
- 关键词：甲基丙烯酸甲酯原子转移自由基聚合本体聚合
- 文献传递
- 利用GATEWAY^(TM)技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体被引量：1
- 2009年
- 通过RT-PCR扩增番木瓜环斑PRSV病毒HC-pro基因,序列比对结果表明,克隆到的该基因片段与已知的海南或华南地区已克隆的HC-pro基因只有约92%的同源性,说明PRSV病毒具有较大的变异性。为了培育番木瓜转基因抗病植株,利用pWATERGATE载体和GATEWAYTM技术,成功构建了番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体。具体步骤如下:①设计带特异性重组序列attB的HC-pro基因PCR的引物;②利用该引物进行RT-PCR扩增HC-pro基因;③通过BP反应,将扩增得到的HC-pro基因序列插入入门载体pDONR201中;④通过LR反应将HC-pro基因序列从pDONR201重组到目标载体pWATERGATE中,得到PRSVHC-pro基因的RNAi表达载体。
- 高艳梅翟金玲黄惜
- 关键词：番木瓜环斑病毒RNAIHC-PRO基因
