徐华
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
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- 小鼠睾丸体外培养模型研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对睾酮合成及机制的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响。方法用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸组织。实验分为二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组和4个DEHP剂量染毒组(终浓度0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)。分别培养24、48、72h,每24h通气一次。放射免疫法测定收集培养基中睾酮水平;Elisa法测定收集培养基中抑制素基因β_B基因(INHBβ)水平;实时荧光定量(QT)-PCR检测睾丸组织相关基因表达水平;HE染色观察睾丸组织病理学变化;免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。结果与DMSO溶剂对照组相比,DEHP一定浓度范围内,可使睾酮合成增加,但在DEHP100.0μmol/L染毒48、72h,睾酮合成开始减少。Elisa测定INHBβ在DEHP 0.1μmol/L、1.0μmol/L染毒组合成增加,从DEHP 10.0μmol/L开始合成减少。QT-PCR检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、抗细胞色素P450 17α羟化酶(P450c17)、细胞色素P450侧链裂解酶(P450Scc)、波形蛋白(vimentin)mRNA表达下降,尤其是DEHP 100.0μmol/L剂量组(P<0.05),INHBβmRNA表达无显著变化。HE染色,各组睾丸组织未观察到明显病理学改变。免疫组化检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,蛋白3β-HSD、P450c17、P450Scc表达增强,vimentin表达减弱,尤其是DEHP 10.0μmol/L、100.0μmol/L两个剂量染毒组。结论 DEHP暴露对体外培养睾丸的睾酮合成有影响,其机制可能由于其影响了相关功能基因表达,进而对睾酮合成产生正负调控两种作用。
- 徐华黄洁李敏高志斌朱彦锋李云
- 关键词：器官培养邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯乳鼠睾丸实时荧光定量PCR
- 大豆异黄酮对大鼠睾丸支持细胞的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:研究大豆异黄酮对体外培养的大鼠睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)增殖以及卵泡雌激素受体(folliclestimulating hormone receptor,FSHR)、抑制素α亚基(inhibinα,INHα)、抑制素βB亚基(inhibinβB,INHβB)、雄激素结合蛋白(androgen binding protein,ABP)、转铁蛋白(transferrin,Tf)和波形蛋白(vimentin)mRNA水平的影响。方法:体外培养大鼠SCs,用0.03,0.3,3及30μmol/L的大豆黄酮(daidzein,Dai)和0.05,0.5,5及50μmol/L的染料木黄酮(genistein,Gen)处理细胞,MTT检测细胞增殖,实时荧光定量PCR检测FSHR,INHα,INHβB,ABP,Tf和vimentin mRNA的相对表达量。结果:与对照组相比,其余各组细胞增殖和INHβB,ABP mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),Dai(0.3及3μmol/L)和Gen(0.05μmol/L)组INHαmRNA表达增加,Dai(30μmol/L)和Gen所有浓度组的FSHR mRNA表达下降,Dai(30μmol/L)和Gen(5μmol/L和50μmol/L)组Tf mRNA表达下降,Dai(3μmol/L及30μmol/L)和Gen(50μmol/L)组vimentin mRNA表达下降。结论:大豆异黄酮可能通过抑制SCs重要功能蛋白的mRNA转录而影响其功能发挥,从而对雄性生殖系统产生负面影响。
- 印德娇朱彦锋刘林夕徐华黄洁李云
- 关键词：大豆黄酮染料木黄酮支持细胞实时荧光定量PCR
- 染料木黄酮对体外培养乳鼠睾丸组织全基因表达谱的影响被引量：2
- 2017年
- 目的利用基因芯片技术研究染料木黄酮(Genistein,Gen)对体外培养的小鼠睾丸组织全基因表达谱的影响,从基因水平分析Gen影响睾丸细胞增殖凋亡的作用机制。方法利用旋转通气法体外培养乳鼠睾丸组织,给予5μmol/L Gen干预,同时设立DMSO溶剂对照组。培养72h后提取组织总RNA,用单标Agilent小鼠全基因芯片检测两组睾丸组织基因表达,筛选差异基因,进行基因功能分类。结果与对照组比较,Gen组筛选出84个表达差异有统计学意义的基因(P<0.05),其中47个基因表达上调,37个基因表达下调。按差异基因功能富集分析(GO)分类标准进行分类,筛选出有统计学意义的GO分类14个(P<0.05),主要涉及生殖发育、细胞增殖、细胞周期等功能。结论通过全基因芯片检测发现,Gen主要影响睾丸组织生殖发育、细胞增殖和细胞周期等功能相关基因表达,从而影响精子发生和睾丸细胞的增殖和凋亡,影响睾丸的功能。
- 单靖焱曾香徐华宁艳花谢雪健申雨燕宋杰李云
- 关键词：全基因表达谱染料木黄酮睾丸体外培养
- 雌马酚对体外培养小鼠睾丸3β-HSD、P450Scc和Vimentin表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下雌马酚(Equol)暴露对乳鼠睾丸组织结构、睾酮合成相关酶和波形蛋白(Vimentin)的mRNA及蛋白表达影响。方法用浸浴式通气旋转装置体外培养小鼠睾丸组织。实验随机分为DMSO溶剂对照组和4个Equol剂量组(终浓度为0.01、0.10、1.00、10.00μmol/L),培养72h。HE染色观察睾丸组织病理形态学变化;实时荧光定量PCR检测睾酮合成相关基因及Vimentin表达水平;免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。结果 HE染色结果显示经Equol处理的睾丸组织未观察到明显病理学变化。实时荧光定量PCR结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,Equol各剂量组3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450Scc)、Vimentin mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,3β-HSD、P450Scc、Vimentin的表达在Equol 0.10μmol/L剂量组上调,10.00μmol/L剂量组下调。结论 Equol可影响体外培养的小鼠睾丸3β-HSD、P450Scc、Vimentin表达,对睾丸生理功能可能存在潜在的不利影响。
- 钟灵毓朱彦锋徐华高志斌李敏李云
- 关键词：雌马酚器官培养乳鼠睾丸
- 用小鼠睾丸体外培养模型研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对睾酮合成的影响及机制
- 目的：利用睾丸体外培养方法探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响,探讨相关的分子机制.方法：用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸.实验共分1个DMSO溶剂对照组和0.1...
- 徐华黄洁李敏高志斌朱彦锋李云
- 关键词：器官培养邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯乳鼠睾丸
- 双酚A对体外培养小鼠睾丸睾酮合成的影响及机制被引量：2
- 2013年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下双酚A(BPA)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响。方法采用睾丸器官体外培养方法,将睾丸随机分为DMSO溶剂对照组和4个BPA剂量染毒组(终浓度为10-7、10-6、10-5和10-4mol/L)。分别培养24、48和72h,每24h通气一次。HE染色光镜下观察睾丸组织形态学变化,放射免疫法检测培养液睾酮浓度,免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。实时荧光定量PCR检测睾丸组织相关基因表达水平。结果 10-4mol/L剂量组支持细胞数目减少,部分间质细胞核固缩或呈絮状改变;随着时间的延长睾酮分泌逐渐减少,与DMSO对照组相比,10-5mol/L剂量组在48h时睾酮合成增加(P<0.05),其余各剂量组睾酮分泌降低,以10-4mol/L剂量组较明显(P<0.01);睾酮合成相关酶3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017a羟化酶(P450c17)及波形蛋白(Vimentin)的基因及蛋白表达水平下降。结论 BPA能通过抑制3βHSD、P450scc、P450c17及Vimentin等相关酶的表达,干扰间质细胞睾酮的合成。
- 黄洁徐华高志斌李敏朱彦锋李云
- 关键词：双酚A睾丸睾酮
- 成都市孕妇叶酸相关知识认知现况调查被引量：2
- 2014年
- 目的了解成都市孕妇对服用叶酸知识的认知、执行情况及其知识获取途径,为相关预防神经管畸形(Neural tube defects,NTDs)优生项目提供科学依据。方法对成都市城乡355名孕妇服用叶酸的情况进行面对面问卷调查,采用Epidata3.0建立数据库,运用SAS9.3和SPSS18.0进行Kruskal-Wallis检验和秩相关分析,并采用广义估计方程对知识获取途径进行分析。结果成都市孕妇叶酸服用率为84.90%。高学历是孕妇认知和服用叶酸的促进因素(r s=0.173 8,P=0.016),医务人员是促进服用叶酸认知和执行的主要途径(β=1.786,P=0.000),优生讲座和亲朋好友也是主要获取途径。结论成都市孕妇对服用叶酸预防NTDs知识的认知情况良好。调查对象的高学历水平及知识获取途径的选择均可促进叶酸知识的掌握情况。现阶段孕妇叶酸知识主要获取途径为医务人员、优生讲座和亲朋好友,建议根据不同情况采取多种形式的健康宣传教育。
- 范肖肖秦琰雯赵健犹忆吴艳乔徐华刘俊凤无
- 关键词：孕妇叶酸NTDS知行
- 双酚A对体外培养小鼠睾丸睾酮合成的影响及机制
- 目的：建立小鼠睾丸器官体外培养模型,观察双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠睾酮合成的影响以及3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017a羟化酶(P450c1...
- 黄洁徐华高志斌李敏朱彦峰李云
- 关键词：双酚A睾酮
