张玉娥
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 适于香蕉不同组织的DNA高效提取方法的筛选
- 用CTAB法及其3种CTAB改良法、改良尿素法、SDS法、SDS结合蛋白酶裂解法、及氯化苄法等共8种方法，对香蕉的叶、茎、根、果皮、果肉进行DNA的提取，并对8种方法进行比较。试验结果表明：用氯化苄法提取香蕉的叶、茎、根...
- 张玉娥盛鸥胡春华魏岳荣易干军
- 关键词：香蕉
- 香蕉不同组织的基因组DNA制备方法的比较被引量：2
- 2017年
- 本研究以香蕉的叶、假茎、根、果皮、果肉为材料,比较了CTAB常规法及其3种改良法、SDS法、SDS结合蛋白酶裂解法、改良尿素法、氯化苄法等方法提取基因组DNA的效果,以期筛选出通用性高、操作简便的基因组DNA制备方法。结果表明:氯化苄法不仅能够有效地从叶片、假茎、根系和果肉中提取到高质量的基因组DNA,也适合从果皮中提取少量DNA,其中提取液中添加600μL氯化苄的浓度处理效果最好;尽管CTAB常规法及其改良法能有效地从叶片中提取DNA,但对其他组织部位的提取效果较氯化苄法差;SDS法、SDS结合蛋白酶裂解法和改良尿素法的提取叶片DNA的效果较CTAB法差,也不能从根系和果皮、果肉中提取到高质量DNA。此外,PCR扩增试验结果表明,氯化苄法能满足后续的基于ITS的分子标记鉴定研究。
- 盛鸥张玉娥邓贵明胡春华杨乔松李春雨易干军
- 关键词：香蕉基因组DNA提取氯化苄CTAB
- 东莞大蕉超表达拟南芥CBF1基因及其抗寒性检测被引量：8
- 2012年
- 【目的】研究超表达拟南芥CBF1基因(AtCBF1)对大蕉抗寒性的影响,为从大蕉克隆抗寒相关基因奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法转化东莞大蕉的胚性细胞悬浮系,获得转AtCBF1基因的大蕉植株;利用GUS组织染色、PCR、RT-PCR以及RT-qPCR对转基因植株进行鉴定;比较低温处理后的转基因株系和对照的冷害特征以及超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量等生理生化指标,鉴定转基因大蕉植株的抗寒能力。【结果】试验共获得6个抗性再生转化系。GUS组织染色结果表明,除T1外,其余均为阳性;PCR鉴定结果表明,AtCBF1在6个抗性再生转化系均为阳性,而GUS基因在T1转化系中没有检测出;RT-PCR结果表明,AtCBF1在6个转化系均得到表达,对T1、T2和T3 3个转化系进行RT-qPCR检测发现,AtCBF1基因在3个转基因株系表达水平存在差异;在低温处理下,转基因植株的叶片相对电导率、MDA的累积都低于非转基因植株,而SOD总活性高于对照;低温处理条件下,转基因植株叶片的冷害症状明显轻于对照。【结论】AtCBF1在大蕉中超表达,具有增强大蕉SOD活性,降低因低温导致的MDA含量和离子渗漏率,缓解质膜过氧程度,进而改善大蕉植株抗低温胁迫的能力。
- 刘凯胡春华杜发秀张玉娥魏岳荣易干军
- 关键词：转基因抗寒性
- 拟南芥CBF1基因转化大蕉(Musa ABB cv.Dajiao)及其抗寒性检测
- 为了改良大蕉的抗寒性，将拟南芥抗寒基因CBFI(AtCBF1)重组到质粒pCAMBIA1301中，构建了植物超表达载体p1301-AtCBF1，利用农杆菌介导对大蕉的胚性悬浮细胞(ECS)进行遗传转化，将AtCBF1基因...
- 刘凯胡春华张玉娥魏岳荣易干军
- 关键词：转基因植物抗寒性遗传育种
