胡春华
- 作品数：61 被引量：126H指数：9
- 供职机构：广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省农科院院长基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学政治法律更多>>
- 半矮化香蕉基因编辑载体及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9的香蕉GA20ox2基因编辑载体及其构建方法和应用，针对香蕉基因的序列，设计基因编辑靶位点及其引物，以及在构建香蕉GA20ox2基因编辑载体时结合特定的扩增程序，构建得到合理的s...
- 杨乔松邵秀红易干军胡春华
- 文献传递
- 香蕉细胞工程育种关键技水研究与应用
- 魏岳荣胡春华盛鸥易干军李春雨黄霞邝瑞彬杨乔松黄学林黄秉智杨护董涛黄永红
- 所属科学技术领域：该成果所属科学技术领域为农业种质资源创新技术研究及新品种选育。主要技术内容：建立多个香蕉品种资源的胚性细胞悬浮系；通过体细胞融合途径进行种质创新；建立香蕉高效遗传转化技术体系并进行转基因技术种质创新；利...
- 关键词：
- 关键词：香蕉化学诱变育种
- 香蕉果实酵母双杂交文库的构建及后熟转录因子MaMADS2互作蛋白筛选被引量：2
- 2023年
- [目的]本文旨在鉴定香蕉果实后熟关键调控因子MaMADS2的互作蛋白,深入解析MaMADS2影响香蕉果实后熟过程的分子机制。[方法]以MaMADS2为诱饵利用酵母双杂交文库获得候选互作蛋白,通过克隆候选互作基因编码区进行点对点酵母双杂交试验来验证互作情况;利用转录组学分析互作蛋白相关基因在后熟过程中的表达情况;利用双分子荧光互补试验鉴定重要互作蛋白与MaMADS2的互作;最后用蛋白免疫印迹分析MaMADS2蛋白在香蕉后熟过程中的表达。[结果]成功构建了果实在乙烯利催熟下的cDNA文库,初级和次级文库的库容分别为2.9×10^(6)和3.2×10^(6)CFU·mL^(-1),平均插入片段大小在1200 bp以上,可满足后续酵母双杂交筛选的要求。最终共鉴定出7个互作蛋白,其中有2个MADS-box转录因子,3个E3泛素连接酶,2个具有转录抑制作用的蛋白。转录组数据表明,乙烯利可抑制2个MADS-box基因的表达,而1-甲基环丙烯(1-MCP)对其表达起诱导作用。双分子荧光互补试验表明,MaMADS2与MADS-box转录因子Ma04_p30020.1存在互作关系。蛋白免疫印迹分析显示,MaMADS2在后熟过程中蛋白水平逐渐降低,这与其可以和E3泛素连接酶互作是一致的。[结论]通过构建高质量的果实cDNA文库与酵母双杂交筛库技术,鉴定出多个与MaMADS2互作的蛋白,并明确了MaMADS2与另一MADS-box转录因子Ma04_p30020.1之间存在明显的互作关系。
- 王川盛鸥窦同心李斌胡春华杨乔松邓贵明董涛李春雨易干军毕方铖
- 关键词：香蕉果实成熟
- 利用基因枪法和液体培养基抗性筛选的香蕉遗传转化方法
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种利用基因枪法和液体培养基抗性筛选的香蕉遗传转化方法，所述利用基因枪法和液体培养基抗性筛选的香蕉遗传转化方法包括：材料处理；基因枪轰击；恢复培养；液体培养基筛选；体细胞胚诱导筛选；成熟的抗...
- 黄永红胡春华
- 文献传递
- 利用液体筛选系统进行根癌农杆菌介导香蕉基因转化的方法
- 本发明公开了一种利用液体筛选系统进行根癌农杆菌介导香蕉基因转化的方法，旨在提供一种能极大提高香蕉转化效率，显著提高转基因植株得率的方法。它包括将香蕉ECS与携有含有目的基因的质粒的根癌农杆菌共培养；将共培养后的香蕉ECS...
- 胡春华易干军魏岳荣黄永红
- 文献传递
- 香蕉-尖孢镰刀菌互作机理及抗病育种研究进展被引量：10
- 2020年
- 由土壤真菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense(Foc)引起的香蕉镰刀菌枯萎病是全世界范围内严重威胁香蕉生产的毁灭性病害。目前已发现Foc的4个生理小种。20世纪70年代,Foc 1号生理小种造成我国华南地区的龙牙蕉和粉蕉种植园大面积发病;90年代中后期,在广东省的香牙蕉种植园发现Foc 4号生理小种,并且迅速向其他香蕉产区蔓延。目前,国内各香蕉主产区均有报道发生Foc 4号生理小种引起的香蕉枯萎病,该病已成为制约我国香蕉生产的最主要因素。对香蕉枯萎病菌侵染过程以及香蕉枯萎病致病机理、抗性机制、抗病品种选育、抗性种质筛选及抗病性鉴定、防治等多个领域取得的研究进展进行了概述,并对今后研究方向进行了展望,主要包括:(1)在继续研究已有抗病品种对Foc TR4抗性的同时,要进一步深入研究Cavendish对Foc 1号生理小种的抗性;(2)利用已经建立的香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,获得香蕉枯萎病抗病品种,并进一步应用寄主植物诱导的基因沉默技术(HIGS)获得更加持久稳定的抗病性;(3)将已经建立的香蕉试管苗离体水培系统应用于香蕉-Foc互作研究。
- 吴元立杨乔松李春雨黄秉智董涛盛鸥毕方铖邓贵明胡春华高慧君窦同心何维弟刘思文易干军
- 关键词：香蕉镰刀菌枯萎病抗性机制抗病品种选育抗病性鉴定
- 一种香蕉果指测力仪
- 本发明公开了一种香蕉果指测力仪，包括动力推动组件、果实夹持组件和拉力测量组件；其中，所述果实夹持组件包括果实弹力夹和果柄弹力夹，所述果实弹力夹用于夹持香蕉果实部位，果柄弹力夹用于夹持香蕉果柄；所述动力推动组件和果实夹持组...
- 邓贵明盛鸥易干军何维弟胡春华董涛李春雨杨乔松毕方铖窦同心高慧君
- 文献传递
- 一种番木瓜果实白斑病的防治方法
- 本发明涉及一种番木瓜果实白斑病的防治方法，本方法是在番木瓜开始采果1个月后每月补充一次微量元素肥：硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硝酸钙或石灰、叶面肥等，在施有机肥、鸡粪，N、P、K、B等大量元素肥后，将石灰按每亩30～60千...
- 许林兵扬护黄秉智魏岳荣易干军吴元立李春雨胡春华
- 文献传递
- 农杆菌介导GUS基因转化贡蕉的研究
- 本文以贡蕉‘Pisang Mas'(AA)胚性悬浮细胞系为转化受体，通过农杆菌介导gusA基因的转化，优化和完善农杆菌介导的香蕉遗传转化体系，为更多外源目的基因转入香蕉奠定基础。
- 胡春华魏岳荣易干军黄永红
- 关键词：农杆菌介导GUS基因遗传转化体系
- 文献传递
- 香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系的建立被引量：27
- 2017年
- 【目的】建立香蕉CRISPR/Cas9基因编辑技术体系,为在香蕉上利用CRISPR/CAS9技术开展香蕉基因功能研究和香蕉育种工作开辟新的路径。【方法】根据香蕉A基因组八氢番茄红素脱氢酶(phytoene dehydrogenase,PDS)基因组序列,利用在线工具ZiFiT Targeter Version 4.2确定合适的CRISPR/Cas9靶标序列,选择其中一个位点作为靶标位点,设计包含靶标基因MaPDS序列的sgRNA。利用一套改良的CRISPR/Cas9多靶点载体系统,以pYLg RNA-Lac Z-U6a质粒为模版,Overlapping PCR法构建U6a-sgRNA表达盒,再利用Golden Gate Cloning法将U6a-sgRNA表达盒克隆到pYLCRISPR/Cas9载体中,构建以MaPDS为靶标基因的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。构建的质粒含Cas9p和sgRNA表达盒,其中Cas9p由P_(Ubi)启动子驱动,sgRNA由水稻来源的RNA启动子U6a驱动。将构建好的载体转入农杆菌EHA105,转化香蕉主栽品种巴西蕉胚性细胞悬浮系,获得抗性再生植株。设计PCR引物扩增包含靶标序列的MaPDS序列片段,检测和分析再生植株MaPDS被编辑的情况。【结果】试验选择MaPDS作为CRISPR/Cas9靶标基因,设计一个靶标位点,利用Overlapping PCR法获得了U6a-sgRNA表达盒,利用Golden Gate Cloning法将其克隆到pYLCRISPR/Cas9的Bsa I位点,成功构建了针对MaPDS的pYLCRISPR/Cas9-sgRNA载体。经过农杆菌浸染、抗性筛选、抗性胚诱导、萌发及生根,最终获得抗性独立转化株系129个。其中,71个株系出现白化表型,产生白化表型的几率达55%。失绿突变体的出现意味着MaPDS蛋白功能丧失。随机取转化株系中的白化表型株系33个和正常表型株系14个,提取其叶片基因组DNA,扩增含有MaPDS的靶位点片段,序列分析结果表明,白化表型株系的MaPDS靶位点序列发生了基因编辑。主要是在靶位点附近增加1个碱基T或A,或是在靶位点附近或下游发生碱基颠换或转换,出现非靶标位点突变。这些突变形式均能导致MaPDS蛋白翻译错误,从而使MaPDS蛋
- 胡春华邓贵明孙晓玄左存武李春雨邝瑞彬杨乔松易干军
- 关键词：香蕉
