张一帆
- 作品数：6 被引量：17H指数：2
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- T细胞表位对新型冠状病毒疫苗诱导抗体反应的影响
- 2022年
- 目的通过构建严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)S1蛋白与通用型辅助性T淋巴细胞表位(pan HLA DR-binding epitope,PADRE)融合的DNA疫苗,探讨PADRE对S1蛋白DNA疫苗诱导抗体水平的影响。方法以pJW4303质粒为载体分别构建表达S1蛋白的重组质粒(pJW4303-S1)、表达S1和PADRE融合蛋白的重组质粒(pJW4303-S1-PADRE)。以人源密码子优化的SARS-CoV-2刺突蛋白基因为模板设计引物,PCR扩增获得基因片段,并将其克隆入真核表达载体pJW4303。对pJW4303-S1、pJW4303-S1-PADRE进行PCR扩增和酶切,产物通过琼脂糖凝胶电泳验证,并将重组质粒进行测序。构建正确的质粒转染293T细胞,Western blot验证蛋白体外表达情况。以C57BL/6小鼠为实验动物并分组,采用不同的免疫接种策略进行动物免疫,每次免疫间隔2周,免疫前采血,第6次免疫2周后处死小鼠并采血。通过ELISA检测不同免疫策略诱导的针对SARS-CoV-2 S蛋白受体结合域(receptor binding domain,RBD)的特异性抗体水平及其亲和力指数。结果PCR扩增和酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果及质粒测序结果表明质粒构建成功;Western blot结果表明这2个质粒可以在体外稳定表达S1蛋白、S1融合PADRE蛋白;ELISA结果显示,pJW4303-S1、pJW4303-S1-PADRE单次免疫均可以诱导产生明显的针对RBD的抗体水平(P<0.0001,P=0.0034)。不同的免疫策略在进行6次免疫后,针对RBD的特异性抗体水平在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。抗体亲和力检测结果显示,第6次免疫后不同免疫策略诱导的针对RBD的抗体亲和力指数差异也无统计学意义(P>0.05)。结论pJW4303-S1、pJW4303-S1-PADRE均具有较强的体液免疫原性,但PADRE不能进一步提高S1蛋白DNA疫苗的体液免疫原性。
- 李少帅张一帆万延民闫冬梅
- 关键词：抗体滴度DNA疫苗刺突蛋白
- Pokemon在肾癌发生发展中的作用被引量：1
- 2019年
- 目的 探讨Pokemon在肾癌发生发展中的作用.方法 培养人肾透明细胞腺癌细胞786-0,构建抑制Pokemon表达的慢病毒载体Lv-shPokemon,细胞培养后随机分为两组,转染组加入Lv-shPokemon慢病毒载体,阴性对照组加入Lv-scrambled慢病毒载体,感染复数(MOI)为50.首先用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组细胞Pokemon蛋白的表达,证实转染是否成功.然后用噻唑蓝(MTT)实验检测两组786-0肾癌细胞增殖,并比较增殖率.最后用Transwell小室检测786-0肾癌细胞侵袭能力,并在显微镜下计算穿膜细胞数.应用SPSS 17.0统计软件分析,计量资料用均值±标准差(Mean±SD)表示,两样本均数比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 慢病毒转染后,Lv-shPokemon组Pokemon的蛋白表达水平(相对于内参的平均灰度值为0.111±0.019)明显低于Lv-scrambled组(相对于内参的平均灰度值为0.759±0.084),差异有统计学意义(t=16.784,P<0.01).与Lv-scrambled组肾癌细胞增殖率[(100.00±11.82)%]比较,Lv-shPokemon组肾癌细胞的增殖率[(58.00±6.69)%]明显降低,差异有统计学意义(t=6.862,P<0.01).Lv-shPokemon组肾癌细胞的穿膜数[(29±4)个]明显低于Lv-scrambled组[(120±17)个],差异有统计学意义(t=11.651,P<0.01).结论 抑制Pokemon可以降低肾癌细胞的增殖和减弱肾癌细胞的侵袭能力.
- 王利辉李云龙张一帆乔保平
- 关键词：肾癌POKEMON慢病毒载体增殖
- 两种手术方式治疗射精管梗阻临床疗效分析被引量：12
- 2013年
- 目的比较经尿道射精管口切开术（Transurethral resection of ejaculatory ducts,TURED）与精囊腺镜下射精管内切开术治疗射精管梗阻引起的无精子症临床疗效.方法系统性回访我院于2009年7月至2012年6月住院行手术治疗并完成随访的射精管梗阻病人59人,其中 A组27人,行经尿道射精管口电切术（TURED）;B组32人,行精囊腺镜下射精管内切开术.术前体检双侧睾丸正常,附睾穿刺可见成熟精子.经直肠彩超（TURS）提示双侧精囊腺均存在,同时合并射精管扩张、精囊腺囊肿等射精管梗阻的证据.精液常规均未发现精子,pH〈7.1,精浆生化结果提示果糖含量明显减少.术后2~3月回访复查精液分析及并发症状况.结果在附睾炎的发生率、并发症的总发生率方面,B组较A组明显降低,差异具统计学意义（P〈0.05）.两者术后复查精液分析各项指标及受孕率,差异无统计学意义.结论精囊镜技术是一种安全、有效的治疗射精管梗阻的手术方式.
- 张卫星贾东辉王瑞张天标李锐张一帆王朝亮
- 关键词：无精子症射精管畸形
- 神经吻合促进大鼠膀胱功能恢复的研究
- 2019年
- 目的 探讨神经端侧吻合对神经源性膀胱大鼠膀胱功能恢复的作用。方法 40只健康成年雄性SD大鼠,体重240~280 g,按随机数字表法分为神经端侧吻合组(ETS,n=15),未吻合组(NC,n=15)和空白对照组(BC,n=10)。ETS组大鼠先离断左侧腰6(L6)和骶1(S1)脊神经前后根,然后将左侧L6前根端侧吻合到左侧L4前根;NC组大鼠只离断左侧L6和S1脊神经前后根,不进行神经吻合;BC组大鼠不做任何处理,作为空白对照组。术后4个月,3组大鼠行尿动力学测定和神经根电刺激膀胱压力测定,比较不同组大鼠的膀胱功能。结果 电刺激ETS和BC组大鼠神经根膀胱压力升高分别为(18.3±2.1) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)和(34.9±3.1) mmHg,差异有统计学意义(t=15.317,P<0.01)。ETS组大鼠的充盈期最大膀胱测压容积[(2.09±0.26) ml]、残余尿量[(1.12±0.21) ml]和膀胱顺应性[(0.249±0.101) ml/mmHg]较NC组大鼠[充盈期最大膀胱测压容积(3.13±0.44) ml、残余尿量(2.69±0.33) ml和膀胱顺应性(0.348±0.127) ml/mmHg]小(t=7.184,P<0.01;t=14.130,P<0.01;t=2.128,P<0.05),但较BC组大鼠[充盈期最大膀胱测压容积(0.33±0.07) ml、残余尿量(0.06±0.02) ml和膀胱顺应性(0.022±0.012) ml/mmHg]大(t=20.733,P<0.01;t=15.821,P<0.01;t=7.031,P<0.01)。ETS和BC组大鼠排尿期最大逼尿肌压[(28.2±2.9) mmHg和(30.3±2.8) mmHg]大于NC组大鼠[(18.8±1.7) mmHg](t=9.446,P<0.01;t=11.504,P<0.01),ETS和BC组大鼠排尿期最大逼尿肌压差异无统计学意义(t=1.747,P>0.05)。结论 神经端侧吻合可以部分恢复大鼠膀胱的神经支配以及受损的膀胱功能。
- 王利辉李云龙张一帆乔保平文建国
- 关键词：神经源性膀胱神经端侧吻合尿动力学
- HIV感染者接种新型冠状病毒疫苗的必要性及免疫效果研究进展
- 2022年
- 目前,接种新型冠状病毒疫苗(简称新冠疫苗)是预防严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染及降低新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)重症率、死亡率的重要措施之一。人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者(HIV infector)是COVID-19的高风险人群,多国疾病预防控制机构和相关学术团体均建议优先为HIV感染者接种新冠疫苗,且已有研究显示HIV感染者接种新冠疫苗后的益处远大于风险。现通过梳理和总结近两年的相关研究,就HIV感染者接种新冠疫苗的必要性、接种效果、影响HIV感染者接种新冠疫苗效果的因素及接种新冠疫苗对HIV感染者的影响等作一概述,以期为HIV感染者新冠疫苗预防接种提供参考。
- 张一帆(综述)张一帆王万海
- 关键词：人类免疫缺陷病毒HIV感染者安全性有效性
- 自然不孕和健康体检的育龄妇女孕前TORCH感染状况的比较分析被引量：4
- 2022年
- 目的了解自然不孕妇女和健康体检的育龄妇女孕前TORCH感染状况。方法采用ELISA法对2018年12月至2019年11月期间郑州大学第一附属医院生殖医学中心进行医学干预受孕的自然不孕育龄妇女11597名和健康体检育龄妇女1547名进行TORCH特异性IgM和IgG抗体检测。结果自然不孕育龄妇女TORCH IgM抗体总阳性率为2.42%,健康体检育龄妇女为2.26%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.15,P=0.70)。自然不孕和健康体检的育龄妇女中IgM抗体阳性率从高到低分别是弓形虫(Tox)-IgM(0.99%和0.90%)、风疹病毒(RV)-IgM(0.67%和0.90%)、单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ-IgM(0.34%和0.26%)、HSVⅡ-IgM(0.22%和0.13%)和巨细胞病毒(CMV)-IgM(0.20%和0.06%),其差异均无统计学意义;IgG抗体阳性率从高到低分别是CMV-IgG(96.20%和93.47%)、HSVⅠ-IgG(93.39%和91.40%)、RV-IgG(90.87%和88.49%)、HSVⅡ-IgG(14.26%和9.18%)和Tox-IgG(4.44%和4.40%),除Tox-IgG抗体外,自然不孕妇女其他病原体IgG抗体阳性率均高于孕前咨询健康体检育龄妇女,差异均有统计学意义(P<0.05)。在不同年龄组间,自然不孕和健康体检的育龄妇女中IgM抗体阳性率间差异均无统计学意义,而在IgG抗体方面,其>35岁组的Tox-、CMV-、HSVⅠ-和HSVⅡ-IgG抗体阳性率普遍高于20~35岁组,其中在健康体检育龄妇女>35岁组中HSV I-IgG抗体阳性率显著性高于20~35岁组(χ^(2)=4.15,P=0.042),在自然不孕育龄妇女>35岁组中HSVⅠ-和HSVⅡ-IgG抗体阳性率均显著性高于20~35岁组(χ^(2)=9.82,P=0.0017;χ^(2)=50.59,P<0.0001);但RV-IgG抗体阳性率均为20~35岁组显著性高于>35岁组(自然不孕组:χ^(2)=19.52,P<0.0001;健康体检组:χ^(2)=9.95,P=0.0016)。在不同季节间,仅自然不孕育龄妇女群体中Tox-和CMV-IgM抗体阳性率差异存在统计学意义,其中Tox-IgM抗体阳性率夏季和秋季中较高,CMV-IgM抗体阳性率仅在秋季中较高。结论本区域内自然不孕育龄妇女和健康体检育龄妇女中TORCH IgM抗体间无�
- 王万海张一帆常谦孟宪春魏高辉李阳明亮
- 关键词：育龄妇女TORCH
