尢家騄
- 作品数：15 被引量：99H指数：7
- 供职机构：中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 热休克对心肌细胞中αB-晶状体蛋白移位及表达的影响被引量：10
- 2001年
- 采用热休克对新生大鼠心肌细胞进行处理 ,观察αB 晶状体蛋白在细胞内的分布及其表达变化。结果 :①Western blot显示热休克后胞浆中可溶性αB 晶状体蛋白迅速移位至细胞内的不溶性结构中 ,2h左右基本复位 ;②免疫双荧光细胞化学显示热休克导致αB 晶状体蛋白在细胞浆内发生分布变化 ,而HSC70从胞浆向胞核移位 ;③免疫电镜定量分析进一步证实αB 晶状体蛋白在热休克时主要移向Z线及核膜等细胞骨架部位 ;④Northern blot显示热休克诱导心肌细胞αB 晶状体蛋白mRNA的表达增加。热休克处理使αB 晶状体蛋白迅速移位至细胞骨架 ,表明其在心肌预适应早期相中可能发挥保护作用。而αB 晶状体蛋白的诱导表达 ,可能是心肌预适应延迟相保护的重要机制之一。
- 肖卫民袁开宇袁灿王慷慨尢家騄肖献忠
- 关键词：热休克蛋白细胞培养心肌缺血缺血预适应
- 山莨菪碱对氧自由基损伤牛肺动脉内皮细胞的保护作用被引量：1
- 1992年
- 本文用外源性氧自由基产生系统(黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶)及酵母多醣激活的嗜中性白细胞引起体外培养的牛肺动脉内皮细胞损伤,发现培养液中丙二醛及乳酸脱氢酶含量升高,6-酮PGF_(1α)减少,嗜中性白细胞粘附率增加,光境及电镜示细胞形态受埙。山莨菪碱(0.1～0.2mg)可显著减少上述变化,其疗效达到超氧化物歧化酶和过氧化氢酶合用时疗效的水平。
- 唐燕罗正曜尢家騄罗涵
- 关键词：嗜中性白细胞山莨菪碱氧自由基
- 核转录因子-κB在热休克预处理抑制过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用被引量：15
- 2005年
- 目的探讨热休克预处理抑制氧化应激损伤心肌细胞的分子机制。方法采用1mmol/L的过氧化氢(H2O2)作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞;用总抗氧化能力检测试剂盒及福林酚法检测心肌细胞中总抗氧化能力的变化;用蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测热休克蛋白70(HSP70)、αB晶状体蛋白、核转录因子κB(NFκB)抑制物(IκB)含量;免疫组化检测NFκB及HSP70在细胞内的分布情况。结果1与H2O2(1mmol/L,3h)损伤组比,热休克预处理组(43℃1h,恢复6h)的总抗氧化能力明显增加(P均<0.01);2心肌细胞经热休克预处理(43℃1h)后3h,HSP70、αB晶状体蛋白、IκBα的表达均增加,6～12h达高峰,并可维持至24h;3与正常心肌细胞比较,H2O2(1mmol/L)处理的心肌细胞中IκBα的含量明显下降,而热休克预处理则可抑制H2O2所致的这种变化;4H2O2(1mmol/L,30min)可使心肌细胞胞质中的NF-κB及HSP70向胞核移位,若先经热休克预处理(43℃1h,恢复6h)则可使这种移位显著减少。结论热休克预处理可抑制H2O2所致的心肌细胞损伤,其保护作用可能与其诱导HSP70、αB晶状体蛋白及IκBα的表达,从而抑制NF-κB的活化有关。
- 涂自智肖卫民刘梅冬尢家騄肖献忠
- 关键词：核转录因子-ΚB热休克预处理过氧化氢心肌细胞损伤
- 开闭复方对内毒素休克大鼠微循环的影响被引量：25
- 1995年
- 本实验观察了中药开闭复方对重症内毒素休克大鼠骨骼肌微循环的保护作用.结果显示:中药开闭复方能明显改善骨骼肌微循环,延长动物存活时间,提高存活率.本结果为临床应用中药开闭复方抢救重症感染性休克提供了实验依据.
- 皮业庆陈广文尢家騄罗正曜万兰清马超英吴伟江光明
- 关键词：内毒素休克微循环血流动力学
- 参附注射液对内毒素休克大鼠保护作用的实验研究被引量：4
- 1996年
- 感染性休克中医辨证为闭证、脱证或内闭外脱证。本实验用大鼠内毒素休克动物模型和中医固脱法,从微循环角度观察了中药制剂参附注射液对内毒素休克大鼠的保护作用。结果显示:参附注射液能提高内毒素休克大鼠存活率,延长存活时间,明显改善微循环,促进血压恢复。为临床应用固脱中药参附注射液抢救感染性休克提供了实验依据。
- 陈广文皮业庆尢家騄罗正曜万兰清马超英
- 关键词：感染性休克存活率微循环参附注射液
- 用cDNA微阵列探讨地塞米松抗小鼠内毒素休克的分子机理
- ＜正＞ 目的:采用cDNA微阵列技术比较地塞米松预给药与治疗性给药对小鼠内毒素休克的不同效果及其基因表达谱的差异,寻找与内毒素休克发病密切相关的基因及信号传导途径,从基因组水平为揭示内毒素休克的发生机制及糖皮质激素抗内毒...
- 赵震宇袁开宇刘梅冬刘瑛陈广文尢家騄肖献忠
- 文献传递
- NF-κB/I-κB在过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用机制被引量：8
- 2004年
- 【目的】探讨氧化应激损伤心肌细胞的分子机制。【方法】采用 0 .5mmol/L过氧化氢 (hydrogenperoxide ,H2 O2 )作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞 ;采用胎盘蓝染色检测细胞死亡率 ,乳酸脱氢酶 (LDH)测定试剂盒检测其释放率 ,末端标记检测细胞凋亡 ,Westernblot检测NF κB内源性抑制蛋白I κB (inhibitorκB ,I κB)含量 ,免疫组化检测NF κB在细胞内的分布情况。【结果】①H2 O2 损伤 3h ,心肌细胞死亡率和LDH释放率均较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ;②H2 O2 损伤 2 4h ,出现大量心肌细胞凋亡 ;③I κB在H2 O2 损伤 5min即减少 ,15min时减至最低 ,而后逐渐恢复 ;④H2 O2 损伤 0 .5h可引起心肌细胞中NF κB从胞浆向胞核移位 ,2h后复位 ;⑤与单纯损伤组比 ,NF κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 (pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)能明显降低心肌细胞LDH释放率 (P <0 .0 1)。【结论】在H2 O2 所致心肌细胞损伤中 ,既有坏死 ,又有凋亡的发生 ,而NF κB/I κB信号通路的激活可能介导了H2 O2 所致的心肌细胞损伤。
- 涂自智肖卫民刘梅冬尢家騄肖献忠
- 关键词：心肌过氧化氢NF-ΚB
- 采用蛋白质工程技术将αB-晶状体蛋白导入心肌细胞的初步研究被引量：1
- 2002年
- 为将αB 晶状体蛋白 (αB crystallin ,αB C)导入心肌细胞 ,采用蛋白质工程技术将人αB 晶状体蛋白全长cDNA基因克隆至具有细胞膜通透能力的膜移位序列 (membrane translocatingsequence,MTS)的碱基顺序的下游 ,在大肠杆菌中表达谷胱甘肽 5 转移酶 (GST) MTS αB C融合蛋白 .用谷胱甘肽 Sepharose4B亲和层析分离表达产物 ,用Xa因子将其中GST切除 ,并通过阴离子交换层析纯化MTS αB C .纯化的MTS αB C在SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)上呈单一条带 ,分子质量 2 3ku ;免疫印迹显示GST MTS αB C与MTS αB C均能为人αB C抗体识别而在相应位置出现清晰条带 .GST MTS αB C与MTS αB C均有分子伴侣活性 .用异硫氰荧光素 (FITC)标记的MTS αB C与心肌细胞共培养后 ,在荧光显微镜下观察到其进入了心肌细胞 .
- 蒋磊刘双袁灿肖卫民王慷慨尢家騄肖献忠
- 关键词：蛋白质工程心肌细胞心肌损伤分子机制
- NF-κB在热休克预处理减轻TNF-α所致内皮细胞凋亡中的作用被引量：6
- 1999年
- 目的：探讨核转录因子－κＢ（ＮＦ－κＢ）在热休克预处理减轻肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）所致内皮细胞凋亡中的作用。方法：将培养牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣ）于４２℃孵育１ｈ，３７℃再培养１６ｈ后，用ＴＮＦ－α（２５００Ｕ／ｍＬ）损伤２４ｈ，观察ＢＰＡＥＣ形态学变化、ＤＮＡ断裂百分率，抽提ＤＮＡ作琼脂糖电泳，以确定细胞凋亡情况。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析７０ＫＤ－热休克蛋白（ＨＳＰ７０）合成、ＮＦ－κＢ抑制蛋白Ｉ－κＢα量的改变以及诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）的生成。凝胶滞留法检测ＮＦｋＢ活性，免疫组织化学染色法分析ＮＦｋＢ的移位。结果：热休克预处理可明显减轻ＴＮＦ－α所致ＢＰＡＥＣ凋亡，表现为与ＴＮＦ－α损伤组相比，凋亡细胞减少，ＤＮＡ电泳未出现明显“梯状”条带，ＤＮＡ断裂百分率降低。进一步实验发现热休克预处理可诱导ＢＰＡＥＣ合成ＨＳＰ７０，并可抑制ＴＮＦ－α引起的ＢＰＡＥＣ的Ｉ－κＢα的降解、ＮＦ－κＢ向细胞核的移位、ＮＦ－κＢ与ＤＮＡ的结合活性，以及ｉＮＯＳ的生成。结论：热休克预处理可减轻ＴＮＦ－α所致ＢＰＡＥＣ凋亡，其机制与ＨＳＰ７０阻断Ｉ－κＢα降解，从而抑制ＮＦ－κＢ活化，抑制ｉＮＯＳ转隶合成有?
- 钟林尢家騄肖献忠孙去病
- 关键词：心肌损伤NF-KB热休克蛋白TNFΑ
- H2O2致体外培养动脉内皮细胞损伤及山莨菪碱保护被引量：7
- 2009年
- 目的：实验以过氧化氢（H2O2）损伤体外培养动脉内皮细胞（AEC），对过氧化氢介导内皮细胞损伤、凋亡的机制进行探讨，观察山莨菪碱（Ani）是否抑制H2O2介导的AEC损伤、凋亡，并探讨Ani保护损伤、凋亡的机制。方法：体外培养AEC随机分组：对照组（正常培养AEC）；H2O2损伤组（0．5mmol／L H2O2损伤12h）；Ani组（不同浓度Ani：0．05，0．1，0．2mg/mL处理45min后加0．5mmol／L H2O2损伤12h）。结果：1．低浓度H2O2（0．5mmol／L）可以损伤AEC并诱导凋亡。H2O2损伤组台盼蓝着染率及LDH释放率均高于对照组（P〈0．01）；细胞总抗氧化能力（T—AOC）下降（比对照组P〈0．01）；琼脂糖凝胶电泳发现凋亡细胞的梯状电泳条带；细胞荧光染色见凋亡形态特征。2．Ani对H2O2诱导的内皮细胞损伤具保护作用。Ani组与H2O2损伤组比较，台盼蓝着染率及LDH释放率下降；T—AOC上升；在Ani0．2mg／mL组DNA琼脂糖凝胶电泳未见凋亡细胞特征性的梯状电泳条带；荧光染色未见凋亡细胞特征。结论：1．低浓度过氧化氢使AEC总抗氧化能力明显下降，耗竭细胞抗氧化能力，可致AEC的损伤、凋亡。2．山莨菪碱能减少AEC抗氧化能力的消耗，维持抗氧化能力平衡，保护0．5mmol／L H2O2介导的AEC损伤、凋亡。
- 葛磊尢家騄李康华罗正曜
- 关键词：动脉内皮细胞细胞损伤山莨菪碱抗氧化能力
