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不同浓度TFtb对淋巴细胞增殖的影响: 转移因子是从由某种抗原预激发的机体内提取的,将它注射给受者,能使受者在首次接触该抗原时就发生继发性免疫应答。本实验通过研究结核特异性转移因子(Tubercuiosis transfer factor,TFtb)在体外对巨...; 肖凌刘胜武夏飞; 文献传递

不同浓度结核特异性转移因子对巨噬细胞呈递抗原作用的影响被引量：7: 2004年; 目的 :通过研究结核特异性转移因子 (transferfectortuberculosis,TFtb)对巨噬细胞促进BCG预致敏淋巴细胞增殖反应的影响 ,探讨转移因子 (TF)在传递特异性抗原信息过程中的作用机制。方法 :将小鼠腹腔巨噬细胞作为刺激细胞 ,脾脏非贴壁细胞为效应细胞 ,PPD作为抗原 ,以不同浓度的TFtb为刺激剂 ,用MTT法检测T细胞的增殖率。结果 :预致敏鼠的淋巴细胞增殖率随TFtb浓度升高而增高 ,0 .5mg·ml-1 时达到峰值 ,随后浓度升高增殖率反而下降。TFtb促预致敏淋巴细胞增殖是巨噬细胞依赖性和抗原特异性的。对未致敏鼠的淋巴细胞增殖率无明显改变。结论 :TFtb能够增强巨噬细胞促结核抗原预致敏淋巴细胞增殖反应的作用 ,可能与增强巨噬细胞呈递抗原的作用有关。; 肖凌刘胜武夏飞; 关键词：结核杆菌抗原呈递巨噬细胞

结核杆菌Hsp65与EGFP融合基因的构建及DC疫苗的制备被引量：9: 2005年; 目的: 构建结核杆菌H37Rv株Hsp65与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的融合基因pEGHsp65, 并以其转染小鼠的树突状细胞 (DC), 制备抗结核的DC疫苗。方法: 采用PCR技术, 从培养的结核杆菌H37Rv株中抽提Hsp65基因,克隆到含有EGFP基因的质粒pEGFP- C1中, 构建pEGHsp65融合基因。以其转染Hela细胞, 在共聚焦激光扫描荧光显微镜下观测不同时间荧光表达的强弱, 并用RT- PCR检测Hsp65mRNA的表达。以pEGHsp65融合基因转染小鼠骨髓细胞经GM- CSF和IL -4诱导分化的DC, 用MTT比色法检测DC疫苗刺激未致敏脾细胞的增殖。结果: 用EcoRⅠ和BglⅡ双酶切鉴定证实, H37Rv株Hsp65DNA已插入重组表达载体pEG -FP- C1中。将融合基因转染入Hela细胞, 48h转染率最高;用RT- PCR在mRNA水平上可检测到Hsp65mRNA的表达。用MTT比色法检测表明, 融合基因转染的DC能激活并引起未致敏的脾细胞增殖。结论: 成功地构建pEGHsp65融合基因和以其制备的DC疫苗, 为进一步观察其治疗结核病的效应奠定了基础。; 肖凌魏雅稚夏飞刘胜武; 关键词：结核杆菌 HSP65 增强型绿色荧光蛋白树突状细胞

抗结核DC疫苗的初步研究: 2005年; 目的:研制抗结核的新型疫苗(DC疫苗)。方法:无菌分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,以rGM-CSF及rIL-4诱导分化获得树突状细胞(DC),以pEGHsp65融合质粒转染DC,共聚焦激光扫描显微镜检测转染率,继以电镜鉴定细胞形态、流式细胞术分析组合性表面分子表达、混合淋巴细胞反应(MLR)检测体外刺激T细胞增殖的功能。将制备的DC疫苗静脉接种正常同系小鼠,分别取各脏器冰冻切片后荧光显微镜观察;取小鼠静脉血用ELISA法检测IL-12及IFN-γ的表达量。结果:24 h DC转染率约20%,电镜可见细胞呈典型毛刺状突起,流式细胞分析表明转染后的DC表面MHCⅡ、33D1的表达量均呈显著增高。MLR显示,pEGHsp65转染DC组与pEG-FP-C1转染DC组及空白DC组比较呈统计学增高。脏器冰冻切片显示,接种pEGHsp65转染DC小鼠组及pEG-FP-C1转染DC小鼠组与未转染DC组比较,在各脏器分布中,以脾脏分布显著增高。其余脏器分布无显著差别。pEGHsp65转染DC小鼠组IL-12及IFN-γ表达量显著高于pEGFP-C1转染DC小鼠组及未转染DC小鼠组,P<0.05,未转染DC组与阴性对照组相比,IL-12及IFN-γ表达量也有统计学增高,P<0.05。结论:pEGHsp65制备的DC疫苗具有成熟表型及功能,能够刺激小鼠IFN-γ及IL-12分泌增高。; 魏雅稚刘胜武夏飞肖凌; 关键词：树突状细胞疫苗结核杆菌

结核分枝杆菌诱导宿主巨噬细胞凋亡机制的研究: 本次实验研究结核杆菌的多种菌株在动物实验中诱发宿主巨噬细胞凋亡的相关机制，同时对相关信号通路的蛋白进行检测以初步判断在感染早期中主导巨噬细胞凋亡的因素及机制。　　取在罗氏培养基生长良好的人型结核分枝杆菌H37Rv株、...; 夏飞; 关键词：巨噬细胞结核分枝杆菌 TOLL样受体2 BCL-2; 文献传递

结核分枝杆菌诱导宿主巨噬细胞凋亡机制初探被引量：7: 2005年; 目的探讨结核杆菌感染中巨噬细胞凋亡的信号传导通路及分子机理。方法用透射电镜、荧光染色对凋亡细胞的形态特征进行分析;琼脂糖凝胶电泳检测巨噬细胞DNA片段化水平;流式细胞术测定不同时期小鼠巨噬细胞凋亡率、膜表面Toll样受体2(TLR2)和胞内Bcl2蛋白的水平。结果结核杆菌强毒力株H37Rv感染组的巨噬细胞凋亡率在1～7d内逐渐升高,至7d时最高可达32.2%,感染的9～11d以后,凋亡率逐渐降低;H37Rv感染组Bcl2水平于感染9～11d后逐渐升高,与卡介苗(BCG)组比较差异有统计学意义;H37Rv感染组和BCG组的巨噬细胞膜表面的TLR2水平均高于正常对照组;各组组内不同时期的TLR2水平无明显变化。结论结核杆菌H37Rv株在感染的早期对宿主巨噬细胞有较强的致凋亡作用,而Bcl2表达的增加能显著抑制这种凋亡。结核杆菌在体内感染过程中,TLR2蛋白可能与巨噬细胞凋亡及Bcl2表达无关。; 夏飞刘胜武魏雅稚肖凌; 关键词：结核分枝杆菌宿主巨噬细胞凋亡 DNA片段化凝胶电泳检测 H37RV

TFtb对巨噬细胞促进预致敏淋巴细胞增殖反应的影响: 2003年; 转移因子是从由某种抗原预激发的机体内提取的,将它注射给受者,能使受者在首次接触该抗原时就发生继发性免疫应答。本实验通过研究结核特异性转移因子(Tuber culosis transfer factor,TEtb)在体外对巨噬细胞促进预致敏淋巴细胞的增殖反应,来探讨其转移特异性免疫信息时是否与增强巨噬细胞的抗原呈递作用有关。; 肖凌刘胜武夏飞; 关键词：结核杆菌抗原呈递巨噬细胞

基于微粒群算法的CDMA移动台定位技术研究: 近年来，随着无线通信技术的迅猛发展，用户对与位置相关的信息需求日益增强，使得移动网络中的移动台定位问题成为研究的热点之一。因为定位业务已经成为3GPP必须支持的业务，所以基于CDMA的移动台定位就成为研究的重点。在3GP...; 夏飞; 关键词：微粒群算法 CDMA移动台蜂窝系统码分多址; 文献传递

结核杆菌Hsp65荧光DNA转染的DC疫苗的研制: 结核病的发病率近年来呈上升趋势。HIV合并结核杆菌感染人数的增加,结核菌的耐药性,和BCG的免疫效果下降是其主要的原因。因此,研制与开发有效的新型抗结核疫苗,是当前国内外结核病基础研究的主要目标,我们用质粒EGFP-C1...; 肖凌刘胜武魏雅稚夏飞; 文献传递

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夏飞