周沛
- 作品数：14 被引量：23H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学更多>>
- 华南地区猪场猪流感和甲型H1N1/2009流感病毒的血清学调查被引量：10
- 2015年
- 为了解华南地区猪场猪流感病毒（SIV）和甲型H1N1／2009流感病毒（H1N1pdm09）的流行情况，本研究采用血凝抑制试验（HI），对2013年～2014年从5个省份采集的2208份血清样品进行SIV和H1N1pdm09流感病毒血清学检测，结果显示阳性血清共1269份（57．42％），其中广东省和广西省的感染率最高（p〈0．01）。H1N1SIV、H3N2SIV和H1N1pdm09流感病毒抗体阳性率分别为22．51％、32．97％和26．49％。H1N1pdm09流感病毒的抗体几何平均滴度（GMT）最高（91．93＋1．04，p〈0．05）。H1N1SIV和H3N2SIV在冬季血清阳性率最高，然而在冬末（2月）阳性率却最低（p〈0．01）。H1N1pdm09流感病毒抗体阳性率在5月和9月出现高峰（p〈0．01）。母猪的H1N1SIV和H1N1pdm09流感病毒抗体阳性率高于仔猪和育肥猪，但仔猪的H3N2SIV抗体阳性率却比较高。本研究为华南地区猪场SIV和H1N1pdm09流感病毒的预防提供参考依据。
- 何淑仪马骏方博孙彦阔罗永峰秦锋郑运曹振鹏周沛粟硕张桂红
- 关键词：猪流感血清学调查血凝抑制试验
- 夏秋季节猪丹毒防控
- 2013年
- 夏秋季节广东省常出现较长时间的雨季，雨水冲刷土壤，使得土壤中的独丹毒杆菌有机会扩大传染，健康猪通过消化道吃进带有猪丹毒杆菌的食物就可能引起猪只感染丹毒。
- 粟硕孙龙古洪浪周沛张桂红
- 关键词：猪丹毒杆菌夏秋季节雨水冲刷消化道土壤
- H3N2犬流感病毒PB2 D701N位点突变对小鼠致病性的影响被引量：1
- 2017年
- 为探究PB2基因D701N突变对犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)H3N2的致病性影响,利用本实验室构建的CIV H3N2(A/canine/Guangdong/02/2011,C/GD/02)反向遗传系统和定点突变技术,获得了2株拯救病毒(原毒株:r C/GD/02,突变株:r C/GD/02-701N)。聚合酶活性试验结果显示,突变株的聚合酶活性显著强于原毒株(P<0.05),说明PB2 D701N的突变能显著增强CIV H3N2聚合酶活性;病毒生长曲线显示,突变株比原毒株在MDCK细胞中的生长复制能力有所下降;小鼠致病性试验显示,两毒株均导致了小鼠的体重增长速率轻微下降,但毒株间无显著差异,且均未导致小鼠死亡。结果表明,PB2基因D701N的突变不会显著影响CIV H3N2对小鼠的致病性。
- 曾伟杰黄三黄三王丽芳张欣周沛王丽芳
- 关键词：H3N2定点突变
- 一株H3N2亚型犬流感病毒的分离鉴定及遗传进化分析被引量：3
- 2016年
- 为了解犬流感病毒(CIV)在广州地区的流行和进化情况,本研究从广州市宠物医院采集了230份犬鼻咽拭子样品,接种10日龄SPF鸡胚,进行CIV的分离和鉴定,并对其全基因组序列进行分析。结果表明,从这些样品中仅分离鉴定出一株H3N2亚型CIV A/canine/Guangdong/01/2014(H3N2)。对该病毒株全基因组的遗传进化分析表明,分离株的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M、NS 8个基因均为CIV,未发生重组;HA和NA基因与我国广东地区分离的H3N2亚型CIV属于同一个分支,氨基酸同源性分别达98.2%和97.0%。本研究结果为明确华南地区CIV的流行进化情况提供了基础数据。
- 闫中山洪马林付橙黄三郑运王丽芳周沛粟硕李守军
- 关键词：H3N2亚型遗传进化分析
- 犬N1ICD基因的克隆与真核表达
- 2018年
- 本研究利用RT-PCR扩增比格犬Notch1基因的胞内域（notch1 Intracellular domain of Notch,N1ICD）,将其克隆到真核表达载体中,在293T细胞中表达,进一步鉴定其分子生物学特征。结果,首次克隆获得犬N1ICD基因,序列长度为2 469 bp,编码822个氨基酸,蛋白质分子质量为87.3 ku。序列分析结果显示,核酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为83.0%、87.9%、86.8%、86.4%、87.4%、83.2%、86.5%、86.3%,进化上与马的关系最近;氨基酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为87.8%、91.5%、89.9%、88.5%、90.9%、87.8%、89.2%、88.7%,进化上同样与马的关系最近。预测的二级结构可能存在63个α-螺旋、65个β-折叠、48个无规则卷曲。本试验成功构建了p3×FLAG-CMV10-N1ICD真核表达载体,为进一步研究犬N1ICD与犬乳腺肿瘤之间的作用奠定了基础。
- 张欣曾伟杰曾伟杰王丽芳郑运王丽芳贾坤李守军
- 关键词：NOTCH1真核表达
- VR在兽医外科手术学实验课教学中的应用被引量：1
- 2020年
- 兽医外科手术学实验课是兽医外科学的重要组成部分,也是培养兽医学生动手技能的最重要课程。然而,现有的教学模式存在教育资源无法满足巨大的教学需求,活体实验引发动物伦理问题和学生实践操作机会偏少等种种弊端。随着虚拟现实(Virtual Reality,VR)技术的日趋成熟,这一科技已经逐渐渗透到各行各业。VR技术有形象化、安全性、可纠错、可重复、适应性强等优点,可以广泛应用于兽医外科手术实验课的教学工作中。本文主要探讨VR科技在兽医外科手术学实验课教学中的应用和价值,并对其应用前景进行了展望。
- 周沛贾坤卢刚远立国李守军
- 关键词：教学实验虚拟现实动物福利
- 犬流感病毒诱导的Beagle犬NLRP3炎性小体相关基因表达谱
- 2022年
- 炎症反应是机体对抗异物的一种先天性免疫反应,NLRP3(nod-like receptor family,pyrin domain-containing 3)炎症小体途径是炎症反应的主要途径之一,在机体对抗病原微生物反应中起着重要的作用。为了深入研究犬的NLRP3炎症小体在犬感染H3N2犬流感病毒(CIV)后的变化,对未感染以及感染H3N2 CIV早期(3 d)和后期(7 d)的比格犬心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、气管和淋巴结组织进行病理学检测。结果发现,感染H3N2 CIV的比格犬,在早期没有明显的病理变化,炎症反应不明显,但后期炎症反应明显增强。通过荧光定量PCR检测比格犬感染H3N2 CIV后NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-6、IL-1β、IL-18和TNF-α等炎症相关基因的转录水平,发现宿主在感染CIV早期炎症相关基因转录水平显著降低,而在感染H3N2 CIV后期的炎症相关基因转录水平比早期显著升高。进一步克隆犬NLRP3、ASC和Caspase-1基因并进行原核表达,制备多克隆抗体,通过免疫组织化学方法对未感染以及感染H3N2 CIV早期和后期的比格犬组织中的NLRP3、ASC(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD)和Caspase-1蛋白的表达水平进行检测。结果发现在感染H3N2 CIV早期的犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白的阳性反应与对照组相比总体上没有明显的变化,而在感染后期犬组织中NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白阳性反应明显增强。本研究为进一步研究流感病毒与宿主炎症反应的关系提供了思路,为后期更好地预防和治疗犬流感提供了理论依据。
- 陶攀宁章勇宁章勇贾爱卿周沛周沛李守军
- 关键词：NS1蛋白
- H3N2犬流感病毒PB2 E^(627)K突变对小鼠致病性的影响被引量：1
- 2017年
- 甲型流感病毒PB2蛋白627位点突变(E^(627)K)是影响流感病毒宿主适应性和致病性的重要因素之一。本实验室前期研究分离的H3N2亚型犬流感病毒(CIV)GD02株(A/canine/Guangdong/02/2011)PB2蛋白序列的627位点氨基酸为谷氨酸,为研究该病毒株PB2的E^(627)K突变对小鼠致病性的影响,本实验采用反向遗传操作技术获得rGD02,并利用定点突变技术拯救了PB2 627位点发生突变的rGD02-E^(627)K。通过接种小鼠比较rGD02和rGD02-E^(627)K对小鼠致病性的差异,评价PB2 E^(627)K突变对H3N2 CIV致病性的影响。结果显示,rGD02和rGD02-E^(627)K对小鼠均无致死性(MLD50>106EID50),对小鼠增重的影响差异均不显著,而且这两株病毒对小鼠的致病性也无明显差异。表明PB2 E^(627)K并未显著影响H3N2 CIV对小鼠的致病性,该研究建立的H3N2 CIV反向遗传操作平台和定点突变技术为该病毒后续的致病机理、基因功能研究及疫苗研制奠定了基础。
- 黄三曾伟杰张欣郑运王丽芳周沛李守军
- 关键词：定点突变
- 臭氧水对非洲猪瘟病毒杀灭效果的评估
- 2021年
- 生物安全仍是当前防控非洲猪瘟的最重要措施。然而,在猪场的各个生物安全环节中,对员工食材的消毒尚未见较好的方法。臭氧消毒是多场景中均可使用的消毒方式。因此,为了探究臭氧溶于水后对非洲猪瘟病毒(ASFV)的杀灭效果,试验通过臭氧水与ASFV的作用后的红细胞吸附(HAD)试验来判定臭氧水对ASFV的杀灭效果。试验结果显示:10 mL浓度为2.0 ppm、3.5 ppm、5.0 ppm的臭氧水与100μL的3.0×10^(4) 拷贝数的ASFV作用2 min、5 min和10 min时,HAD结果均为阴性,表明2.0 ppm、3.5 ppm、5.0 ppm的臭氧水作用于100μL的3.0×10^(4) 拷贝数的ASFV 2 min、5 min和10 min时,均可完全杀灭病毒。以上试验表明,臭氧水在不同作用时间下对ASFV具有较好的杀灭效果。
- 肖向禹吴熠丹符雪滢孔翠滢王衡周沛张桂红
- 关键词：臭氧非洲猪瘟病毒杀灭效果
- 广州地区猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及全基因组遗传分析被引量：3
- 2017年
- 【目的】分析广州地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)的自然重组、跨宿主传播以及流行变异情况。【方法】采集疑似感染猫泛白细胞减少症病毒的猫粪便样品进行细胞分离,并对阳性病料提取基因组DNA,PCR扩增获得病毒的全基因组序列,并与Gen Bank中相关的参考毒株序列进行遗传进化分析,同时对VP2基因与NS1基因的主要氨基酸位点进行差异分析。【结果】成功获得2株猫泛白细胞减少症病毒及其全基因组序列。遗传进化分析显示,广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒FPLV-GZ01、FPLV-GZ02与我国其他分离毒株FPLV-XJ01、FPLV-HRB属同一分支,提示FPLV-GZ01、FPLV-GZ02由FPLV-XJ1进化而来;NS1基因系统进化树显示,FPLV存在与CPV-447重组的可能。主要氨基酸位点分析显示,FPLV在VP2基因中的主要氨基酸位点上的遗传变异比CPV保守;在NS1基因上发现FPLV-GZ01、FPLV-GZ02分别存在不同程度的氨基酸位点突变。【结论】广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒仍在不断地重组进化。
- 洪马林付橙黄三周沛粟硕李守军
- 关键词：猫泛白细胞减少症病毒细小病毒全基因组
