王丽芳
- 作品数：15 被引量：48H指数：4
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 广东1株H3N2亚型犬流感病毒全基因组遗传进化分析
- 2016年
- 本试验对1株犬源H3N2亚型流感病毒(A/Canine/Guangdong/10/2014)进行了遗传进化分析。结果显示,本毒株8个基因片段与在中国和泰国分离的H3N2亚型犬流感的关系最近,与当前亚洲分离的毒株高度相似(>99%)。基因亚型分析显示8个基因片段和目前流行的H3N2CIVs有相同的基因型(K,G,E,3B,F,2D,F,1E)。本毒株为低致病性的禽源H3N2亚型犬流感,从而证实了禽源犬流感亚型在中国的存在,对流感病毒实施广泛的血清学和流行病学检测,以及对该病的防控具有重要意义。
- 赵苗苗王丽芳黄三付橙罗永峰孙彦阔陈智华李守军
- 关键词：H3N2亚型分子特性
- 一株H3N2亚型犬流感病毒的分离鉴定及遗传进化分析被引量：3
- 2016年
- 为了解犬流感病毒(CIV)在广州地区的流行和进化情况,本研究从广州市宠物医院采集了230份犬鼻咽拭子样品,接种10日龄SPF鸡胚,进行CIV的分离和鉴定,并对其全基因组序列进行分析。结果表明,从这些样品中仅分离鉴定出一株H3N2亚型CIV A/canine/Guangdong/01/2014(H3N2)。对该病毒株全基因组的遗传进化分析表明,分离株的PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M、NS 8个基因均为CIV,未发生重组;HA和NA基因与我国广东地区分离的H3N2亚型CIV属于同一个分支,氨基酸同源性分别达98.2%和97.0%。本研究结果为明确华南地区CIV的流行进化情况提供了基础数据。
- 闫中山洪马林付橙黄三郑运王丽芳周沛粟硕李守军
- 关键词：H3N2亚型遗传进化分析
- 进境羊毛中沙门氏菌的分离与鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的:沙门氏菌广泛分布于自然界,寄居于人或动物的肠道内,绝大数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。在对来自澳大利亚的一批羊毛进行检测时,分离到一株可疑菌落,经过革兰氏染色镜检、生化特征、血清诊断、API条、miniVIDAS仪器确定为沙门氏菌,这在羊毛中尚属首次分离到该细菌。
- 陈飞王丽芳姚永华
- 关键词：进境羊毛沙门氏菌
- 广东部分地区猪戊型肝炎的分子流行病学调查被引量：7
- 2017年
- 为了解广东地区猪戊型肝炎的感染情况,本试验于2015年在广东不同猪场收集了2月龄内猪胆汁73份,RTnPCR检测、全基因组测序、同源性及进化分析结果显示:猪感染戊型肝炎的阳性率为6.8%(5/73),5个ORF2部分核苷酸序列同源性为87.2%~99.4%,属于基因4型,4b、4h亚型。对4b亚型中的1个阳性样品(GZHD)株进行全基因测序,其核苷酸序列与swGX40(EU676172)同源性最高为96.5%,与广东株SS19(JX855794)同源性为93.9%,与人源戊型肝炎病毒(HEV)株CVS-Sie10(LC042232)同源性为94.8%。结果表明:广东地区猪群间HEV流行毒株仍以基因4型为主,且为揭示戊型肝炎的跨种传播提供了新的分子生物学依据。
- 纪方晓王衡付新亮王丽芳白小磊陈耀郑运何淑仪张桂红
- 关键词：猪戊型肝炎病毒人畜共患病基因型
- H3N2犬流感病毒PB2 D701N位点突变对小鼠致病性的影响被引量：1
- 2017年
- 为探究PB2基因D701N突变对犬流感病毒(canine influenza virus,CIV)H3N2的致病性影响,利用本实验室构建的CIV H3N2(A/canine/Guangdong/02/2011,C/GD/02)反向遗传系统和定点突变技术,获得了2株拯救病毒(原毒株:r C/GD/02,突变株:r C/GD/02-701N)。聚合酶活性试验结果显示,突变株的聚合酶活性显著强于原毒株(P<0.05),说明PB2 D701N的突变能显著增强CIV H3N2聚合酶活性;病毒生长曲线显示,突变株比原毒株在MDCK细胞中的生长复制能力有所下降;小鼠致病性试验显示,两毒株均导致了小鼠的体重增长速率轻微下降,但毒株间无显著差异,且均未导致小鼠死亡。结果表明,PB2基因D701N的突变不会显著影响CIV H3N2对小鼠的致病性。
- 曾伟杰黄三黄三王丽芳张欣周沛王丽芳
- 关键词：H3N2定点突变
- 犬N1ICD基因的克隆与真核表达
- 2018年
- 本研究利用RT-PCR扩增比格犬Notch1基因的胞内域（notch1 Intracellular domain of Notch,N1ICD）,将其克隆到真核表达载体中,在293T细胞中表达,进一步鉴定其分子生物学特征。结果,首次克隆获得犬N1ICD基因,序列长度为2 469 bp,编码822个氨基酸,蛋白质分子质量为87.3 ku。序列分析结果显示,核酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为83.0%、87.9%、86.8%、86.4%、87.4%、83.2%、86.5%、86.3%,进化上与马的关系最近;氨基酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为87.8%、91.5%、89.9%、88.5%、90.9%、87.8%、89.2%、88.7%,进化上同样与马的关系最近。预测的二级结构可能存在63个α-螺旋、65个β-折叠、48个无规则卷曲。本试验成功构建了p3×FLAG-CMV10-N1ICD真核表达载体,为进一步研究犬N1ICD与犬乳腺肿瘤之间的作用奠定了基础。
- 张欣曾伟杰曾伟杰王丽芳郑运王丽芳贾坤李守军
- 关键词：NOTCH1真核表达
- 鸡蛋中沙门氏菌的快速检测被引量：13
- 2009年
- 选择江苏省不同地区来源的鸡蛋296枚,分别取蛋黄蛋清混合液以沙门氏菌增菌液快速增菌。取增菌培养物100μl,离心去上清后,重新悬浮于100μl超纯水中;以煮沸法制备可能存在的细菌DNA模板。通过对沙门氏菌毒力岛SPI-3的mgtC基因的PCR快速检测,确定其中18.24%的鸡蛋为沙门氏菌阳性。通过与细菌分离检测结果对比,揭示该方法明显提高了沙门氏菌的检出率,表明PCR是一种快速、敏感和高度特异性的沙门氏菌检测方法,值得在畜产品沙门氏菌的检测中推广应用。
- 陈飞成大荣田志高孙怀昌张鑫宇王丽芳
- 关键词：鸡蛋沙门氏菌PCR
- 蛋源沙门氏菌毒力岛的检测及标志基因的研究
- 陈飞成大荣蒋原蔡宝亮田质高杨爱龙邵景东张常印王丽芳张敬友王水明柯家法
- 1.简要技术说明：根据GenBank发表的沙门氏菌毒力岛(SPI)基因序列，设计扩增SPI-1、SPI-2、SPI-3、SPI-4、SPI-5核心蛋白的基因PCR引物，建立了检测沙门氏菌毒力岛的PCR方法；以30株蛋源沙...
- 关键词：
- 关键词：基因检测方法
- 丙型副伤寒的分离与鉴定被引量：1
- 2005年
- 随着我国人民物质生活进一步提高,以羊毛为主的天然纤维消费也在迅速增加;另一方面我国作为世界最大的纺织品出口大国,羊毛进口量迅猛增加也是市场规律体现.羊毛属于初级动物产品,携带病原复杂且很难预期,加之国际动物疫情日趋严重,老的动物传染病死灰复燃,一些新的动物传染病不断出现,严重威胁了动物生产国和贸易国的安全,严重影响国际贸易的正常化发展.
- 王丽芳陈飞姚永华戴先礼
- 关键词：丙型副伤寒动物传染病羊毛病原微生物
- 蜡样芽孢杆菌芽孢萌发及其对常规灭菌方法抵抗力的研究被引量：6
- 2014年
- 芽孢杆菌属细菌在芽孢状态下,对外界环境及理化因素具有高度抵抗力。适宜的温度、湿度及营养条件能促进芽孢萌发,影响其对常规灭菌方法的抵抗力。本试验选取蜡样芽孢杆菌作为研究对象,在适宜培养条件下使其形成芽孢,通过研究萌发后芽孢对温度、H2O2及含氯消毒剂等条件的抵抗力,证实了适当的条件(温度37℃、湿度40%、pH 7.4、30min)能有效促进蜡样芽孢杆菌芽孢萌发,致使芽孢对高温(80℃、2h)、H2O2(1.5mol/L、2h)及含氯消毒剂(有效氯含量约800mg/L、2h)等常规灭菌方法抵抗力明显降低,并能被有效杀灭和灭活,相对有效杀灭率分别达98.4%、98.9%及99.1%,有效杀灭率分别为88.3%、88.7%及88.9%,这对进一步研究芽孢杆菌属细菌的杀菌消毒条件具有重要参考意义。
- 陈未周伟伟陈飞徐蓓蓓王丽芳吴福平崔金鑫袁维峰
- 关键词：蜡样芽孢杆菌芽胞抵抗力萌发
