周小梅
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：东北林业大学野生动物资源学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- ICSI技术挽救GFP兔及介导家兔转基因的研究
- 目的：探索电刺激家兔卵母细胞对ICSI过程卵的激活和胚胎发育效果的影响，检验从死亡GFP兔获得精子通过ICSI方法能否生产整期发育的家兔，并对碱处理精子进行家兔ICSI介导转基因进行初步研究。 方法：精子从死亡大约5小...
- 周小梅
- 关键词：家兔转基因卵母细胞胚胎发育
- 文献传递
- 兔Oct4启动子驱动RFP基因表达载体的构建及验证
- 2014年
- 转录因子OCT4在维持和调控胚胎干细胞的多能性中发挥着重要的作用。Oct4基因启动子驱动标志蛋白的表达对研究胚胎干细胞多能性和建立iPS细胞有重要意义。由于GFP在慢病毒转染过程中常用作转染标记,计划构建兔Oct4基因启动子(rOct4)驱动红色荧光蛋白表达的载体,这将有利于兔ES细胞和iPS细胞制备的研究。通过PCR方法扩增rOct4,构建了rOct4驱动RFP基因的表达载体rOct4-RFP。经转染小鼠ES细胞验证正确后,将rOct4-RFP质粒转染兔成纤维细胞系获得rOct4-RFP成纤维细胞系。经过酶切和测序验证,证明rOct4-RFP构建成功,而且能够在小鼠ES细胞系E14中表达细胞红色荧光蛋白,并受细胞分化状态的调控。通过脂质体介导的基因转移、抗性筛选和PCR鉴定建立了rOct4-RFP转基因成纤维细胞系。
- 唐澜姜伟华尹明茹周小梅李和平陈学进李善刚
- 关键词：RFP干细胞转基因
- 碱处理精子进行家兔ICSI介导转基因的初步研究被引量：1
- 2014年
- 采用10 mmol/L NaOH碱处理家兔精子使精子破膜后,和外源基因共同孵育,然后通过ICSI技术导入卵母细胞。另设无碱处理无质粒孵育组和碱处理后精子无质粒孵育空白组,观察并比较胚胎的发育情况。结果:精子碱处理与质粒孵育对胚胎的发育无显著影响(P>0.05),ICSI介导转基因后观察囊胚出现绿色荧光,占总囊胚数的34.78%,外源性DNA的转入率为19.51%。试验初步建立了用碱处理精子结合家兔ICSI的转基因方法。
- 周小梅尹明茹姜伟华蒋满喜陈学进李和平李善刚
- 关键词：家兔ICSI转基因碱处理
