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- 作品数：13 被引量：26H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 培养基中能量底物对猪胚胎发育的影响被引量：2
- 2010年
- 旨在探讨丙酮酸和乳酸对猪(Susscrofa)胚胎早期发育的影响,将NCSU-23培养基中的5.56mmol/L葡萄糖替换为0.2mmol/L丙酮酸、5.7mmol/L乳酸,并将此培养基命名为mNCSU-23。根据实验设计,孤雌胚及核移植胚转移到mNCSU-23或NCSU-23中培养。激活第2天统计孤雌胚及核移植胚中的5～8细胞胚胎数。激活第6天统计孤雌胚及核移植胚囊胚形成率及囊胚细胞数。实验结果表明,mNCSU/NCSU处理组的5～8细胞胚胎数及囊胚数显著高于对照组(P<0.05);单纯使用mNCSU培养猪胚胎时,囊胚率最低,发育结果最差(P<0.05)。本研究证实,在体外培养前两天,用乳酸和丙酮酸代替培养基中的葡萄糖对胚胎发育有利。
- 付博房庆昌任亮汪亮孙洪涛别墅马红刘娣
- 关键词：孤雌胚
- 民猪细胞色素C氧化酶Ⅰ基因的克隆、多态性检测及冷诱导研究被引量：4
- 2012年
- 采用克隆测序和PCR-SSCP方法对民猪COXⅠ基因序列及多态性进行了检测与分析,采用实时荧光定量PCR法对同一饲养水平下经冷诱导处理的民猪和长白猪肌肉、肝脏组织中COXⅠ基因的表达变化进行分析。结果表明:民猪的COXⅠ基因序列与其他猪种相比,存在18个核苷酸突变,导致5个氨基酸发生变化;C260T、G275A和C1253T位点民猪以B等位基因占优势,大白猪、长白猪、北京黑猪、野猪则是A等位基因占优势;冷诱导后低温组民猪COXⅠ基因的表达量与常温组民猪和低温组长白猪相比,均显著下降(P<0.05)。据此推测冷诱导可导致COXⅠ基因表达量降低从而产生更多的ATP为机体提供能量抵御寒冷,COXⅠ基因可能是一个与猪的抗寒性显著相关的候选基因。
- 杨俊静别墅张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪细胞色素C氧化酶多态性分析
- 民猪脂蛋白脂酶基因在冷诱导后表达变化的研究被引量：3
- 2011年
- 脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)是动物分解代谢的限速酶,是影响脂肪代谢通路中的一个重要基因。本研究将LPL基因作为影响民猪抗寒特性的候选基因,对其在心脏、肝脏、胃、脾脏、肾脏、肺脏、大肠、小肠、子宫、卵巢、背肌、腿肌、脂肪共计13个组织内的表达情况和低温冷诱导后在民猪肌肉组织内的表达变化情况进行了分析。结果表明,LPL基因在所检测的13个组织中均有表达,但表达量存在差异,心脏、背肌、腿肌、脂肪组织中的表达量较高,子宫和卵巢组织的表达量较低;LPL基因在民猪被冷诱导后表达水平无显著变化。
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- 关键词：民猪LPL基因
- 民猪CIRP基因的克隆与冷诱导研究被引量：3
- 2012年
- 采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆民猪的冷诱导RNA结合蛋白(Cold inducible RNA-binding protein,CIRP)基因,获得3个变异体序列。猪CIRP变异体1基因cDNA长1 278 bp(GenBank登录号:HQ908794),编码172个氨基酸;变异体2基因cDNA长1 653 bp(GenBank登录号:HQ908795),编码182个氨基酸;变异体3基因cDNA长1 765 bp(Genbank登录号:HQ908796),编码144个氨基酸。CIRP变异体2与变异体1相比,在其编码区的第501碱基处,出现了一段375 bp的插入片段,该插入片段的第46～48个碱基为TAG,使翻译提前终止;变异体3与变异体2相比,在其编码区的第428碱基处,出现一段115 bp插入片段,该插入片段的第5～7个碱基为TGA,使翻译提前终止。3种转录变异体的核苷酸序列同源性为86.45%,氨基酸序列同源性为87%。冷诱导后,CIRP基因在肌肉中的表达水平出现显著升高(P<0.05)。
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- 关键词：民猪变异体
- 民猪NANS基因的克隆、表达与冷诱导分析
- 民猪作为我国优良的地方品种之一，除了具有较高的繁殖性能外，其较强的抗寒性也是它不同于其他地方猪种的一个显著特征。目前对民猪的抗寒机制尚缺乏深入系统的理论研究，使得人们无法回答“为什么民猪抗寒性强”这一问题。MANS基因C...
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- 关键词：民猪表达量
- 民猪ZFAND5基因的克隆与真核表达载体构建被引量：1
- 2011年
- 根据NCBI上已公布野猪的ZFAND5序列,设计上下游引物,PCR扩增,构建真核表达载体,酶切鉴定并测序。克隆并分析ZFAND5(Zinc finger,AN1-type domain5)基因序列,构建ZFAND5基因的真核表达载体,为转染细胞提供基础。通过研究首次获得了民猪的ZFAND5基因的全序列及其完整的cDNA序列,对测序结果比对后发现,ZFAND5基因的2个外显子中共发现4个点突变,其中643点碱基突变造成HhaⅡ酶切位点的缺失,对所构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-ZFAND5酶切鉴定并测序,证明插入片段长度为262bp,与预期结果一致。初步研究了ZFAND5基因功能及多态性,成功构建pcDNA3.1(-)-ZFAND5真核表达载体,为细胞水平上的表达和功能研究奠定了基础。
- 孙洪涛别墅张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪多态性真核表达载体
- 民猪NUMB基因克隆与组织表达分析
- 2016年
- 研究采用RT-PCR技术结合克隆测序方法,克隆出全长2 004 bp NUMB基因序列,其中包括1 782 bp开放读码框,该基因编码592个氨基酸。利用生物信息学分析软件对该基因氨基酸序列预测与分析发现:NUMB蛋白二级结构中,转角占很大比例,且蛋白亲水性较强,结构功能域分析发现该蛋白多肽链存在一个N端磷酸酪氨酸结构域(PTB),位于第37~162氨基酸之间。基于不同物种NUMB蛋白序列所构建分子进化树表明,猪与牛、骆驼亲缘关系最近,而与斑马鱼最远。在m RNA水平上,NUMB基因肺中表达量最高,大肠中表达量最低。
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- 关键词：民猪反转录PCR克隆生物信息学
- 猪TPST1基因的克隆、序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 酪氨酸硫化转移酶(Tyrosylrotein sulfotransferase,TPST)在酪氨酸硫化修饰过程中起调节作用。试验参照人、鼠、牛等动物的TPST1 mRNA全长序列设计引物,通过电子克隆结合RT-RCR的方法首次克隆获得包括完整CDS区的猪TPST1基因cDNA序列(HQ439987),分析其核苷酸序列及其编码蛋白质分子结构特征。结果表明,猪TPST1序列全长1 543 bp,包含1 113 bp的完整开放阅读框,编码370个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,该基因编码蛋白质与牛(97.6%)、小鼠(96.8%)、大鼠(97%)、人(97.03%)等物种TPST1蛋白质具有较高的一致性。蛋白质序列预测分析发现,猪TPST1氨基酸序列理论等电点(pI)为9.0,相对分子质量(MW)为42.13 ku。
- 别墅孙洪涛张冬杰汪亮刘娣
- 关键词：民猪
- 冷诱导下民猪磷酸葡萄变位酶基因的表达变化被引量：3
- 2011年
- 磷酸葡萄变位酶(PGM)是糖代谢过程中的一个关键酶,为了研究其表达变化,研究采用RT-PCR和Real-time PCR方法,对PGM在大肠、腿肌、肺脏、脂肪、心脏、脾脏和肝脏组织的表达水平以及冷诱导前后民猪骨骼肌内PGM mRNA的表达变化进行了研究。结果表明:在所检测的7个组织中除大肠外其余组织PGM均高水平表达,而且冷诱导后PGM mRNA的水平出现了明显的下降。
- 张冬杰刘娣汪亮别墅孙洪涛杨国伟
- 关键词：民猪RT-PCR
- 冷应激后民猪肝素结合性表皮生长因子基因表达研究被引量：1
- 2011年
- 肝素结合性表皮生长因子(hepafin-binding epidermal growth factor-like,HB-EGF)是表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)家族的成员之一。本研究采用Real-time PCR分析了在民猪冷诱导后该基因在骨骼肌内的表达变化情况。结果表明,低温组(-20℃)的HB-EGF基因的表达水平与常温组(10℃)相比出现了极显著下降(P<0.01)。据此推测,冷应激抑制了HB-EGF基因的表达,也间接抑制了民猪的正常生长。
- 张冬杰刘娣汪亮别墅孙洪涛杨国伟
- 关键词：民猪冷应激HB-EGFREAL-TIMEPCR
