刘问
- 作品数：45 被引量：387H指数：13
- 供职机构：浙江省淡水水产研究所更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划浙江省自然科学基金国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体的制备及应用
- 罗氏沼虾肌肉白浊病的病原是罗氏沼虾诺达病毒。罗氏沼虾诺达病毒粒子呈廿面体，无囊膜，大小为23～25nm，病毒核酸为单链RNA，由2个片段组成，RNA-1和RNA-2，分别为3.0kb和1.3kb。MrNV为首个从甲壳类中...
- 刘问
- 关键词：罗氏沼虾肌肉白浊病单克隆抗体
- 文献传递
- 养殖黄鳝“出血病”病原的研究被引量：13
- 2001年
- 黄鳝出血病是近年来养鳝业的主要疾病之一。从通过对养殖黄鳝的肝、肾 分 离的细菌进行生理生化鉴定、药物敏感及感染试验等。结果表明：经细菌学生化生理鉴定 三株病原菌 ReB00521、 ReK00521、 ReL99712均为嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila， 对黄鳝的半数致死量 LD50分别为 2.84× 106个 /条、 6.12× 106个 /条、 2.13× 106 个 /条，细菌对药物的敏感性有明显差异。
- 沈锦玉刘问钱冬曹铮尹文林沈智华吴颖蕾张念慈
- 关键词：病原菌嗜水气单胞菌出血病黄鳝
- 罗氏沼虾肌肉白浊病预防控制技术应用
- 2006年
- 沈乃峰周志金劳顺健吴月方朱强钱冬刘问何涧峰
- 关键词：肌肉白浊病罗氏沼虾技术应用蚤状幼体培育池
- 黄芩复合免疫增强剂及其制备方法和应用
- 本技术属水产养殖病害防控技术领域，尤其涉及一种养殖甲壳类免疫增强剂的制备和应用方法。黄芩复合免疫增强剂，该复合免疫增强剂包括2～4份黄芩提取物或黄芩苷与2.5～5份左旋咪唑。该复合免疫增强剂可有效增强养殖青蟹非特异性免疫...
- 钱冬刘问潘清清邱庆连
- 文献传递
- 罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究被引量：18
- 2006年
- 罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases ofMacrobrachium rosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾苗种阶段的严重疾病,该病病原已确定为罗氏沼虾诺达病毒(Macrobrachium rosenbergiiNodavirus,MrNV).作者在病毒超离提纯的基础上,制备了罗氏沼虾诺达病毒兔抗血清,并应用抗罗氏沼虾诺达病毒单克隆抗体2B5,建立了三抗体夹心酶联免疫检测方法(TAS-ELISA).TAS-ELISA最适反应条件为:兔抗体以1μg/mL包板,小鼠单抗2B5的工作浓度为1∶50000,该法检测MrNV的灵敏度达0.98 ng,对WSSV、TSV及其他细菌感染死亡的罗氏沼虾苗没有非特异性反应.通过对2000—2002年病虾及疑似病虾的病毒检测,表明TAS-ELISA法比间接ELISA法和核酸电泳法有更高的阳性检出率和符合率;此外还摸索了降低孵育温度和缩短孵育时间对病毒检测的影响,表明各步孵育温度和时间分别为25℃和20 min对于白浊症状的病苗检测无明显影响,使得本法更加适合于生产实践.
- 钱冬刘问潘晓艺曹铮于涟
- 关键词：TAS-ELISA
- WSSV对锯缘青蟹的致病性及血清酶指标影响被引量：12
- 2009年
- 锯缘青蟹(Scylla serrata)俗称青蟹,是我国重要的海水养殖蟹类。近年来,浙江、福建、广东等青蟹主要养殖地区出现了严重的青蟹病害。对浙江省养殖青蟹的发病原因和流行病学调查发现,白斑综合征病毒(White spotsyndrome virus,WSSV)与青蟹发病存在较大相关性。为进一步研究WSSV对青蟹的致病性和发病机理,作者采用白斑综合征病毒的除菌过滤液,以1∶10—1∶10000稀释度注射感染青蟹,结果表明1∶10、1∶100感染组的青蟹死亡率达100%,1∶1000感染组死亡率为66.7%,1∶10000感染组死亡率为38.9%。根据攻毒悬液的病毒浓度计算出WSSV对青蟹的LD50为1.19×106拷贝/只(7.93×103拷贝/g组织);取WSSV感染青蟹血淋巴进行PCR检测,攻毒死亡青蟹的WSSV检出率为100%,表明WSSV对青蟹有很强的致病力。分析病毒感染濒死蟹的血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)等主要酶指标,发现病毒感染青蟹的PO、POD和SOD活力明显低于对照组,而ALP、GPT和GOT的活力则明显高于对照组;用WSSV单克隆抗体对感染蟹进行免疫组化分析,发现WSSV主要侵染青蟹的鳃、甲壳下表皮、心脏、肠、胃等组织的上皮细胞,尤其以鳃上皮细胞损害最为严重。
- 刘问钱冬潘清清严小军
- 关键词：锯缘青蟹白斑综合征病毒
- 罗氏沼虾诺达病毒TAS-ELISA检测法的建立及应用研究
- 罗氏沼虾肌肉白浊病(Whitish muscle diseases of Macrobrachiumrosenbergii)是近年来流行于罗氏沼虾的严重疾病,主要危害罗氏沼虾虾苗。该病1996年前后出现在我国,患病虾苗出...
- 钱冬刘问潘晓艺曹铮于涟
- 关键词：罗氏沼虾肌肉白浊病
- 文献传递
- 鱼源抗菌肽研究进展被引量：3
- 2015年
- 抗菌肽是生物体内的小分子多肽,是构成生物体先天免疫系统的重要成分。抗菌肽具有广谱抗菌及抗病毒等特性,细菌对抗菌肽比传统抗生素更难产生抗性,是传统抗生素的理想替代品。目前已从各种生物中分离出了逾2000种抗菌肽。鱼类种类繁多,生境复杂,是抗菌肽的重要来源,目前已报道了150余种鱼源抗菌肽。
- 李永进叶金云张易祥刘问
- 关键词：生物学功能抗生素
- 白斑综合征病毒对锯缘青蟹的致病性及致病机理研究
- 锯缘青蟹(Scylla serrata Forskal)俗称青蟹,是我国重要的海水养殖蟹类。近年来,浙江、福建、广东等青蟹主要养殖地区出现了严重的青蟹病害。2006～2008年对浙江省养殖青蟹的发病原因和流行病学调查发现...
- 刘问
- 关键词：锯缘青蟹白斑综合征致病机理蛋白组学
- 文献传递
- 蟹类免疫增强剂高通量筛选方法
- 本发明涉及蟹类免疫增强剂的体外快速筛选方法。蟹类免疫增强剂高通量筛选方法，该筛选方法采用蟹血淋巴中酚氧化酶原粗提物，将待测免疫增强剂和蟹类酚氧化酶原粗提物混合，激活蟹类原粗提物中酚氧化酶原的活性，转变为有活性的酚氧化酶，...
- 钱冬刘问潘清清
- 文献传递
