尹文林 作品数:262 被引量:1,272 H指数:21 供职机构: 浙江省淡水水产研究所 更多>> 发文基金: 浙江省科技厅重点资助项目 浙江省公益性技术应用研究计划项目 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
一株亚硝酸盐降解菌的分离鉴定 被引量:1 2011年 为寻找对亚硝酸盐具有高效降解能力、稳定和安全的优良菌株,采用亚硝酸盐氧化细菌(Nitrite-oxidizing bacteria,NOB)富集、分离技术从湖州某水域淤泥中分离得到一株纯培养菌株N3。提取细菌的总DNA,利用细菌16S rDNA特异性引物进行多聚酶链反应(PCR)扩增;扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和Sanger末端终止法测序分析,用NCBI-Blast软件将测序结果在Genbank等数据库中进行同源性检索。结果表明,N3的DNA扩增产物片断大小为1441bp,测序结果经检索证实N3与标准菌株Cellulosimicrobium cellulans(AY665978.1)16S rDNA保守性片段有100%的同源性,可以判定所分离得到的N3菌株为纤维单胞菌属的纤维化纤维单胞菌(Cellulosimicrobium cellulans)。 周冬仁 沈锦玉 潘晓艺 叶雪平 徐洋 尹文林关键词:RDNA 聚合酶链反应 同源性分析 检测沼虾杆套病毒-1的特异性引物、探针及快速检测试剂盒 检测沼虾杆套病毒‑1的引物探针混合液,由引物组A和Taqman荧光探针B组成,Taqman荧光探针B的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团;所述引物组A包含引物MrRoV‑q119F和引物MrRoV‑q11... 潘晓艺 沈锦玉 蔺凌云 姚嘉赟 尹文林 曹铮表达鲇鱼爱德华氏菌外膜蛋白的重组菌、制备方法及应用 本发明公开了一种表达鲇鱼爱德华氏菌外膜蛋白的重组菌、制备方法及应用,所述重组菌是以干酪乳杆菌为表达载体,通过基因改造技术将编码鲇鱼爱德华氏菌外膜蛋白ompN2的基因转入所述干酪乳杆菌中而获得。该重组菌添加到饲喂鱼类的饲料... 徐洋 姚嘉赟 胡大雁 尹文林 沈锦玉文献传递 溴氯海因粉在淡水青虾和养殖水体中的代谢动力学研究 2013年 [目、的]研究溴氯海因粉在淡水青虾体内的药物代谢动力学。[方法]用8%溴氯海因粉全池泼洒(水体中含O.04mg/L溴氯海因)给药,每天1次,连续2d,采用有机萃取及固相萃取等方法提纯净化样本,用高效液相色谱法测定溴氯海因粉在淡水青虾体内和养殖水体中的代谢和残留。[结果]该方法所得的溴氯海因在0.10~20.00μg/ml内线性良好,最低检测限为0.05μg/ml;使用溴氯海因粉后4h淡水青虾的肌肉和血液中均未检出溴氯海因;8-48h内肌肉和血液中检出微量的溴氯海因,其中血液48h溴氯海因浓度为0.014μg/ml,肌肉为0.002μg/ml,72h后血液和肌肉中未检出溴氯海因。养殖水体中,溴氯海因降解符合一级反应,降解方程:C=0.396eμm,降解半衰期为35.76h。【结论】建议在25℃左右水温条件下,溴氯海因的休药期为3d。 尹文林 沈锦玉 姚嘉赟 潘晓艺 徐洋 盛鹏程 郝贵杰关键词:淡水青虾 养殖水体 淡水鱼虾细菌病诊断与防控技术研究进展 被引量:4 2018年 本文概述了淡水鱼虾常见的细菌性疾病,包括细菌性败血症、细菌性肠炎、细菌性烂鳃、链球菌病、迟缓爱德华氏菌病、鮰类肠败血症、诺卡氏菌病、急性肝胰腺坏死病和螺原体病等,并对近年来国内外主要淡水养殖细菌性病害检测方法的研究情况进行综述,包括基于病原菌生理生化特征的检测方法、基于分子生物学技术的检测方法(如常规定性PCR检测方法、实时定量PCR技术、环介导等温扩增技术、16S r RNA检测技术、核酸探针杂交法和基因芯片技术等),以及基于免疫学相关技术的检测方法(如免疫酶技术、免疫荧光技术、胶体金免疫层析技术和抗体芯片技术等),提示在防控方面应该注重监测预警、免疫、药物、生态和综合防控等技术。本文为淡水养殖细菌性病害的诊断、检测方法的标准化及推动相应检测产品的商品化提供了参考。 蔺凌云 潘晓艺 袁雪梅 姚嘉赟 徐洋 尹文林 沈锦玉关键词:细菌性疾病 防控技术 南太湖富营养化水域的生态修复技术集成研究及示范 叶金云 韩志萍 沈锦玉 刘锐 李东明 张爱菊 原居林 尹文林 潘晓艺 陈建中 王趁义 吴湘 张易祥 于岚 姚玉鑫 韦肖杭 赵汉取 郭建林 王俊 张海洋 徐秀芳 刘莉 姜叶琴 葛伟 蒋建华 张曦 吴培江 朱红 黄玲琳 吴再民 项目重点开展了芦苇与南太湖蓝藻的相关性、生态修复带的构建以及南太湖(渔人码头水塘)生态修复技术等研究,在国内首次提出了南太湖水域蓝藻爆发的原因,蓝藻生物量与氮营养因子的年变化特征及相关性,南太湖水域水质、浮游植物、底栖动...关键词:关键词:生态修复技术 养殖鱼类细菌性败血症的菌苗制备技术 被引量:45 1996年 选择对养殖鱼类致病的嗜水气单胞菌强毒株,用福尔马林以0.05%-1.0%的6个浓度及4、25和63℃等3种温度灭活制成菌苗,进行安全性和免疫保护试验。结果表明:福尔马林的最佳灭活浓度为0.05%-0.2%,浓度过高会影响菌苗的抗原性和对鲫的安全性;灭活温度以4℃明显优于63℃。用0.15%福尔马林灭活嗜水气单胞菌的胞外产物(ECP),25℃需4天以上,4℃需7天以上,62℃2小时即可灭活,不加福尔马林62℃热处理2小时不能彻底灭活。用嗜水气单胞菌全菌苗及菌体超声波破碎苗腹腔注射免疫鲫,全菌苗免疫保护率为100%,破碎菌体保护率为80%;比较全菌苗、胞外产物苗和菌细胞苗的免疫效果,以全菌苗最佳,胞外产物苗腹腔注射免疫效果与菌细胞苗相近,而浸泡免疫效果则优于菌细胞菌;嗜水气单胞菌脂多糖(LPS)苗腹腔注射免疫保护率最高,可达100%。全菌苗在4℃保存6个月后,含0.15%和0.2%福尔马林的制品免疫保护率分别降低20.6%和26.2%,而含0.05%及0.1%福尔马林的制品免疫保护率降低50%以上,旦0.05%组还出现少量絮状物,表明过低的福尔马林浓度不利于菌苗的长期保存。 陈月英 钱冬 沈智华 沈锦玉 曹铮 尹文林 张念慈关键词:鱼类 细菌性败血症 菌苗免疫 异育银鲫(Carassius auratus gibelio)脊髓组织细胞系的建立及对CyHV-2的敏感性 被引量:6 2020年 鲫造血器官坏死病是近些年来危害养殖鲫鱼最为严重的传染性疾病,其病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2, CyHV-2)。本研究以异育银鲫(Carassius auratus gibelio)脊髓组织为材料,进行组织细胞体外培养,构建对鲤疱疹病毒Ⅱ型敏感的异育银鲫脊髓细胞系(Spinalcordtissuecell lines of Carassius auratus gibelio, CSC)。采用组织块移植法,进行异育银鲫脊髓细胞的原代培养,并进行传代,已传代至第128代次,获得稳定传代的细胞系后,采用低渗法进行细胞染色体核型分析,并进行鲤疱疹病毒Ⅱ型的敏感性测试与传代。结果表明,以含10%胎牛血清的L-15培养基,在24℃恒温条件下,可稳定传代培养异育银鲫脊髓细胞,传代细胞呈成纤维样或纺锤状;核型分析显示,染色体数为156±2条,该细胞为三倍体细胞。通过对CyHV-2敏感性的测试,CSC细胞感染CyHV-2后产生典型的细胞病变,感染第7天的病变细胞液的TCID50达到109.33/mL,CyHV-2病毒可在CSC细胞上稳定传代;通过对病变细胞的电镜观察,可见大量直径为128-134nm大小的疱疹样病毒颗粒。以上研究结果表明,本研究构建的异育银鲫脊髓细胞系对CyHV-2敏感,并在细胞上能进行稳定传代,传代病毒具有较高病毒滴度,这为鲤疱疹病毒Ⅱ型的深入研究及疫苗开发奠定了重要的基础。 魏钰娟 潘晓艺 蔺凌云 姚嘉赟 郝贵杰 曹铮 夏焱春 尹文林 刘忆瀚 沈锦玉罗氏沼虾双顺反子病毒的LAMP检测试剂盒及检测方法 罗氏沼虾双顺反子病毒的LAMP检测试剂盒及检测方法,属于靶DNA片断的检测技术领域。该检测试剂盒包括RNA提取试剂和RT-LAMP反应试剂,该检测方法包括:1)罗氏沼虾RNA抽提;2)罗氏沼虾双顺反子病毒的RT-LAMP... 潘晓艺 沈锦玉 郝贵杰 姚嘉赟 徐洋 尹文林 曹铮文献传递 一种鲫造血器官坏死病灭活疫苗及其制备方法 本发明提供一种鲫造血器官坏死病灭活疫苗及其制备方法,该疫苗包括异育银鲫脊髓组织细胞系和鲤疱疹病毒Ⅱ型,并且异育银鲫脊髓组织细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2018211。制备方法包括以下步骤:培养异育银鲫脊髓组织细... 潘晓艺 沈锦玉 曹铮 姚嘉赟 蔺凌云 尹文林 刘忆瀚