刘金
- 作品数：10 被引量：119H指数：7
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学理学更多>>
- 短枝型苹果MdRGL基因的克隆及原核表达分析被引量：16
- 2012年
- 【目的】克隆短枝型苹果(Malus domestica Borkh.)的MdRGL基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白,为明确短枝型苹果MdRGL基因与短枝芽变特性之间的关系奠定基础。【方法】采用同源克隆法,以短枝型苹果叶片总RNA为模板,通过RT-PCR获得短枝型苹果MdRGL的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定。将克隆到的短枝型苹果MdRGL克隆到表达载体pGEX-4T-1上,构建融合表达载体pGEX-4T-MdRGL,转化到大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。【结果】从短枝型苹果中克隆到5条MdRGL基因:MdRGL1a/b、MdRGL2a/b和MdRGL3b。序列分析表明,除MdRGL3b外,另外4条序列都具有DELLA和VHYNP结构域。利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期蛋白大小一致。【结论】短枝型苹果中DELLA蛋白的克隆和原核表达的成功,为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定了试验基础。
- 宋杨张艳敏刘美艳王传增刘金冯守千王延玲陈学森
- 关键词：短枝型苹果DELLA蛋白基因克隆原核表达
- 苹果光敏色素作用因子基因PIF的克隆和分析被引量：13
- 2012年
- 以短枝型苹果（Malus domestica Borkh.）为试材,采用RT-PCR结合RACE技术,克隆获得一个光敏色素作用因子（PIF）基因,命名为MdPIF。该基因编码区共2142bp,推测其编码713个氨基酸。氨基酸序列分析显示,在其C端具有保守氨基酸结构域bHLH,N端具有光敏色素结合域APB,与其它植物光敏色素结合因子有很高的同源性。实时荧光定量PCR分析表明,在花后20~110d,MdPIF在短枝型和非短枝型苹果枝条均能表达,同一生长时期,短枝型苹果枝条的表达量显著低于非短枝型,说明苹果短枝性状可能与MdPIF的差异表达有关。MdPIF在叶片、枝条、花瓣、果实和芽中均能表达,在不同器官中的表达量存在明显差异,在枝条中相对表达量最高,推测其可能主要调控苹果枝条的伸长。
- 宋杨张艳敏王传增刘美艳刘金王延玲陈学森
- 关键词：苹果短枝型基因克隆
- 苹果香气SPME-GC/MS萃取条件优化被引量：10
- 2012年
- 以富士为试材,利用固相微萃取(SPME)气相色谱-质谱(GC/MS)联用技术分析苹果香气组分,探讨了不同萃取头、萃取温度、萃取时间和解吸时间等条件对分析结果的影响。结果表明:苹果的SPME-GC/MS最优萃取方法为,用DVB/CAR/PDMS(50/30μm)萃取头在50℃下萃取35 min后,高温解吸2 min,能有效吸附苹果果实香气;重现性分析显示,主要香气成分的变异系数均小于10%,且大部分在5%左右,重现性良好。
- 王传增张艳敏徐玉亭董飞宋杨刘美艳刘金陈学森
- 关键词：苹果香气成分SPME-GC/MS
- GA含量与其合成酶基因在‘长富2号’苹果及其短枝型芽变品种之间的比较分析被引量：18
- 2012年
- 【目的】研究苹果枝条节间长度与内源激素赤霉素(GA)水平及GA合成关键酶基因序列和表达之间的关系,为进一步探索苹果短枝型芽变形成机理及选育新的短枝型苹果品种奠定基础。【方法】以‘长富2号’苹果及其短枝型芽变‘龙富短枝’的枝条和叶片为试材,通过对花后4个时期GA含量的测定及GA合成途径中关键基因的克隆及表达,研究枝条生长过程中GA与枝条节间长度的关系。【结果】在花后80 d,GA含量在非短枝型苹果及其短枝型芽变中差异显著,短枝型芽变品种中GA含量低于非短枝型品种。序列分析表明,GA合成关键酶基因GA20-氧化酶(GA20ox)和贝壳杉烯氧化酶(KO)的cDNA序列在‘龙富短枝’和‘长富2号’中完全一致,无碱基的突变、插入或缺失现象发生。实时荧光定量PCR分析表明,在花后20 d和80 d,GA20ox和KO的相对表达量在‘龙富短枝’和‘长富2号’之间差异显著,短枝型芽变品种中的相对表达量显著低于非短枝型苹果。【结论】GA含量差异和GA合成关键酶基因差异表达与短枝型苹果枝条节间长度相关联,低GA含量和GA合成关键酶基因的下调表达抑制了苹果枝条的伸长。
- 宋杨张艳敏刘金王传增刘美艳冯守千陈学森
- 关键词：短枝型苹果赤霉素实时荧光定量PCR
- 苹果红色芽变香气组分及脂肪酸代谢相关酶活性分析被引量：25
- 2012年
- 利用固相微萃取(SPME)气相色谱—质谱(GC–MS)联用技术,分析了富士、国光与红将军等苹果品种及其红色芽变品系的果实香气成分;进一步研究了国光及其红色芽变品系果实发育期间香气脂肪酸代谢途径相关酶的活性。①从8个参试苹果品种成熟果实中共鉴定出共8类116种香气成分,酯类67种(57.8%),占绝对优势;②红色芽变品系与其对照相比,香气成分种类无规律性变化,但共有组分的含量、特征香气成分的香气值总和、酯类含量及香气总含量等均明显高于各自的对照;③在果实发育末期,红色芽变的脂肪酸代谢途径4个关键酶活性均呈上升趋势,且高于对照。
- 王传增张艳敏徐玉亭董飞宋杨刘美艳刘金陈学森
- 关键词：苹果香气成分代谢酶
- 手持式苹果硬度检测机构用声振采集装置
- 一种手持式苹果硬度检测机构用声振采集装置，机身上有触发机构，机身下有限制机构，麦克风设置于机身上部出口端外侧，传感器设置于机身上部尾端；打击头和打击杆为共线设置的杆体，设置于水平通道内，打击杆的尾端伸出水平通道；打击杆上...
- 王冉冉徐靖波尹孟李艳华牟文良宋丰国王亚丽贾秀发刘金王倩王庆国
- 文献传递
- 早熟苹果泰山早霞果实着色机理的初步研究
- 果实色泽作为果实成熟发育过程重要的表观属性，不仅给予人第一感觉，直接刺激消费者的购买欲，而且可作为果品综合品质是否达到理想程度的外观指标，所以对色泽的研究具有重要意义。早、中熟苹果品种成熟时的气温较高，果实货架期短，使得...
- 刘金
- 关键词：早熟苹果果实色泽花青苷酶活性
- 一种用于水果硬度检测的声学特性采集装置
- 一种用于水果硬度检测的声学特性采集装置，安装板垂直安装在底座上，检测支撑板安装在安装板侧面；收声机构设置在检测支撑板上；电磁阀在安装板一侧面的下部，电磁阀的输出端有一顶柱，顶柱置于安装板另一侧；电磁铁装在安装板另一侧面的...
- 王冉冉尹孟李艳华牟文良宋丰国王亚丽贾秀发刘金王倩王庆国
- 文献传递
- ‘泰山早霞’苹果采后1-甲基环丙烯处理对其软化及相关基因表达的影响被引量：22
- 2012年
- 以‘泰山早霞’苹果成熟的果实为试材,于采收当天进行1–甲基环丙烯(1-MCP)处理,研究其对果实软化及相关基因表达的影响。结果表明,①1-MCP处理的果实在短期贮藏期间硬度均明显高于对照。②1-MCP处理后,乙烯释放速率、PG、PME、β-Gal、α-L-Af及LOX等细胞壁酶基因的表达均被明显抑制,在整个试验期内均有明显下降,尤其是在处理后1d,就分别比各自的对照下降了72.0%、72.1%、87.5%、81.8%、90.2%和16.7%,而1-MCP对AM和XET基因的表达没有明显作用。上述结果表明,苹果‘泰山早霞’品种属乙烯极敏感型,1-MCP对于延缓其果实软化具有明显作用,其果实软化可能是PG、PME、β-Gal、α-L-Af及LOX等多种基因协同作用的结果。
- 刘美艳魏景利刘金房龙宋杨崔美王传增陈学森
- 关键词：早熟贮藏1-MCP基因
- 早熟苹果花青苷积累与其相关酶活性及乙烯生成之间的关系被引量：44
- 2012年
- 以生长发育期相近但着色不同的早熟苹果‘泰山早霞’(红色)和‘辽伏’(绿色)为试材,研究果实生长发育过程中果皮花青苷含量和PAL、CHI、UFGT活性,以及乙烯释放速率的变化。结果显示:①在果实发育过程中,‘泰山早霞’花青苷含量与苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查尔酮异构酶(CHI)、类黄酮半乳糖苷转移酶(UFGT)活性均明显高于‘辽伏’。②两个早熟苹果在采收前均有乙烯释放高峰,并且乙烯释放高峰早于花青苷的迅速积累;喷施1-MCP后果实的乙烯释放速率降低,花青苷合成随之显著减少:说明乙烯启动并调控早熟苹果成熟期花青苷的积累。③‘泰山早霞’发育后期花青苷含量与UFGT活性显著正相关,乙烯可能是通过调控UFGT酶的活性来促进花青苷的合成。
- 刘金魏景立刘美艳宋杨冯守千王传增陈学森
- 关键词：苹果早熟花青苷苯丙氨酸解氨酶查尔酮异构酶
