刘立新
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素的研究被引量：1
- 2004年
- 从五指山猪(WSZP)近交系第8～13代培育群中,先后选用21头5～10月龄青年母猪,分别于授精后25～30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM+F10(1∶1)为基础培养液,按添加或不添加生长因子,将培养液分为A、B、C3种,并以STO细胞作饲养层,在38℃、5.0%CO2和湿润的气相中进行培养建系。结果获得胚胎生殖嵴细胞(EG)细胞系6个细胞株,其中1个EG细胞株传至11代、2个传至5代、1个传至4代、2个传至3代冻存。并进行了AKP染色、体外分化、冷冻-解冻复苏和嵌合体制作等鉴定研究。研究发现:不同胚龄对EG细胞建系具有一定影响,不同培养液对EG细胞建系效果不同,STO细胞饲养层的质量是建株、传代、冷冻-解冻复苏的关键因素之一。EG细胞系的初步建立,为今后筛选进入种系的EG细胞系、实施体外基因操作提供了可能。
- 冯书堂董晓刘立新牟玉莲况玲陈红平张莉张勇张青峰
- 关键词：胚龄培养液嵌合体囊胚
- 猪胚胎干细胞(EG)嵌合体鉴定研究被引量：2
- 2007年
- 应用微卫星技术,检测验证经显微注射胚胎干细胞(EG)而获得的嵌合体猪,在其各种组织中的外源基因的嵌合情况。结果表明:本研究中所获得嵌合体猪的皮肤、大脑、胰、甲状腺、血有外源基因嵌合,而其肺、肝、脾、肾、空肠、卵巢这些组织并没有嵌合。
- 牟玉莲冯书堂刘立新董晓陈宏平况玲张青峰张勇
- 关键词：微卫星胚胎干细胞
- 新型绿色饲料添加剂——糖萜素的研究状况被引量：7
- 2002年
- 前言
随着现代养殖业规模化和专业化的发展,畜禽感染各种疾病的危险性大大增加.为了预防畜禽疾病、促进动物生长发育、提高饲料转化效率及经济效益,多种抗生素药物用作饲料添加剂.抗生素添加剂的应用曾创造了养殖业和饲料工业的革命,规模养殖在全世界得到了迅速发展,动物的生产数量得到了大幅度的提高.
- 陈红平周作红董晓刘立新
- 关键词：理化特性绿色饲料添加剂糖萜素
- 五指山猪近交系EG细胞建系研究初报
- 摘要:从WSZP近交系第8-13代培育群中,先后选用自然或同期发情21头5-10月龄青年母猪,分别于授精后25-30天采集胎儿106个,进行原始生殖峭(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM+F(1:1)为基...
- 冯书堂董晓刘立新牟玉莲况玲陈红平张莉张勇张青峰
- 关键词：嵌合体囊胚
- 文献传递
- 猪胚胎干细胞（EG）嵌合体制作研究
- 该研究首先利用近交系昆明白小鼠进行胚胎显微注射观察发育效果,然后利用所获五指山猪EG细胞制作嵌合体检验EG细胞多能性,最终获得国内首例胚胎干细胞(EG细胞)嵌合体猪,经DNA分析确认在多种组织中存在嵌合状态.三个试验所得...
- 刘立新
- 关键词：嵌合体显微注射胚胎干细胞体外培养
- 文献传递
- 猪胚胎干细胞(EG)嵌合体鉴定研究
- 应用微卫星技术,检测验证经显微注射胚胎干细胞(EG)而获得的嵌合体猪,在其各种组织中的外源基因的嵌合情况,结果表明;本研究中所获得嵌合体猪的皮肤、大脑、胰、甲状腺、血有外源基因嵌合,而其肺、肝、脾、肾、空肠、卵巢这些组织...
- 牟玉莲冯书堂刘立新董晓陈宏平况玲张青峰张勇
- 关键词：微卫星技术胚胎干细胞显微注射
- 文献传递
- 五指山猪胚胎生殖细胞嵌合体研究
- 嵌合体研究是胚胎多能干细胞最重要、最关键的鉴定手段,为最终证实体外培养获得的五指山猪(WZSP)胚胎生殖细胞(EG)是否具有多功能性,在进行一般形态学、核型分析、AKP染色、OCT-4标记等鉴定的基础上,开展了WZSP ...
- 牟玉莲刘立新董晓张莉况玲陈红平刘岚潘登科冯书堂
- 关键词：五指山猪微卫星胚胎干细胞嵌合体
- 文献传递
- 五指山近交猪胚胎生殖细胞(EG)嵌合体在我国移植产仔被引量：4
- 2005年
- 采集25～28日龄的五指山小型猪(WZSP)胚胎原始生殖嵴细胞(PGCs),用于WZSP生殖细胞(EG)建系培养技术研究.研究发现:以DMEM含15%胎牛血清、0.1 mol/L巯基乙醇等为基础培养液,分别添加生长因子20 ng/mL LIF、40 ng/mL hSCF、20 ng/mL hbFGF,以STO为饲养层,进行EG培养建系,WZSP 3 d可出现克隆,其克隆具有出现早,生长数量多,增殖快,成熟亦早,传代率高的特点.培养7～10 d需传代或冷冻保存.EG类细胞冷冻、解冻后尚可复苏,并传至11代.若基础培养液不添加生长因子,培养6～10 d后亦可出现EG克隆细胞株,但其克隆具有出现晚、数量少、增殖慢等特点.研究中还发现25～26日龄的WZSP胚胎的原始生殖嵴小、不易观察、PGCs分离较困难;27～28日龄的WZSP胚胎的原始生殖嵴体积大、易观察、便于分离并可获得多量的PGCs.同时对PGCs进行了形态学、体外分化、AKP染色鉴定等研究.2002年9-12月,在中国农业科学院畜牧研究所五指山猪保种场先后从22头超排处理的大白猪供体中,于配种后(当天为0 d)5.5～7 d实施手术法获得252枚可用胚.将123枚胚胎显微注射WZSP的EG细胞,每枚注射5～15个细胞,与未注射的103枚混合分别移植给9头受体,平均每头受体移植胚胎25.11±5.11枚、含注射EG细胞胚胎13.67±3.57枚,其中7头分别于移植15～22 d返情,1头妊娠,1头待观察.其中2002年9月17日移植30枚胚胎的133号受体,于2003年元月8日产仔8头,其中6头为白色毛仔猪,2头表现为皮肤色素嵌合.
- 冯书堂丛笑倩刘立新李秀兰董晓包林平张莉陈红平牟玉莲况玲张青峰姚錱
- 关键词：胚胎产仔日龄近交
- 猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素影响研究
- 从五指山猪(WAZP)近交系第8～13代培育群中,先后选用21头5～10月龄青年母猪,分别于授精后25～30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究.以DMEM+F10(1:1)为基础培...
- 冯书堂董晓刘立新牟玉莲况玲陈红平张莉张勇张青峰
- 关键词：嵌合体囊胚
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- 猪原始生殖嵴细胞(PGCs)建系因素影响研究
- 从五指山猪(WSZP)近交系第8-13代培育群中,先后选用21头5-10月龄青年母猪,分别于授精后25-30d采集胎儿106个,进行原始生殖嵴(PGCs)细胞分离、培养等建系技术研究。以DMEM+F10(1:1)为基础培...
- 冯书堂董晓刘立新牟玉莲况玲陈红平张莉张勇张青峰
- 关键词：嵌合体囊胚
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