牟玉莲 作品数:236 被引量:373 H指数:10 供职机构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 自然科学总论 更多>>
Wip1敲除在促进小鼠骨髓间充质干细胞迁移中的应用 本发明公开了Wip1敲除在促进小鼠骨髓间充质干细胞迁移中的应用。本发明提供了敲除动物Wip1的物质在制备具有如下(1)-(4)中至少一种功能的产品中的应用:(1)促进动物BMMSCs迁移;(2)抑制动物BMMSCs增殖;... 牟玉莲 李奎 唐懿挺 刘岚 高倩 魏景亮 刘洋 黄雷 夏颖中国小型猪实验动物化培育及种质特异性研究 2003年 我国地形、生态条件多样,经历代人工和自然选择,使我国小型猪品种具有得天独厚的资源和条件。主要的品种有:海南五指山小型猪(WZSP)、云南小耳猪、贵州香猪、广西巴马香猪、甘肃合作猪、青海藏猪等。五指山小型猪具有体型小、性成熟早、遗传稳定、可近亲繁殖的特点;云南小耳猪具有体型较小、性成熟早、体为黑色等特点,通过近亲繁殖,已获得近交20代仔猪,已分化为体重大小、毛色、体态不一的8个家系;香猪、巴马香猪具有性成熟早、遗传比较稳定、产仔率较高、体毛分别为黑色和白色占90%左右等特征或特点。 冯书堂 牟玉莲 张莉 况玲 王端云关键词:近亲繁殖 种质 产仔率 中国小型猪 特异性研究 识别猪eIF4G1基因的sgRNA及其编码DNA和应用 本发明提供了识别猪eIF4G1基因的sgRNA及其编码DNA和应用。该sgRNA特异性识别猪eIF4G1基因的sgRNA识别猪eIF4G1基因的第16外显子,且用于CRISPR/Cas9系统,含有如序列1、序列2和序列3... 刘志国 牟玉莲 李奎PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用 本发明公开了一种PCSK9蛋白的D374Y突变体在抑制肝癌细胞迁移中的应用。本发明所提供的应用具体为序列表中序列1所示蛋白质在如下任一中的应用:(a1)制备抑制肝癌细胞迁移的产品;(a2)抑制肝癌细胞迁移。实验证明,PC... 牟玉莲 李奎 黄雷 刘岚 高倩 魏景亮 刘洋 吴添文 夏颖文献传递 近交系五指山小型猪泌尿系统的解剖学研究 被引量:8 2007年 采用大体解剖学方法对近交系五指山小型猪泌尿系统的解剖学结构特点进行观察研究,发现近交系五指山小型猪泌尿器官的大体形态和位置与人及其它小型猪的基本相似。从解剖学角度来看,成年近交系五指山小型猪肾脏更适合于异种肾移植,为比较医学和临床上异种肾移植提供形态学资料。 杨述林 靳二辉 单同领 张勇 牟玉莲 冯书堂 彭克美 刘华珍 唐文花 李奎关键词:肾脏 解剖学特征 一种制备同时表达多个基因的转基因动物的方法 本发明公开了一种制备同时表达多个基因的转基因动物的方法。本发明还公开了一种制备转基因胚胎的方法,上述制备转基因胚胎的方法,是将植酸酶基因和人粘病毒抗性基因A均导入目的胚胎中,得到转基因胚胎。将转基因胚胎移植到雌性的目的动... 李奎 鞠辉明 樊俊华 白立景 牟玉莲 杨述林 唐中林 崔文涛文献传递 猪卵丘卵母细胞复合体和裸卵中卵母细胞发育及基因表达差异的研究 被引量:8 2008年 【目的】研究探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进猪卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。【方法】对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的猪卵母细胞进行了体外成熟培养试验,应用mRNA差异显示(DDRT-PCR)和半定量反转录PCR技术(RT-PCR),对这2类猪卵母细胞中mRNA的差异表达进行研究,得到了14条差异表达条带,经过回收、克隆、测序后,再运用半定量(RT-PCR)进行检测。【结果】体外培养的裸卵细胞的各项成熟指标均低于卵丘-卵母细胞复合体。3个基因(PELP1,Myo5b and CAST)和一条新EST序列在有卵丘和无卵丘的猪卵母细胞中表现出差异表达。分离得到的差异表达基因在雌激素受体调节、细胞膜间的信息传导和细胞器物质运输等过程中发挥重要的作用。【结论】这些差异基因可能参与了卵丘细胞与卵母细胞间的相互作用,对卵母细胞的成熟具有重要作用。 朱桂玉 冯书堂 李吉涛 牟玉莲 潘登科 郭炳冉关键词:猪卵母细胞 体外成熟 一种具有双荧光基团的质粒及其作为标准品的应用 本发明公开了一种具有双荧光基团的质粒及其作为标准品的应用。本发明提供的质粒,包括表达盒甲和表达盒乙;表达盒甲包括启动子、特异DNA片段甲和终止子;表达盒乙包括启动子、特异DNA片段乙和终止子;特异DNA片段乙为编码序列表... 李奎 阮进学 李和刚 刘楠 吴添文 牟玉莲 杨述林文献传递 五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型的建立和TLR2介导炎症相关因子的表达 被引量:3 2012年 【目的】探讨五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外分离培养和鉴定的方法,研究LPS对内皮细胞TLR2表达的影响及TLR2介导内皮细胞炎症因子的表达情况。【方法】以3—4月龄的五指山小型猪近交系为试验材料,取其胸腹主动脉,采用0.1%I型胶原酶消化分离主动脉内皮细胞。利用细胞吸收DiI-Ac-LDL试验和流式细胞仪检测CD31的特异表达两种方法进行内皮细胞的鉴定。1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞0、6、8和12 h,实时荧光定量PCR检测TLR2和TLR4的表达量;1μg.mL-1LPS刺激内皮细胞12 h后,10μg.mL-1LTA孵育0、6和12 h,实时荧光定量PCR检测炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的表达量。【结果】分离得到的主动脉内皮细胞呈铺路石样整齐排列,且生长状态良好;细胞膜上表达CD31分子和Ac-LDL的受体,证实分离得到的细胞是血管内皮细胞。LPS刺激后细胞TLR2 mRNA水平的表达量明显升高(P<0.05),而TLR4 mRNA水平表达量无明显变化。添加LTA孵育后,细胞炎症因子IL-6、IL-8和黏附分子ICAM-1的mRNA水平表达量较对照明显升高(P<0.05)。【结论】成功建立了五指山小型猪近交系主动脉内皮细胞体外培养模型,并检测到TLR2在LPS刺激内皮细胞后表达量升高,能够介导细胞炎症相关因子的表达。 王攀 陶晓莉 沈祖楠 李和刚 潘杰 牟玉莲 李奎关键词:主动脉内皮细胞 CD163基因敲除iPAMs的构建及其感染PRRSV的特征分析 2024年 [目的]获得分化抗原163(cluster of differentiation 163,CD163)基因敲除的永生化猪肺泡巨噬细胞系(immortalized porcine alveolar macrophages,iPAMs),并从细胞水平研究CD163蛋白在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)入侵过程中的作用。[方法]将靶向CD 163基因第7外显子的sgRNA质粒(pX330-sgCD163)转染至iPAMs,转染48 h后通过有限稀释法筛选单克隆细胞并进行基因型鉴定,通过Western blotting和脱靶分析来筛选CD 163基因敲除的iPAMs;通过实时荧光定量PCR、Western blotting、间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)和半数细胞培养物感染量(50%tissue culture infective dose,TCID 50)等试验分析CD 163基因敲除的iPAMs感染PRRSV的特征。[结果]测序结果表明,100株单克隆细胞中有1株CD 163双等位基因敲除的iPAMs,敲除效率为1%;Western blotting结果显示,CD 163基因敲除的iPAMs中检测不到CD163蛋白的表达,且在预测的脱靶位点未检测到脱靶效应。实时荧光定量PCR结果表明,与野生型iPAMs组相比,CD 163基因敲除的iPAMs组病毒拷贝数极显著降低(P<0.01);Western blotting和IFA结果表明,在接毒24 h后的CD 163基因敲除的iPAMs组中未检测到PRRSV-N蛋白的表达;TCID 50试验结果同样显示,在CD 163基因敲除的iPAMs组中未观察到细胞病变。[结论]本研究利用CRISPR/Cas9编辑系统成功构建了CD 163基因敲除的iPAMs,该细胞系可以完全抵抗PRRSV感染。该细胞系的建立为后续研究PRRSV与CD163蛋白的互作机制提供了新型试验材料。 董泽霞 林鑫 周期律 王楠 黄雷 刘志国 冯政 牟玉莲