刘晓露
- 作品数：5 被引量：11H指数：3
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿路致病性大肠埃希菌外膜蛋白T敲除株的构建及功能评价被引量：5
- 2012年
- 目的探索外膜蛋白T(OmpT)基因在尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)CFT073致尿路感染中的作用。方法利用RED重组技术构建UPEC CFT073 ompT基因缺失株(命名为COTD),并建立小鼠急性尿路感染模型,体内外实验比较野生株与敲除株之间在膀胱组织的定植能力。结果 PCR分析及测序鉴定证实ompT基因缺失株构建成功;体外实验结果显示野生株粘附率为(8.3±1.9)%,敲除株粘附率为(6.7±2.2)%,敲除株粘附率明显低于野生株(P<0.05)。体内实验膀胱组织内,野生株定植细菌数为(7±2)×105cfu,敲除株定植细菌数为(17±8)×104cfu,ompT敲除株定植于膀胱组织的能力明显降低(P<0.05)。结论证实OmpT作为毒力因子参与细菌定植膀胱组织,在UPEC致尿路感染的过程中发挥重要作用。
- 赵铁方幸幸刘晓露彭亮龙敏张文炳罗军曹虹
- 关键词：尿路感染定植
- 外膜蛋白T在尿路致病性大肠杆菌致病机理中作用的初步研究
- 一、研究背景和目的 尿路感染(Urinary tract infection, UTIs)是临床上最普遍的细菌感染之一。女性比男性易感,约有81%的UTIs发生在女性,年龄在16到35岁之间,其中27%女性在初次尿路感染...
- 刘晓露
- 关键词：尿路感染OMPT基因敲除
- 文献传递
- 新生儿脑膜炎大肠埃希菌ompT敲除株毒力分析被引量：3
- 2013年
- 目的探讨新生儿脑膜炎大肠埃希菌ompT对菌株毒力的影响。方法对比野生致病株E44及ompT敲除株FA4：AompT两者体外黏附人脑微血管内皮细胞的能力；构建回复株，并考察ompT回补质粒pST及点突变质粒pST85能否恢复敲除株的黏附能力；考察ompT缺失对菌株定植乳鼠肠道能力的影响；考察ompT缺失对菌株穿越乳鼠血脑屏障的影响。结果相比野生株，E44：Aompz黏附人脑微血管内皮细胞能力明显降低；低拷贝质粒pST及点突变质粒pST85部分恢复了E44：AompT的黏附能力；ompT缺失不影响菌株肠道定植能力；E44：AompT可诱导与野生株相似水平的菌血症，但穿越乳鼠血脑屏障的能力显著降低。结论ompT与菌体黏附脑微血管内皮细胞及穿越血脑屏障相关，OmpT蛋白水解酶活性在其中的作用有待进一步研究。
- 惠长野刘晓露郭妍彭亮张艳芳王佃鹏曹虹
- 关键词：OMPT脑微血管内皮细胞毒力
- 外膜蛋白T在尿路致病性大肠杆菌致病机理中的作用的初步研究
- 刘晓露
- 文献传递网络资源链接
- 大肠杆菌外膜蛋白酶T及其突变体的表达、复性及生物活性分析被引量：5
- 2011年
- 外膜蛋白酶T(Outer-membrane protease T,OmpT)是定位于大肠杆菌外膜,具有高度底物特异性的蛋白水解酶。本文旨在建立克隆表达膜蛋白OmpT和体外复性的方法,考察其蛋白酶活性。首先以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增ompT基因,连接至pET28a(pET-ompT),引入点突变Asp85Ala,构建表达质粒pET-ompT85。然后将两种重组质粒转化入BL21(DE3),均以包涵体形式大量表达。纯化后的蛋白经稀释法复性,并加入粗制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)恢复蛋白酶活性。通过SDS-PAGE、鱼精蛋白水解试验及生长曲线观察表明,重组蛋白OmpT在体外能水解抗菌肽鱼精蛋白和兔肌肉肌酸激酶,而OmpT突变体则无上述功能。上述结果表明本文获得了具有蛋白水解酶功能的重组蛋白OmpT,该蛋白在体外可保护大肠杆菌抵抗鱼精蛋白的杀菌作用。
- 刘晓露惠长野赵铁彭亮张文炳黄胜和曹虹
- 关键词：大肠杆菌突变体生物活性
