目的建立高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,从低、中、高3种剂量研究去甲斑蝥素(NCTD)在体内变化特征。方法液相色谱分离采用CAPCELL PAK MG II C_(18)色谱柱,乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温为室温。质谱检测采用ESI离子源,离子对监测(MRM)模式下测定(离子对n/z 169.3→123.1,NCTD;m/z 267.1→135.1,内标利巴韦林)。大鼠尾静脉注射给药后于特定时间点处死动物,取各组织,匀浆,沉淀蛋白后,采用LC-MS/MS法测定NCTD在大鼠各组织中的浓度。结果 NCTD在心、肝、肺中的线性范围为(0.01~10.00)mg/L,在脾和肾中的线性范围为(0.10~10.00)mg/L。各组织样品的日内与日间精密度均小于14%,提取回收率在81.0%~106%之间。3种剂量NCTID静注给药后在大鼠体内呈现相似的动态变化过程(脾除外),给药后1 h达最大浓度,随后快速消除。NCTD在肝和肾中分布较高,且呈剂量依赖性。结论本文建立了一种简便、灵敏、准确的LC-MS/MS测定方法,可用于NCTD大鼠体内组织分布研究。NCTD高剂量给药时,其在肾中较高的浓度可能与肾毒性有关,为临床合理用药提供了参考依据。
