侯金环
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省科技攻关计划项目山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 鸡胚盲肠上皮细胞的传代培养被引量：7
- 2011年
- 本研究旨在探讨鸡胚盲肠上皮细胞传代培养条件及其特性,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。分别用胰酶-EDTA联合消化和分步消化2种方法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过测定贴壁细胞覆盖率选择细胞传代的适宜消化方式;筛选了传代细胞培养液中L-GLN和胰岛素的最佳浓度,通过贴壁差进一步纯化盲肠上皮细胞,探索其合适的培养条件。通过形态学观察、透射电镜、免疫组织化学技术、组织化学技术、糖原染色、流式细胞术的方法对传代细胞特性进行了鉴定。结果表明:胰酶-EDTA联合消化、15min贴壁差纯化除去成纤维细胞,72.5mg.L-1 L-GLN、0.05mg.L-1胰岛素和5%FBS的传代细胞培养液更有利于盲肠上皮细胞的生长;经形态学和透射电镜观察,AKP、Vimentin及PAS染色,所培养的传代细胞具有典型的上皮细胞特征,在传代后24～72h盲肠上皮细胞纯度达95%以上,贴壁细胞覆盖率达85%以上;细胞凋亡测定表明,细胞连传5代,活性较好,第6代细胞凋亡率显著增加,贴壁细胞覆盖率降低。本研究提示用该法传代可获得稳定、数量大、活性高、纯度高的鸡胚盲肠上皮细胞。
- 古少鹏赵素芬王运盛郑明学侯金环
- 关键词：传代培养鸡胚
- 柔嫩艾美耳球虫在鸡胚盲肠上皮细胞中体外培养营养条件的研究被引量：8
- 2010年
- 探讨E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养的营养条件,观察其发育过程。用鸡胚盲肠上皮细胞体外培养E.tenella,对子孢子接种基础培养基、营养物质含量及血清浓度进行了优选,并对优化营养条件下E.tenella的发育过程进行了观察。MEM199培养基中24、48、72h的虫体感染率显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于DMEM培养基;MEM199培养基中叶酸、VB6、VB1的含量为6mg·L-1时,24、48、72h的虫体感染率显著(P<0.05)高于其他组,分别为25.33%、12.67%和12.33%;MEM199培养基中葡萄糖含量为3000mg·L-1,胰岛素含量为0.40mg·L-1时,有较多的成熟裂殖体形成;接种子孢子后于4、48、96h换液,接种时和4、48h血清浓度为2.5%,96h为1%,有利于子孢子的后期发育;优化营养条件下,细胞接种子孢子后4、24、48、72、96、120h的细胞虫体感染率分别为42%、28%、20%、15%、13.67%、13.67%,且E.tenella可在鸡胚盲肠上皮细胞中完成内生发育过程,并形成卵囊。结果表明,获得了能使E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞完成整个内生发育的体外培养营养条件。
- 古少鹏侯金环陈赵英李宝钧郑明学
- 关键词：E.TENELLA体外培养营养条件发育过程
- 鸡毒害艾美耳球虫早熟耐药株疫苗研制
- 古少鹏郑明学韩克光乔云龙李赟赵剑丁建安王富史新涛周新锐侯金环王敏霞赵宇军冯永平
- 课题来源与背景：鸡毒害美耳球虫是鸡球虫中最常见、致病力最强的一种.国内外的鸡球虫疫苗免疫前2周及接种后3周内禁用多种具有抗菌作用的抗球虫药，否则免疫会失败，免疫期抗菌药物的禁用易导致细菌性疾病的发生，因而在中国养鸡生产中...
- 关键词：
- 关键词：肉鸡抗菌药物抗球虫药
- E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞中体外培养的研究
- 侯金环
- 关键词：子孢子体外培养
- 影响鸡球虫单卵囊分离纯化的因素分析被引量：1
- 2009年
- 单卵囊分离技术是获得品种单一、基因型纯净的卵囊,以便更有效的鉴别球虫种类和建立球虫纯种体系的重要手段。论文主要从雏鸡日龄、卵囊侵袭力、分离方法和材料的选择三个方面来分析其对鸡球虫单卵囊分离纯化的影响,从而为单卵囊分离技术的改进提供指导,进一步为球虫的各项研究提供基础。
- 侯金环古少鹏
- 关键词：球虫单卵囊分离影响因素
- E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养影响因素的研究
- 研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响，为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据.以子孢子回收率和细胞感染率为指标，对...
- 古少鹏郑明学侯金环陈赵英李宝钧唐芳霍乃蕊
- E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养影响因素的研究
- 研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响,为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据。以子孢子回收率和细胞感染率为指标,对...
- 古少鹏郑明学侯金环陈赵英李宝钧唐芳霍乃蕊
- 文献传递
- E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养的影响因素被引量：1
- 2016年
- 研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响,为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据。以子孢子回收率和细胞感染率为指标,对DE52纤维素层析法、蔗糖密度梯度离心法和双层目筛过滤法纯化子孢子的效果进行比较;测定了子孢子接种剂量和细胞生长状态对虫体感染率的影响,并对各发育阶段的虫体进行观察。结果表明,采用双层目筛过滤法可得到纯净的子孢子,并且回收率和接种细胞后24、48h的虫体感染率均显著（P〈0.05）和极显著（P〈0.01）高于DE52纤维素层析法和蔗糖密度梯度离心法;在48孔细胞培养板中,子孢子的最佳感染剂量为每孔10万个;鸡胚盲肠上皮细胞覆盖率为85%~90%且贴壁细胞融合率在30%以上时接种子孢子,各时间段虫体的入侵率较高,且可以观察到E.tenella主要发育阶段的虫体。本研究获得了能使E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞完成整个内生发育的子孢子纯化方法、接种剂量和细胞生长状态。
- 古少鹏郑明学侯金环陈赵英李宝钧唐芳霍乃蕊
- 关键词：E.TENELLA鸡胚体外培养影响因素
- 毒害艾美耳球虫早熟株的选育及内生发育观察
- 2010年
- 为选育制备弱毒疫苗所需的毒害艾美耳球虫早熟株,运用Jeffers建立的早熟系选育方法对毒害艾美耳球虫(E.necatrix)山西分离株进行了早熟选育,并观察其内生发育。结果表明,经过海兰白雏鸡8次传代之后,E.necatrix潜隐期由146.5 h缩短至139 h,排卵高峰期由168 h提前至156 h;其虫体各个发育阶段与亲本株相似,但第二代裂殖体明显小于亲本株,且出现的高峰提前。
- 侯金环李赟赵剑古少鹏
- 关键词：毒害艾美耳球虫内生发育
