付晓艳
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
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- 高效液相色谱紫外检测器测定粮食中的T-2毒素被引量：3
- 2014年
- 目的建立高效液相色谱（HPLC）紫外检测器测定T-2毒素的方法,并评价该方法的可操作性,最终推广到下级单位使用。方法采集哈尔滨市市售大米,经过粉碎后,染毒备用。取染毒后大米粉末,加入乙腈水溶液及正己烷萃取,涡旋混合,离心后,移取己烷层氮气吹干,残渣加入甲醇水溶解进样。色谱条件：采用C18常规反相色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶水（7∶3）,紫外检测波长208 nm,柱温为室温,流速0.5 ml/min。结果 T-2毒素的保留时间为11.6 min;在50~800 ng范围内线性关系良好;样品中T-2毒素的平均回收率为93.00%。结论该方法测定T-2毒素含量,结果准确,可用于粮食中T-2毒素的含量测定。
- 姚洪菊王绍萍李德安付晓艳
- 关键词：T-2毒素高效液相色谱法紫外检测器
- 高效液相色谱柱后衍生荧光法测定尿液中硫酸软骨素分解产生的不饱和双糖
- 2008年
- 目的探讨高效液相色谱柱后衍生荧光法测定尿液中硫酸软骨素（CS）分解产生的不饱和双糖的效果。方法分别用离心过滤法和常规沉淀法进行尿液的预处理，处理后的样品加CS裂解酶消化，用高效液相色谱柱后衍生荧光法测定分解产生的不饱和双糖（△Di-0S、△Di-4S、△Di-6S）的量，比较两种预处理方法中CS标准品回收率的差别。结果高效液相色谱柱后衍生荧光检测系统运转效果良好，该法对于双糖的最低检出量为10ng。尿样经离心过滤法处理后，CS标准品分解产生的△Di-0S、△Di-4S、ADi△6S的回收率分别为86．93％、87．28％、85．03％；而在常规沉淀法中，3种双糖的回收率仅为75．09％、72．96％、77．70％。结论高效液相色谱柱后衍生荧光法较为灵敏，可用于测定CS分解产生的不饱和双糖。在尿液样品的预处理方法中，离心过滤法优于常规沉淀法．可应用于尿液中CS的微量测定。
- 董薇李德安付晓艳曹艳红惠洋
- 关键词：色谱法高效液相骨关节炎
- T-2毒素对软骨细胞增殖及细胞周期的影响被引量：6
- 2018年
- 目的研究T-2毒素对大鼠软骨细胞增殖和细胞周期的影响，为T-2毒素致软骨细胞损伤的分子机制研究提供新思路。方法提取新生Wistar大鼠的原代软骨细胞，通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行细胞鉴定。采用细胞增殖／毒性检测试剂盒（CCK-8）检测不同剂量的T-2毒素[0（对照），1、5、10、20、50、100μg／L]染毒24h对软骨细胞增殖的影响，根据细胞存活率选择对照，1、5、10μg/L（低、中、高剂量）T-2毒素用于后续实验。采用流式细胞术检测细胞周期变化；实时荧光定量PCR法和免疫印迹法分别检测T-2毒素对软骨细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期蛋白D1（CyclinD1）mRNA和蛋白表达水平的影响。结果随T-2毒素染毒剂量增加（对照，1、5、10、20、50、100μg／L），软骨细胞存活率降低[（100．00±0．00）％、（93．12±1．66）％、（77．12±1．11）％、（59．44±4．09）％、（46．64±3．86）％、（38．15±3．37）％、（33．79±0．99）％]，组间比较差异有统计学意义（F=139．21，P〈0．05）。1、5、10μg／L T-2毒素组静止期／DNA合成前期（G0／G1期）细胞[（22．03±O．42）％、（30．54±2．61）％、（36．01±1．51）％]均明显高于对照组[（13．79±1．65）％，P均〈0．05]；DNA合成期（S期）细胞[（60．27±3．53）％、（53．88±4．38）％、（49．55±2．49）％]均明显低于对照组[（76．72±4．24）％，P均〈0．05]。对照组，1、5、10μg/L T-2毒素组PCNA、Cyclin D1 mRNA水平组问比较差异有统计学意义（F=46．80、17．97，P均〈0．05），其中5、10μg／L T-2毒素组（0．77±0．13、0．79±0．08，0．60±0．07、0．56±0．05）均明显低于对照组（0．99±0．02、1．01±0．01，P均〈0．05）。5、10μg/L T-2毒素组PCNA蛋白水平（0．69±0．03、0．49±0．03）均低于对照组（O．92±0．05，P均〈0．05）；1、5、10�
- 闫盼付晓艳王红格姜宇婷邵汉文卜野荣胜忠邹宁高彦辉孙殿军
- 关键词：T-2毒素软骨细胞细胞增殖细胞周期
- T-2粗毒素的生物合成及检定被引量：1
- 2008年
- 目的利用大骨节病病区粮食分离出产毒镰刀菌，生物合成T-2粗毒素。方法从大骨节病病区玉米粮样中分离出产毒镰刀菌，经纯化培养后，接种于无菌玉米培养基，光镜下根据菌落特点和菌体形态、分生孢子的特点来鉴别菌种．而培养产物经有机溶剂提取、减压浓缩和硅胶柱层析纯化所得浓缩液，用薄层层析法和高效液相色谱法鉴定毒素和产毒量。结果从病区粮样中分离出的产毒菌株为三线镰刀菌，将其接种于玉米培养基，可得T-2粗毒素约250mg／kg。结论大骨节病病区存在着镰刀菌的污染，并由此带来T-2毒素污染。T-2毒素生物合成及提取方法有可行性。其成本较低，适于实验室研究。
- 曹艳红王绍萍惠洋付晓艳董薇刘宁
- 关键词：T-2毒素镰刀菌属
- 2008年四川省阿坝州大骨节病相对活跃病区硒及T-2毒素水平调查被引量：6
- 2010年
- 目的 调查2008年四川省阿坝州大骨节病相对活跃病区儿童内、外环境含硒量及主食粮T-2毒素污染水平.方法 对阿坝州11个县48个监测点进行7～13岁儿童右手X线拍片,根据X线检出结果以及历史病情选择大骨节病相对活跃病区作为调查现场.对大骨节病相对活跃病区中7～13岁儿童进行调查采样,测定尿硒、发硒、水硒、粮硒及主食粮中T-2毒素水平.结果 共拍X线片2145张,其中阳性66张,儿童大骨节病X线检出率为3.08%（66/2145）.选择马尔康县、金川县[X线检出率分别为10.98%（29/264）、8.52%（19/223）]和壤塘县[历史重病区,X线检出率为0.75%（3/400）]3个大骨节病相对活跃病区为调查现场.3个县7～13岁儿童尿硒水平[（10.41±4.67）、（10.11±3.65）、（8.42±2.68）μg/g Cr]比较,差异无统计学意义（F=0.901,P〉0.05）.马尔康县儿童发硒[（0.18±0.04）mg/kg]低于金川县[（0.21±0.04）mg/kg,P〈0.05],金川县水硒[（0.225±0.124）μg/L}低于马尔康县和壤塘县[（0.320±0.092）、（0.339±0.105）μg/L,P均〈0.05],金川县粮硒（0.0033 mg/kg）低于马尔康县和壤塘县（0.0258、0.0137 mg/kg,Z值分别为-6.146、-3.042,P均〈0.017）.3个县粮食粉末中T-2毒素水平（19.60、17.95、26.25 ng/g）比较,差异无统计学意义（χ^2=5.623,P〉0.05）：马尔康县粮食颗粒中T-2毒素水平（10.72 ng/g）高于金川县和壤塘县（3.74、3.30 ng/g,Z值分别为-6.315、-4.407,P均〈0.017）;粮食粉末中T-2毒素水平均高于粮食颗粒（Z值分别为-6.690、-5.493、-3.676.P均〈0.05）.结论 阿坝州3个大骨节病相对活跃病区7～13岁儿童内、外环境硒营养状态以及家庭主食粮T-2毒素水平与当地大骨节病病情分布基本一致.
- 付莹孟凡刚邓佳云付晓艳黄慧李德安王丽华
- 关键词：大骨节病硒T-2毒素
- 分析16S rRNA基因部分序列鉴定一株乳酸菌被引量：8
- 2008年
- 目的利用聚类分析16S rRNA基因部分序列的方法对乳酸菌进行鉴定。方法在表型鉴定的基础上,应用已发表的16S rRNA基因序列设计引物,扩增L.sp.L5菌株16S rRNA基因,并进行测序,将结果与同属及非同属的乳酸菌进行同源性比较。结果L.sp.L5菌株与同属的乳酸乳球菌同源性为85.5%以上,尤其与乳酸乳球菌叶蝉亚种NCDO 2181T同源性为99.5%,与不同属的肉明串珠菌、漫游球菌、嗜盐四联球菌同源性分别为77.5%、82.8%、79.0%。结论菌株L.sp.L5为乳酸乳球菌。
- 付晓艳
- 关键词：乳酸菌RRNA基因
