龚慧琴
- 作品数：15 被引量：44H指数：5
- 供职机构：南华大学附属南华医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PCSK9表达下调对人脐静脉内皮细胞内质网应激-自噬途径的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表达下调对人脐静脉内皮细胞内质网应激-自噬途径的影响。方法体外培养血管内皮细胞并将其随机分为对照组、PCSK9模拟组和PCSK9拮抗组;采用qRT-PCR及Western boltting检测各组葡萄糖调控蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、血管细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、自噬基因(Beclin-1)蛋白和mRNA表达。结果对照组比较,PCSK9抑制组GRP78,CHOP、LC3B、Beclin-1蛋白及mRNA表达均升高,VCAM-1、ICAM-1蛋白及mRNA表达均降低,而PCSK9模拟组结果与之相反(P均<0.05)。结论下调PCSK9可能通过诱导成血管内皮细胞内质网应激促细胞自噬抗动脉粥样硬化。
- 龚慧琴赵红刘录山曹建刚姚平波文红艳
- 关键词：内质网应激
- 淫羊藿次苷Ⅱ通过沉默信息调控子1-叉头蛋白O1通路减轻心肌缺血再灌注损伤被引量：5
- 2020年
- 目的探究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,初步探究可能的作用机制。方法将大鼠分为假手术组、模型组、淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)组、沉默信息调控子1(SIRT1)抑制剂(Selisistat)组、ICSⅡ+Selisistat组;各组大鼠预处理后采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注损伤模型大鼠。超声检测大鼠心室功能变化;HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化情况;酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Tunel染色法检测心肌组织凋亡;免疫印迹法检测心肌组织中SIRT1、乙酰化叉头蛋白O1(Ac-FOXO1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Cleaved-Caspase-3、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组左心室舒张末压(LVEDP)升高,平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)降低,cTnI、TNF-α、IL-1β水平升高,细胞凋亡率升高,SIRT1表达降低,Ac-FOXO1表达升高,心肌组织Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05)。与模型组相比,ICSⅡ组LVEDP降低,MAP、LVSP、LVEF、LVFS升高,cTnI、TNF-α、IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,SIRT1表达升高,Ac-FOXO1表达降低,心肌组织Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);Selisistat组LVEDP升高,MAP、LVSP、LVEF降低,cTnI、TNF-α、IL-1β水平升高,细胞凋亡率升高,SIRT1表达降低,Ac-FOXO1表达升高,心肌组织Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05)。ICSⅡ+Selisistat组LVEDP、cTnI、TNF-α、IL-1β、细胞凋亡率、Ac-FOXO1表达、心肌组织Bax、Cleaved-Caspase-3蛋白表达低于Selisistat组,MAP、LVSP、LVEF、LVFS水平和SIRT1、Bcl-2蛋白表达高于Selisistat组(均P<0.05)。结论心肌缺血再灌注损伤大鼠ICSⅡ预
- 龚慧琴周支香刘录山黄江伟张凯
- 关键词：心肌缺血再灌注损伤
- 过氧化物还原酶2通过ROS-NF-κB-miR-33a-ABCA1途径抑制巨噬细胞脂质蓄积
- 2020年
- 已有研究证实,过氧化物还原酶2(peroxiredoxin 2,Prdx2)可抑制小鼠动脉粥样硬化发展,但其在巨噬细胞脂质蓄积中的作用及机制未知。本文在体外培养THP-1源性泡沫细胞,转染Prdx2质粒过表达载体(pcDNA3.1-Prdx2)或Prdx2 siRNA,通过qRT-PCR、Western印迹、油红O和高效液相色谱等手段,检测ABCA1、NF-κB p65和miR-33a表达,胆固醇流出水平,胞内脂滴数目,胆固醇含量及ROS水平。此外,用NF-κB抑制剂PDTC和/或miR-33a抑制剂作预处理,观察上述指标有何变化。结果表明,Prdx2过表达组细胞ABCA1表达水平显著提高(P<0.05),而NF-κB和miR-33a水平明显下调(P<0.05),胞内[3H]-胆固醇流出增加(P<0.05),脂质蓄积减轻;而预处理PDTC和miR-33a抑制剂后,上述效应则更加明显。相反,Prdx2沉默组ABCA1水平下降(P<0.05),NF-κB和miR-33a表达上调(P<0.05)。我们发现,Prdx2过表达能有效降低泡沫细胞内ROS水平。综上所述,Prdx2可通过ROS-NF-κB-miR-33a-ABCA1途径促进巨噬细胞胆固醇流出,抑制脂质蓄积。
- 黄江伟江鑫蒋长荣龚慧琴
- 关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1NF-ΚB
- 胺碘酮联合美托洛尔静脉注射治疗快速心律失常的临床观察被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨胺碘酮联合美托洛尔静脉注射治疗快速心律失常的疗效。方法:收治快速心律失常患者86例,随机分为对照组及观察组,各43例。对照组给予胺碘酮治疗,观察组给予胺碘酮联合美托洛尔治疗。观察两组治疗效果。结果:两组间心率、舒张压、收缩压、不良反应发生率、起效时间及心律转复时间相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:快速心律失常患者实行胺碘酮及美托洛尔联合静脉注射治疗效果显著,能明显改善各临床症状,降低用药不良反应发生率,缩短治疗时间。
- 龚慧琴姚平波文红艳
- 关键词：胺碘酮美托洛尔快速心律失常
- 内毒素对THP-1源性巨噬细胞PCSK9和LDLR表达的影响
- 目的
以THP-1源性巨噬细胞为研究对象，经内毒素处理后，观察细胞水平PCSK9、LDLR的变化及其规律，以便了解PCSK9是否介导内毒素在动脉粥样硬化发展中起作用。
方法
用不同浓度的内毒素/(...
- 龚慧琴
- 关键词：内毒素THP-1源性巨噬细胞低密度脂蛋白受体
- 文献传递
- 微小RNA-126模拟物对肿瘤坏死因子α诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2020年
- 目的探究微小RNA(miR)-126模拟物在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,随机进行如下处理:无特殊处理(对照组);加100μg/L TNF-α(TNF-α组);转染Lipofectamine 2000+100μg/L TNF-α(miR-126阴性组);转染miR-126模拟物+100μg/L TNF-α(miR-126模拟物组),每组设置6个重复样品。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-126表达情况;MTT法检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附试验法检测细胞中白细胞介素(IL)6、IL-1β水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫印迹法检测细胞中内皮细胞黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达;双荧光霉素活性实验检测miR-126、HMGB1间的靶向关系。结果与对照组相比,TNF-α组、miR-126阴性组miR-126表达降低,细胞增殖率降低,IL-6、IL-1β水平升高,细胞凋亡率升高,VCAM-1、ICAM-1、HMGB1蛋白表达升高(均P<0.05);与TNF-α组、miR-126阴性组相比,miR-126模拟组miR-126表达升高,细胞增殖率升高,IL-6、IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,VCAM-1、ICAM-1、HMGB1蛋白表达降低(均P<0.05)。与miR-126阴性组+HMGB13’非编码区(UTR)-携带野生型(Wt)组相比,miR-126模拟物+HMGB13’UTR-Wt组荧光素酶活性降低(0.43±0.05比1.06±0.15,P<0.05)。结论miR-126模拟物可能通过降低炎症反应缓解TNF-α诱导的细胞损伤,实现对血管内皮细胞损伤的保护。
- 张凯周支香王佐曾钧发龚慧琴
- 关键词：血管内皮细胞肿瘤坏死因子Α炎症反应
- 心房肌细胞外泌体miR-130在房颤发病中的作用机制被引量：3
- 2022年
- 目的探讨小鼠心房肌细胞外泌体miR⁃130在房颤(AF)发病中的作用机制。方法用miR⁃130 shRNA慢病毒(sh⁃miR⁃130)或对照(sh⁃Crtl)转染小鼠心房肌细胞,然后进行AngⅡ处理。从处理过的心房肌细胞中分离出外泌体,与THP⁃1巨噬细胞共培养。进行流式细胞术以检查CD86和CD163阳性巨噬细胞的百分比。此外,通过构建横向主动脉弓缩窄术(TAC)小鼠模型,将sh⁃miR⁃130注射到小鼠体内以敲低miR⁃130表达,进一步研究miR⁃130在体内心脏纤维化过程和巨噬细胞极化中的作用。结果AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体(AngⅡ⁃Exo)中miR⁃130表达上调。AngⅡ⁃Exo通过转移miR⁃130诱导巨噬细胞向M1极化。在有或没有sh⁃Ctrl对照处理的TAC小鼠中miR⁃130的水平显著升高,并且注射sh⁃miR⁃130的TAC小鼠的miR⁃130水平显著降低。sh⁃miR⁃130明显改善了TAC小鼠心脏的结构并减小了心肌大小、纤维化水平。此外,sh⁃miR⁃130处理后TAC小鼠左心房组织中iNOS^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著降低,和CD163^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著增加。结论在AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体中miR⁃130的表达水平升高,并且外泌体通过转移miR⁃130促进了M1巨噬细胞极化。
- 黄江伟江鑫蒋长荣龚慧琴齐明旭
- 关键词：小鼠心房肌细胞外泌体房颤
- 齐墩果酸强化阿托伐他汀降脂效果的临床观察及初步机制被引量：5
- 2013年
- 目的研究齐墩果酸对阿托伐他汀在高脂血症患者降脂效果的影响并初步探讨其机制。方法选取高脂血症患者107例,分为单独应用阿托伐他汀治疗组或阿托伐他汀联合应用齐墩果酸治疗组,治疗观察疗程为3个月。分别检测两组治疗前后血液TC、LDLC、TG和HDLC水平。比较两组治疗前后血脂水平变化以及两组间血脂水平差异。用ELISA法分别检测两组治疗前后血清PCSK9浓度。结果治疗前阿托伐他汀组和阿托伐他汀+齐墩果酸组包括TC、LDLC、TG和HDLC等在内的一般资料匹配,差异均无显著性。两组治疗均取得显效,与同组治疗前比较,治疗后两组中TC、LDLC和TG均明显下降,差异具有显著性(P<0.05);阿托伐他汀+齐墩果酸组与阿托伐他汀组比较,TC和LDLC下降效果更加明显,两组差异具有显著性(P<0.05)。两组初始血清PCSK9浓度差异无显著性(72.4±4.2μg/L比71.1±3.9μg/L;P>0.05)。治疗后,阿托伐他汀组血清PCSK9浓度升高了约30%,与治疗前比较差异具有显著性(72.4±4.2μg/L比95.1±3.7μg/L;P<0.01);阿托伐他汀+齐墩果酸组血清PCSK9浓度略有升高(71.1±3.9μg/L比77.6±4.4μg/L),与治疗前比较差异不具显著性;但是阿托伐他汀组血清PCSK9浓度明显高于阿托伐他汀+齐墩果酸组,差异具有显著性(95.1±3.7μg/L比77.6±4.4μg/L,P<0.05)。Spearman相关分析表明血清TC(r=0.76,P=0.001)和LDLC(r=0.72,P=0.001)与PCSK9浓度显著相关,而HDLC和TG与PCSK9浓度相关性不明显。结论血清PCSK9浓度与TC和LDLC明显相关,齐墩果酸可强化阿托伐他汀对高脂血症患者的降脂效果,其作用可能与齐墩果酸抑制PCSK9表达有关。
- 杨红霞龚慧琴蒋恒波
- 关键词：齐墩果酸阿托伐他汀高脂血症降脂治疗
- 过表达Atg5蛋白对巨噬细胞泡沫化程度的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨过表达Atg5蛋白对巨噬细胞泡沫化程度的影响。方法采用Atg5慢病毒和对照组病毒感染Raw264.7巨噬细胞,建立对照细胞系(对照组)和Atg5过表达细胞系(观察组)。两组细胞分别加入50 mL/L ox-LDL诱导形成泡沫化细胞。采用Western blot分析两组细胞蛋白p62、LC3、CD36和SR-A的变化;采用高效液相法检测两组细胞内胆固醇脂(CE)、游离胆固醇(FC)和总胆固醇(TC)的变化;采用免疫荧光和电子显微镜分析两组细胞内脂滴的含量;采用ELISA检测两组细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。结果与对照组比较,观察组细胞自噬底物p62水平显著下调,LC3-Ⅱ水平显著上调(P<0.05)。与对照组比较,观察组巨噬细胞CE、FC和TC含量均显著下调(P<0.05)。观察组细胞脂质水平和脂滴的数量较对照组明显下降(P<0.05)。与对照组比较,观察组细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平显著下调(P<0.05)。结论自噬核心蛋白Atg5过表达可显著提高巨噬细胞自噬水平,可能通过自噬降解胞内胆固醇等脂质,预防巨噬细胞泡沫化,进而降低动脉粥样硬化的发生。
- 王平刘访遥姚平波龚慧琴
- 关键词：自噬巨噬细胞泡沫化动脉粥样硬化
- PCSK9与细胞凋亡被引量：2
- 2011年
- 前蛋白转化酶枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9)基因所编码的蛋白为神经凋亡调节转化酶-1(neural apoptosis-regulated convertase 1,NARC-1),PCSK9主要在肝脏表达,它的主要作用是降解细胞表面的低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR),从而调节胆固醇代谢。另有研究表明,PCSK9还参与细胞的凋亡,影响神经系统的分化和发育,并与炎症过程及糖尿病有一定的相关性。神经细胞凋亡是神经退行性疾病的主要病理基础之一,研究PCSK9对细胞凋亡的作用及机制,对于防治神经退行性疾病等细胞凋亡所引起的疾病,具有十分重要的意义。本文对PCSK9与细胞凋亡之间的关系作一综述。
- 方春敏李雪飞龚慧琴刘录山
- 关键词：细胞凋亡神经退行性疾病
