龚伟
- 作品数：4 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐带间充质干细胞对NOD／SCID小鼠造血重建的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨脐带间充质干细胞(MSC)对NOD/SCID小鼠造血重建的影响。方法以足月胎儿脐带分离的MSC和脐血单个核细胞作为供体,化疗预处理后NOD/SCID小鼠作为受体。将小鼠随机分为以下3组(每组10只):单纯化疗组,仅做化疗预处理,不输注任何细胞;单移植组,化疗后输注单纯脐血单个核细胞(1×107/只);共移植组,化疗后输注脐血单个核细胞(1×107/只)和脐带MSC(1×106/只)。移植后第3、7、14、21、28天分别计数小鼠外周血白细胞,观察其变化;移植后第6周计算小鼠的生存率,并用流式细胞仪检测小鼠骨髓内人CD45+细胞的表达(即植入率)。结果共移植组小鼠移植后第14、21天外周血白细胞[分别为(5.73±0.38)×109/L、(5.90±0.42)×109/L]明显高于单移植组[分别为(3.30±0.58)×109/L、(4.83±0.41)×109/L],差异有显著性(P<0.05)。移植后第6周,共移植组小鼠骨髓人CD45+细胞表达明显高于单移植组(P<0.05),而两组小鼠生存率无显著性差异(P>0.05)。结论成功地建立了异种异基因小鼠脐血移植模型,脐带MSC作为一种新来源的MSC,能够促进造血重建,提高植入率,有望应用于临床共移植治疗中。
- 张颢龚伟孟磊池颖张浪辉陈志哲刘拥军韩忠朝
- 关键词：间质干细胞移植单个核细胞造血干细胞移植
- 人脐带间充质干细胞体外分离、培养、扩增方法及生物学特性研究被引量：7
- 2007年
- 目的建立从足月脐带分离间充质干细胞和体外传代培养技术，并对其生物学特性进行研究。方法采用双酶法分离脐带间充质干细胞，并通过传代进行纯化和扩增培养，绘制生长曲线；用流式细胞仪检测脐带表面抗原及细胞周期；采用软琼脂克隆实验以观察脐带致瘤性。结果成功建立了脐带间充质干细胞分离及培养扩增的方法；流式细胞仪检测结果显示，贴壁细胞均表达CD105、CD44、CD13和CD29，不表达造血细胞表型CD34、CD45和内皮细胞表型CD31，不表达CD106、CD166和HLA-DR；细胞倍增时间为30 h，细胞周期分析表明，G0-G1期和S＋G2＋M期所占比例分别为78.84%和11.16%，脐带间充质干细胞在软琼脂中无克隆形成。结论双酶法是一种较好的分离和培养方法间充质干细胞的方法，培养的细胞具有间充质干细胞的基本特性，无致瘤性，为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。
- 张颢龚伟韩之波赵辉张浪辉陈志哲刘拥军韩忠朝
- 关键词：脐带间充质干细胞细胞
- 脐带间充质干细胞对T细胞的免疫调控研究被引量：16
- 2007年
- 目的:研究脐带源间充质干细胞(UC-MSCs)异源T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:从脐带中分离和培养间充质干细胞,流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度;用Brdu法测定细胞增殖率,观察UC-MSCs对异体T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞仪检测共培养体系中CD4+、CD8+水平检测及UC-MSCs对T淋巴细胞转化的影响;且用ELISA法检测共培养上清细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平。结果:从脐带获得的MSC免疫表型分析显示,其不表达HLA-II抗原。对PHA刺激的脐带血T淋巴细胞,UC-MSCs对其的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性;UC-MSC与脐带血单个核细胞共培养体系中,CD8+细胞比例降低,与对照组有显著性差异(P<0.01),CD4+细胞比例无明显变化(P>0.05);UC-MSC抑制了共培细胞养体系中IFN-γ分泌,然而促进了IL-4的分泌,与对照组有显著性差异(P<0.01)。结论:UC-MSCs抑制PHA刺激的T淋巴的增殖,能够改变T细胞亚群及T细胞分泌的细胞因子,这种抑制特性表明,UC-MSCs对免疫反应具负调节作用,可能为GVHD的防治以及自身免疫性疾病治疗提供一条新途径,有助于UC-MSC的临床应用。
- 张颢龚伟孟磊池颖张浪辉陈志哲刘拥军韩忠朝
- 关键词：脐带间质干细胞脐带T淋巴细胞免疫调节
- 脐带间充质干细胞对脐血单个核细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察在低浓度血清培养下脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对脐血单个核细胞(MNC)的增殖和凋亡的影响。方法:利用密度梯度法分离脐血单个核细胞,接种于脐带MSC建立的饲养层培养,通过计数细胞、半固体培养和流式细胞仪分别检测细胞的增殖和凋亡,以评价脐带MSC的支持造血功能和抗凋亡作用。结果:脐带间充质干细胞组单个核细胞总数及集落形成细胞(CFC)显著高于单培养组(P<0.01),且单个核细胞凋亡率低于单培养组(P<0.01)。结论:体外证实脐带MSC具有促进造血和抗凋亡作用。
- 张颢龚伟孟磊池颖陈志哲刘拥军韩忠朝
- 关键词：脐带间质干细胞胎血单核
