齐世美
- 作品数：36 被引量：172H指数：7
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- 白杨素通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路发挥抗炎和抗氧化作用:基于蛋白质芯片方法被引量：12
- 2021年
- 目的探讨PI3K/AKT/mTOR信号通路在白杨素抗炎抗氧化作用中的机制。方法分别用0、5、10、15、30、60、120、240μg/mL白杨素处理RAW264.7细胞24 h后,CCK-8法检测细胞活力。用白杨素预处理细胞2 h,加入脂多糖(100 ng/mL)分别刺激0、10、30 min,1、2、4、8、16 h,运用蛋白质芯片进行相关信号分子的筛选。用白杨素(10、30、60μg/mL)孵育细胞2 h后,加入脂多糖刺激18 h,ELISA法检测IL-6,MCP-1和TNF-α的释放量;Griess法检测NO浓度;DCFH-DA荧光探针法检测ROS水平。设立空白对照组,白杨素(60μg/mL)单独处理组,脂多糖(100 ng/mL)单独刺激组,以及白杨素和脂多糖联合处理组,RT-PCR法检测iNOS和COX-2的mRNA的表达量。分别用脂多糖(100 ng/mL),N-乙酰-半胱氨酸(NAC)(20μmol/L)或白杨素(10、30、60μg/mL)单独或共处理细胞后,用Western blot检测炎症相关通路p-AKT、p-PRAS40、p-mTOR、mTOR、p-P70S6k、p-S6RP、S6RP的表达水平。结果白杨素剂量在60μg/mL内,对细胞活力基本无影响(P>0.05);白杨素能够降低脂多糖刺激诱导的IL-6,MCP-1,TNF-α和炎症介质NO的释放量(P<0.01),抑制iNOS和COX-2的蛋白表达量和mRNA的表达水平(P<0.01);蛋白质芯片筛选结果提示,脂多糖能够激活AKT/mTOR信号通路,而白杨素抑制其信号分子的活化,Western blot结果进一步验证了蛋白质芯片的结果(P<0.01);白杨素显著下调内源性ROS的生成;运用NAC清除细胞内ROS后,炎症蛋白iNOS和COX-2的表达量下调(P<0.05),而AKT/mTOR通路的活化被阻断(P<0.05)。结论白杨素通过抑制上游信号分子ROS的合成,进而抑制AKT/mTOR信号通路的活化,调控核糖体的翻译过程,下调促炎细胞因子和炎症介质的合成和释放,发挥抗炎作用。
- 蔡苏娜李强周慧许雨墨宋静甘超戚之琳齐世美
- 关键词：白杨素蛋白质芯片脂多糖AKT/MTORROS
- 脂质体转染survivin反义寡核苷酸对K562细胞增殖及凋亡的作用
- 2006年
- 目的:观察脂质体转染survivin反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞K562的增殖及凋亡的影响。方法:人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染K562细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;用MTT法观察转染前后对细胞增生的影响;用细胞凋亡检测法(POD)观察细胞凋亡;RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果:(1)survivin ASODN抑制K562细胞增殖呈时间和剂量依赖性;(2)survivin ASODN可诱导K562细胞的凋亡,凋亡指数呈浓度依赖性;(3)survivinASODN处理组K562细胞survivin mRNA的表达水平显著下降。结论:脂质体转染survivin ASODN能够明显抑制K562细胞增殖,且能诱导细胞凋亡。survivin可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。
- 杨敏戚之琳齐世美陈艳萍毕富勇
- 关键词：脂质体SURVIVIN白血病K562细胞
- 多元化教学法在生物化学理论教学中的效果评定——以酶学为例被引量：3
- 2020年
- 以皖南医学院2015级药学专业为研究对象。将药剂班(120人)设为对照组,选用传统的教学法,制药班(120人)设为实验组,采取多元化教学法,通过成绩分析和问卷调查进行教学效果评价。期末测评对照组得分率(8.64±3.55),实验组得分率(10.23±5.41),差异具有统计学意义。问卷调查显示,实验组超过90%的学生认为,多元化教学法能激发学习兴趣,调动学习主动性,培养科研和临床思维。
- 齐世美戚之琳凌烈锋
- 关键词：多元化教学法生物化学酶学理论教学
- 白杨素通过调控MAPKs信号通路促进SMMC-7721细胞凋亡被引量：7
- 2018年
- 目的探究白杨素诱导肝癌细胞系SMMC-7721细胞凋亡的效应及分子机制。方法将SMMC-7721细胞分为空白对照组,DMSO溶剂对照组和白杨素处理组(5,10,20,40,60,80,100,150,200μg/mL),采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用;将SMMC-7721细胞分为空白对照组,DMSO溶剂对照组和白杨素处理组(5,10,20μg/mL),在倒置显微镜下观察细胞形态学变化;DAPI染色后,在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;将SMMC-7721细胞分别用白杨素,P38特异性抑制剂SB203580(0,5,10μmol/L)、ERK特异性抑制剂U0126(0,5,10μmol/L)和JNK特异性抑制剂SP600125(0,5,10μmol/L)处理后,Western blotting技术检测凋亡相关蛋白PARP、caspase-3和凋亡相关信号通路和MAPKs的磷酸化变化情况。结果白杨素显著抑制SMMC-7721细胞增殖,和对照组相比,DMSO组,5,10,20μg/mL白杨素处理组细胞抑制率分别为96%,76%,71.75%和64.29%,具有剂量依赖性。超过60μg/mL细胞抑制率达到饱和。另外,白杨素促进细胞凋亡,20μg/mL白杨素处理组细胞凋亡率为68.7%,比空白对照组增加了59.4%,PARP和caspase-3显著切割。白杨素激活MAPKs信号通路,具有剂量和时间依赖性。分别用SB203580、U0126、SP600125预处理细胞,白杨素诱导的P38、ERK和JNK的磷酸化和PARP切割被抑制。结论白杨素通过调控MAPKs信号分子的活化,抑制SMMC-7721细胞的增殖并且促进细胞凋亡的发生。
- 韦小彤彭文蕊姜琦李强冯遵永戚之琳齐世美
- 关键词：白杨素SMMC-7721细胞细胞凋亡MAPKS
- 七叶皂苷钠阻断JAK-1/STAT-1信号诱导BGC-823及AGS细胞凋亡被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨七叶皂苷钠诱导胃腺癌BGC-823细胞及胃癌AGS细胞凋亡的机制。方法:采用CCK-8法检测七叶皂苷钠作用后胃癌细胞活力的变化;倒置显微镜下观察胃癌细胞的形态变化;荧光倒置显微镜观察DAPI单染后细胞核形态的改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western bloting检测JAK-1、STAT-1磷酸化情况;激光共聚焦显微镜观察STAT-1核转位情况。结果:七叶皂苷钠可浓度依赖性抑制胃癌细胞增殖,使胃癌细胞形态及细胞核形态呈现凋亡变化,显著升高癌细胞凋亡率,并下调JAK-1、STAT-1信号蛋白磷酸化及抑制STAT-1的核转位。结论:七叶皂苷钠能抑制BGC-823细胞及AGS细胞增殖并诱导其凋亡,该过程可能是通过抑制JAK-1/STAT-1信号级联来实现的。
- 冯遵永齐世美戚之琳凌烈锋章尧
- 关键词：七叶皂苷钠BGC-823细胞AGS细胞
- 牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制及其机制的探讨被引量：7
- 2014年
- 目的研究牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用并初步探索其机制。方法 MTT法检测牛蒡多糖对K562细胞增殖的抑制作用,RT-PCR检测BCL-2mRNA、Bax mRNA的表达。结果牛蒡多糖能明显抑制K562细胞的增殖;BCL-2基因表达下调,Bax的基因表达增多。结论牛蒡多糖对K562细胞增殖有抑制作用,其机制可能与BCL-2基因表达下调,Bax的表达上调有关。
- 孟宇吕俊齐世美
- 关键词：牛蒡多糖K562细胞BCL-2MRNABAXMRNA
- 七叶皂苷钠通过抑制Akt和ERK信号通路诱导HeLa细胞凋亡及对死亡受体表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨七叶皂苷钠诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:采用MTT法检测七叶皂苷钠对宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态改变;利用annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率;采用DAPI单染法荧光显微镜下观察细胞核变化情况;利用Western blotting检测凋亡相关蛋白[聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、pro-caspase-3]和细胞存活相关信号通路(Akt、ERK)以及TRAIL受体(DR4、DR5)的变化情况。结果:七叶皂苷钠以剂量依赖的方式显著抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖;七叶皂苷钠作用于HeLa细胞后,可见典型的凋亡细胞形态学特征,细胞凋亡率显著增加;随着七叶皂苷钠浓度升高,cleaved PARP、cleaved caspase-8和cleaved caspase-9明显增多,pro-caspase-3显著减少,p-Akt和p-ERK激活减少,细胞内DR4和DR5总蛋白水平上调。结论:七叶皂苷钠通过抑制细胞存活相关信号通路,上调死亡受体水平,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 齐世美戚之琳凌烈锋吕俊章尧
- 关键词：七叶皂苷钠细胞凋亡死亡受体AKT通路ERK通路
- 乳酸经Akt信号途径促进胃癌细胞中高迁移率族蛋白盒1的磷酸化及释放
- 2023年
- 目的探讨乳酸诱导胃癌细胞高迁移率族蛋白盒1(HMGB1)释放的分子机制。方法将胃癌HGC-27细胞分为对照组和乳酸处理6 h组,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中HMGB1的水平,激光共聚焦和核质分离实验分别检测HMGB1的胞内定位及核转位,免疫共沉淀检测HMGB1磷酸化和乙酰化,Western blot检测Akt和蛋白激酶C的磷酸化。以Akt抑制剂LY294002与乳酸联合作用HGC-27细胞后,采用免疫共沉淀和Western blot分别检测HMGB1和Akt的磷酸化,激光共聚焦检测HMGB1的胞内定位,EdU实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的迁移能力。将HGC-27细胞注射于BALB/C裸鼠腋部皮下建立移植瘤模型。乳酸组小鼠隔天腹腔注射乳酸(0.2 g/kg),对照组小鼠隔天腹腔注射等量PBS,连续20 d。ELISA法检测裸鼠内眦静脉血HMGB1含量,免疫共沉淀和Western blot检测肿瘤组织中HMGB1和Akt的磷酸化。结果乳酸作用6和12 h,HMGB1的释放量分别为(2995.00±660.91)pg/ml和(696.33±22.03)pg/ml,均高于对照组[(485.00±105.83)pg/ml,P值分别为<0.001和0.028]。乳酸处理6 h后,HGC-27细胞的细胞质中HMGB1蛋白的相对表达量为1.13±0.09,高于对照组(0.83±0.07,P=0.001),而细胞核中HMGB1的相对表达量为0.79±0.06,低于对照组(1.07±0.06,P=0.007);HMGB1的磷酸化水平达1.41±0.09,高于对照组(0.97±0.10,P=0.031);Akt的磷酸化水平为11.16±0.06,高于对照组(0.91±0.022,P=0.002)。抑制Akt活化后,乳酸诱导的HMGB1磷酸化水平降低,HMGB1核转位明显减少,细胞增殖和迁移能力亦下降。体内实验显示,乳酸组小鼠外周血中HMGB1的含量为(1280.70±389.66)pg/ml,高于对照组[(595.11±44.75)pg/ml,P=0.008],肿瘤组织中HMGB1和Akt的磷酸化水平明显增强。结论乳酸通过激活Akt信号通路增强胃癌细胞中HMGB1的磷酸化,促进HMGB1释放。
- 陈雪雷葛菲万梦琪齐世美戚之琳
- 关键词：乳酸核转位AKT
- 基于卓越医生计划的生物化学教学改革被引量：2
- 2014年
- 2012年9月皖南医学院卓越医生培养计划项目正式启动,为配合学校完成此项研究计划,教研室以卓越医生实验班的学生为研究对象,进行了生物化学课程的教学改革研究。为达到道德品质、人文素养、实践能力、创新能力、社会适应能力培养的目标,针对现有的教学现状,在教学方式、考核方式等方面采取了一系列改革措施,并取得了良好的成效。在今后的教学过程中期待和其他学科一起继续努力、加强合作,共同探讨卓越医生教育改革之路。
- 汪茗章尧凌烈锋孙玲玲刘海军谢向荣徐蕾齐世美毕富勇
- 关键词：生物化学教学改革
- 碘化砷-硫脲诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 研究新型砷剂配合物碘化砷 硫脲 (AsI3 Tu)诱导白血病HL 6 0细胞凋亡的生物学效应。方法 采用细胞形态学观察、细胞凋亡原位检测法 (TUNEL法 )检测凋亡细胞并测定其细胞蛋白质的含量。结果 ① 1～16 μmol/LAsI3 Tu对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,并与时间和剂量相关。②TUNEL法检测凋亡细胞明显增加。③AsI3 Tu能够抑制HL 6 0细胞蛋白质合成。结论 AsI3 Tu能有效诱导白血病细胞系HL 6 0细胞凋亡。
- 方基勇刘影齐世美王伟君毕富勇
- 关键词：硫脲白血病HL-60细胞凋亡
