黄亮亮
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨LATS1基因去甲基化对人肾癌细胞生物学功能及其Hippo-YAP信号通路的影响。方法利用RT-PCR检测人肾透明细胞癌细胞系786-O和人胚肾细胞系HEK-293中Hippo-YAP信号通路大肿瘤抑制基因1(large tumor suppressor gene 1,LATS1)mRNA和下游癌基因Yes-相关蛋白(yes-associated protein,YAP)mRNA的表达水平,用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequence-PCR,BSP)对LATS1低表达细胞786-O进行甲基化分析,5-氮杂-2脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,DAC)处理786-O和HEK-293后,用RT-PCR、Western blot检测各组细胞LATS1和YAP的mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期,CCK-8检测各组细胞增殖抑制情况。结果 786-O较HEK-293 LATS1mRNA表达水平显著降低(P<0.05),YAP mRNA表达水平显著升高(P<0.05),BSP显示LATS1在人肾癌细胞系786-O中高度甲基化;DAC处理786-O后,LATS1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),YAP mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),周期停滞在G0/G1期(P<0.05)、细胞增殖受到明显抑制(P<0.05)、细胞凋亡显著增加(P<0.05),而HEK-293组均无明显变化(P>0.05)。结论 LATS1基因去甲基化后下调YAP基因表达,抑制786-O细胞增殖并诱导其凋亡。LATS1基因甲基化在肾癌发生中起重要作用。
- 陈柯宏李兴森何江黄飚曹建佳盛夏李文宾李美材王德林曾强锋黄亮亮
- 关键词：肾细胞癌去甲基化
- 肾细胞癌干细胞标志物研究进展
- 2014年
- 肾细胞癌干细胞决定了肾细胞癌的生长和增殖，目前已发现的肾细胞癌潜在标志物包括八聚体序列结合因子4（Oct4）、CD133、CD105、ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白基因（ABCB1）、趋化因子受体4（CXCR4），但这些分子标志物仍然存在争议。因此，迫切需要研究证实普遍适用的肾细胞癌标志物，以针对其更加有效地治疗肾细胞癌。
- 黄亮亮王德林
- 关键词：肿瘤干细胞生物学标记
- Rce1在前列腺癌中的表达及其临床意义
- 目的：Ras转化酶1(Ras and a-factor converting enzyme1, Rce1)目前已知在 Ras蛋白的转录修饰过程中起到关键的作用。本项目旨在探讨Rce1在前列腺癌中的表达及其临床意义。 方...
- 黄亮亮
- 关键词：前列腺癌临床病理特征预后评估生物标记物
- 慢病毒介导shRNA沉默YAP基因对人前列腺癌LNCaP细胞增殖、凋亡及其雄激素受体的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨慢病毒介导sh RNA沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因对人激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞增殖、凋亡及其雄激素受体(androgen receptor,AR)的影响。方法:3条针对YAP基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,real-time PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞YAP、AR m RNA和蛋白水平;选取沉默效果最佳sh RNA慢病毒干扰载体组,以细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)、平板克隆形成实验(colony formation)检测LNCa P细胞增殖能力;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测LNCa P细胞凋亡改变。结果:重组慢病毒成功感染前列腺癌LNCa P细胞,经嘌呤霉素筛选后感染效率达95%以上,获得稳定沉默YAP基因LNCa P细胞系。与空白对照组和阴性对照组比较,感染sh RNA慢病毒干扰载体各组中YAP、AR m RNA及蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞增殖受到明显抑制(P=0.000),细胞凋亡明显增加(P=0.000)。结论:慢病毒介导sh RNA沉默YAP基因能有效下调YAP在LNCa P细胞中表达,并抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡;YAP可能作为AR配体参与AR信号通路的调节。
- 李美材何江吴文强黄亮亮曾强锋曹建佳陈柯宏盛夏李文宾王德林
- 关键词：前列腺癌雄激素受体慢病毒
- Rce1在膀胱癌的表达及其对T24细胞凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨Rce 1(Ras and a-factor converting enzyme 1)在膀胱癌组织及对应癌旁组织中的表达差异及其意义;探究慢病毒介导sh RNA沉默Rce1基因对人膀胱癌细胞株T24细胞凋亡的影响。方法:采用q RT-PCR和Western blot技术检测Rce1在12例膀胱癌组织及对应癌旁组织中m RNA和蛋白表达情况,采用免疫组化技术检测76例膀胱癌组织及对应癌旁组织中Rce1表达情况;结合临床病理资料,分析Rce1表达与临床病理特征的关系。设计针对Rce1基因的sh RNA慢病毒干扰载体感染T24细胞,经嘌呤霉素筛选后建立稳定感染细胞系,实时荧光定量PCR、Western blot分别检测感染后各组细胞Rce1 m RNA和蛋白表达水平;应用流式细胞仪检测T24细胞凋亡改变情况。结果:q RT-PCR和Western blot显示在12对癌及癌旁组织中Rce1差异性表达,差异有统计学意义(P=0.00);78例癌组织中Rce1阳性表达率为70.5%(55/78),癌旁组织中阳性率为19.0%(4/21),组间差异有统计学意义(P=0.000);统计学分析表明,Rce1表达量与肿瘤组织学分级、T分期和肿瘤是否远处转移存在相关关系(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,Rce1阳性表达与病人术后生存时间呈负相关关系(P=0.016)。与空白对照组和阴性对照组相比,感染sh RNA慢病毒干扰载体细胞组Rce1 m RNA和蛋白表达水平明显下调(P=0.000),细胞凋亡明显增加。结论:Rce1在膀胱癌组织中表达高于癌旁组织,Rce1在膀胱癌的发生发展中可能发挥重要作用;慢病毒介导sh RNA沉默Rce1基因能有效下调Rce1在T24细胞中表达,并诱导细胞凋亡;Rce1有望成为膀胱癌临床诊治和预后的一个新指标。
- 曾强锋黄亮亮王德林何江吴文强何云锋李英麦力李建君刘俊男
- 关键词：膀胱癌免疫组化
- YAP基因沉默对人前列腺癌LNCaP细胞恶性生物学行为及其雄激素受体的影响
- 目的:探讨慢病毒介导shRNA沉默Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因对人前列腺癌细胞株LNCaP细胞恶性生物学行为及其雄激素受体(androgen receptor, AR)的影...
- 王德林李美材黄亮亮曾强锋李建君刘俊南杨其欣
- CCM联合HCPT对人膀胱癌BIU-87细胞YAP、TEAD1表达及生物学功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨姜黄素(CCM)联合羟基喜树碱(HCPT)对人膀胱癌BIU-87细胞中YAP、TEAD1表达及凋亡的作用。方法 CCM和HCPT分别单独与联合用药处理膀胱癌BIU-87细胞。免疫组织化学检测膀胱癌组织及癌旁组织中YAP和TEAD1表达情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot检测YAP及TEAD1基因的mRNA和蛋白的表达变化。结果 YAP和TEAD在膀胱癌组织及癌旁组织中均有阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示CCM和HCPT均可有效诱导膀胱癌细胞BIU-87的凋亡。CCM组和HCPT组BIU-87细胞中YAP及TEAD1mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),联合用药组YAP及TEAD1mRNA和蛋白表达更低(P<0.05)。结论 CCM和HCPT联合用药抗癌机制可能是通过抑制Hippo信号通路中YAP癌基因表达,下调TEAD1,并诱导膀胱癌细胞凋亡产生。
- 何江曹建佳陈柯宏王德林盛夏李文宾黄亮亮
- 关键词：羟基喜树碱
