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肌萎缩侧索硬化脊髓器官型培养模型的建立被引量：1: 2004年; 利用谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA)制备选择性运动神经元凋亡的肌萎缩侧索硬化(ALS)脊髓器官型培养模型。取出生后8天乳鼠腰段脊髓组织切成脊髓薄片,在培养液中分别加入不同浓度THA,用SMI-32免疫组化染色对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定,calretinin免疫组化染色对背角中间神经元进行鉴定,测定培养液中谷氨酸(Glu)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,并与对照组比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定;THA引起培养液中剂量依赖性Glu、LDH 含量增高和SMI-32阳性的α运动神经元数目减少,脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻;100 μmol/L THA组在体外培养4周后,细胞外Glu含量增高,SMI-32阳性的α运动神经元数目较对照组明显减少,背角的中间神经元数目无显著变化,可以制成ALS脊髓器官型培养模型。; 刘卫刚王晓娟肖向建马征宋学琴王丽琴李春岩; 关键词：肌萎缩侧索硬化脊髓乳酸脱氢酶神经系统变性疾病运动神经元

胶质细胞源性神经营养因子对肌萎缩侧索硬化症培养模型的保护作用被引量：2: 2007年; 目的:利用肌萎缩侧索硬化症的脊髓片培养模型,观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对运动神经元的保护作用。方法:取出生后8天乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,随机分为对照组、模型组、不同浓度GDNF组(1ng/ml、5ng/ml和50ng/ml),倒置显微镜观察脊髓片形态变化,SMI-32免疫组化观察前角运动神经元数目的变化。结果:对照组体外生长良好,而模型组生长不良,SMI-32阳性细胞较对照组减少,GDNF各组脊髓运动神经元存活数目较模型组显著增多,且具有量效关系。结论:GDNF能保护运动神经元免受谷氨酸兴奋毒性的损伤。; 肖向建刘卫刚李敏马征李春岩; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子肌萎缩侧索硬化谷氨酸脊髓

石杉碱甲对体外培养大鼠脊髓片前角运动神经元损伤的保护作用被引量：11: 2005年; 目的:利用选择性运动神经元死亡的脊髓薄片培养模型,观察石杉碱甲对运动神经元的保护作用。方法:乳大鼠腰段脊髓组织薄片分为正常对照组、模型组和石杉碱甲1,10,100μmol·L-15组。用倒置显微镜观察脊髓片形态变化,SMI32免疫组化染色对腹角α运动神经元记数,透射电镜观察α运动神经元的超微结构并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:石杉碱甲100μmol·L-1组脊髓片在体外生长良好,形态与正常对照组相近;石杉碱甲1,10μmol·L-1组脊髓片生长不良,形态与模型组相近。与正常对照组相比,模型组脊髓片前角SMI32阳性α运动神经元数减少(P<0.05),培养液中LDH含量增加(P<0.05)。与模型组相比,石杉碱甲100μmol·L-1组脊髓片前角α运动神经元数增加(P<0.05),胞浆内空泡明显减少,培养液中LDH含量减低(P<0.05)。结论:高浓度石杉碱甲能改善乳大鼠脊髓片前角α运动神经元生长,减少其空泡形成及死亡,并降低LDH的释放。; 刘卫刚肖向建李敏马征李春岩; 关键词：石杉碱甲肌萎缩侧索硬化脊髓谷氨酸

谷氨酸转运抑制剂对器官型培养脊髓片的影响被引量：1: 2005年; 观察谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(Threo-hydroxyaspartate,THA)对器官型培养的脊髓片的影响,探讨谷氨酸在运动神经元损伤中的作用。取出生后8天乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,在培养液中加入不同浓度THA(50μmol/L、100μmol/L、500μmol/L),用神经元的特异性免疫组化染色剂SMI-32,非磷酸化神经丝标记物,对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定,用单克隆抗钙网膜蛋白(calretinin)抗体对背角中间神经元进行记数,测定培养液中乳酸脱氨酶(LDH)的含量,并与对照组比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定,THA可以引起剂量依赖性的培养液中LDH含量增高和α运动神经元数目减少,而脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻,其中THA100μmol/L组在体外培养4周后出现类似于肌萎缩侧索硬化(ALS)的病理改变:α运动神经元数目较对照组明显减少,而脊髓背角的中间神经元数目无显著变化。细胞外谷氨酸增高主要对运动神经元造成损伤,脊髓运动神经元较感觉神经元对谷氨酸的兴奋毒作用更加敏感。; 肖向建王晓娟王丽琴宋学琴刘卫刚马征李春岩; 关键词：器官脊髓运动神经元谷氨酸转运体感觉神经元 MOL 神经丝

脊髓薄片器官型培养及组织化学鉴定方法研究: 2005年; 目的探讨脊髓薄片器官型培养的方法及其腹角α运动神经元、背角中间神经元的鉴别。方法利用出生8d乳鼠的腰段脊髓组织切片建立脊髓器官型培养模型,并用神经元的特异性SMI蛳32和Calretinin单克隆抗体进行免疫组化染色,对脊髓腹角α运动神经元和背角中间神经元加以鉴定,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果脊髓片在体外生长良好,形态完整,α运动神经元和背角中间神经元的数目及各时点培养液中LDH含量恒定,脊髓片可存活2个月以上。结论脊髓的器官培养技术为研究脊髓生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法。; 王晓娟宋学琴王丽琴肖向建刘卫刚马征李春岩; 关键词：器官型培养背角中间神经元运动神经元组织化学

GDNF对谷氨酸介导的皮层运动神经元损伤的保护作用被引量：1: 2007年; 目的:利用肌萎缩侧索硬化症的脑片培养模型,观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对运动神经元的保护作用。方法取出生后1天乳鼠的大脑组织切片做脑片器官型培养,随机分为对照组、模型组、不同浓度GDNF组(1ng/ml、5ng/ml和50ng/ml),倒置显微镜观察脑片形态变化,SMI-32免疫组化观察皮层大锥体细胞数目的变化。结果:对照组体外生长良好,而模型组生长不良,SMI-32阳性细胞较对照组减少,GDNF5 ng/ml和50 ng/ml各组皮层大锥体细胞存活数目较模型组显著增多,且具有量效关系。结论:GDNF能保护皮层运动神经元免受谷氨酸兴奋毒性的损伤。; 肖向建刘卫刚李敏马征李春岩; 关键词：胶质细胞源性神经营养因子肌萎缩侧索硬化谷氨酸脑片

大鼠运动区脑片培养及皮层锥体细胞的组化鉴定被引量：2: 2005年; 目的:探讨大鼠运动区脑片器官型培养的方法及其皮层第V层锥体细胞的鉴定。方法:利用出生后1天的乳鼠大脑活组织切片建立脑片的器官型培养模型,并用抗非磷酸化神经丝单克隆抗体SM-32对皮层锥体细胞加以鉴定。结果:脑片体外生长良好,形态完整,皮层锥体细胞数目恒定,并可存活1个月以上。结论:大鼠脑片的器官培养技术为研究大脑生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法。; 肖向建刘卫刚马征李敏李春岩; 关键词：脑片器官型培养锥体细胞

器官型脊髓培养与肌萎缩侧索硬化被引量：1: 2004年; 肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是选择性侵犯上、下两级运动神经元的慢性进行性变性疾病.ALS研究中采取的模型可分为三种:免疫介导的动物模型、体外细胞(或组织)培养模型和转基因动物模型.器官型脊髓培养(Organotypic Spinal Cord Cultures)是近年来发展起来的一种新的体外细胞(或组织)培养技术,有近十年的历史.; 刘卫刚马征肖向建王晓娟李春岩; 关键词：肌萎缩侧索硬化脊髓进行性免疫介导性疾病转基因动物模型

谷氨酸转运抑制剂对大鼠培养脑片皮层锥体细胞的影响被引量：2: 2006年; 目的观察谷氨酸转运抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA)对大鼠培养脑片中大锥体细胞的影响,探讨谷氨酸在皮层运动神经元损伤中的作用。方法取出生后1 d SD乳鼠的运动区大脑切片培养,用含有不同浓度THA的培养液进行干预,培养后的脑片用神经元特异性免疫组化染色剂SMI-32(抗非磷酸化神经丝抗体)染色,对皮层大锥体细胞进行鉴定、计数,透射电镜观察超微结构,并测定不同时点培养液中谷氨酸(Glu)的含量。结果对照组脑片大锥体细胞数目稳定,而THA可以引起剂量依赖性培养液中Glu含量的升高及大锥体细胞数目减少,空泡变性。结论细胞外谷氨酸增高对大锥体细胞造成慢性损伤。; 肖向建刘卫刚李敏马征李春岩; 关键词：脑片谷氨酸肌萎缩侧索硬化

大鼠运动区脑片的培养方法被引量：3: 2006年; 利用出生后1天的乳鼠大脑活组织切片建立脑片的培养模型,并用抗非磷酸化神经丝单克隆抗体SMI-32对皮层锥体细胞加以鉴定、计数,与生长至同时期的大鼠运动区皮层锥体细胞数目比较,并测定不同时期培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果显示脑片体外生长良好,形态完整,皮层锥体细胞数目恒定,与体内生长的锥体细胞数目无显著差异,培养液中LDH含量稳定。大鼠脑片的培养以及锥体细胞组化鉴定技术为研究有关皮层运动神经元的疾病如肌萎缩侧索硬化提供了有效的方法。; 李春岩肖向建宋学琴刘卫刚李敏马征; 关键词：脑片锥体细胞

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马征

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