陈成
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p50PIK基因重组腺病毒的构建及对Hela细胞的影响
- 2011年
- 目的构建携带P50基因的重组腺病毒载体，观察其感染宫颈癌Hela细胞后对p-AKT（Thr308）的影响。方法以PcDNA3．1-p50PIK质粒为模板，构建带有p50PIK基因的重组腺病毒质粒Ad-p50PIK—GFP，酶切鉴定后经PacI线性化后转染HEK293包装细胞，观察细胞内绿色荧光蛋白（GFP）表达情况，并进行3轮扩增，收获带有目的片段的腺病毒。将重组腺病毒Ad．p50PIK—GFP感染Hela细胞并通过Western blot技术检测其对p-AKT的影响。结果将Ad．p50PIK-GFP经XhoI和KpnI双酶切鉴定和琼脂糖电泳，在1400bp附近有目的条带，送测序结果与GeneBank报道的序列完全一致，表明重组腺病毒Ad—p50PIK—GFP构建成功；然后将其转染HEK293细胞，绿色荧光表明Ad—p50PIK-GFP在HEK293包装细胞中成功表达；用SDS—PAGE电泳方法检测p50对Akt磷酸化的影响，结果表明高表达蛋白p50明显促进AKT的磷酸化（Thr308）。结论成功构建重组腺病毒Ad—p50PIK，p50在宫颈癌Hela细胞株中的过表达可使p-AKT表达升高。
- 李进曹小年陈成杨锐胡俊波王晶
- 关键词：重组腺病毒HELA细胞P-AKT
- c-Myc通过缺氧诱导因子-1α调控结肠癌细胞HT-29的增殖被引量：1
- 2013年
- 目的研究癌基因c-Myc对人结肠癌细胞HT-29中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对肿瘤细胞增殖的作用。方法构建高表达c-Myc的质粒pcDNA3.1-c-Myc;将构建好的pcDNA3.1-c-Myc质粒转染入HT-29细胞中,通过Western blot印迹法检测c-Myc在HT-29细胞中的表达情况。应用Real-time PCR和Western blot印迹法检测常氧和乏氧状态下HT-29细胞系中HIF-1α的mRNA和蛋白水平,同时检测HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA水平。共转染pcDNA3.1-c-Myc质粒和HIF-1α的siRNA入HT-29细胞中。应用噻唑蓝(MTT)法检测HT-29细胞的增殖情况。结果成功构建pcDNA3.1-c-Myc质粒;常氧、乏氧状态下转染pcDNA3.1-c-Myc质粒后,HT-29细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,VEGF和eNOS的mRNA水平明显升高,HIF-1α蛋白水平明显增高。高表达c-Myc的HT-29细胞增殖能力明显增强。共转染pcDNA3.1-c-Myc质粒和HIF-1α的siRNA后,HT-29细胞的增殖能力明显降低。结论在HT-29细胞系中c-Myc通过HIF-1α调控HT-29细胞的增殖。
- 陈成王桂华杨熹李小兰陶德定龚建平胡俊波
- 关键词：结肠癌C-MYC缺氧诱导因子-1Α细胞增殖
- Hint2促进乳腺癌细胞株MCF7对紫杉醇注射液的敏感性被引量：1
- 2013年
- 目的探讨高表达三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2)增强人乳腺癌细胞株MCF7对紫杉醇注射液敏感性的影响。方法构建高表达Hint2的载体pCMV-HA-Hint2并转染MCF7细胞,通过免疫荧光和Western blot方法检测Hint2的表达,采用噻唑蓝(MTT)法检测高表达Hint2后MCF7细胞对紫杉醇注射液的敏感性,采用流式细胞AnnexinV方法检测细胞凋亡。结果 pCMV-HA-Hint2转染36 h后,细胞的Hint2基因表达明显增加,5μmol.L-1的紫杉醇注射液处理24 h后,Hint2高表达组细胞活性为33.78%,而对照组细胞活性为44.12%。结论 Hint2高表达能显著增加MCF7细胞对紫杉醇注射液的敏感性。
- 蔡少鑫陈成杨熹邓豫李兆明李小兰胡俊波
- 关键词：紫杉醇注射液乳腺癌
- c-myc通过提高结肠癌细胞LoVo的HIF-1α表达促进血管生成被引量：4
- 2012年
- 目的研究癌基因c-myc对人结肠癌细胞LoVo中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对血管生成的作用。方法构建高表达c-myc的质粒pcDNA3.1-c-myc;将构建好的pcDNA3.1-c-myc质粒转染入LoVo细胞系中,通过Western blot检测c-myc在LoVo细胞中的表达情况。应用real-time PCR和Western blot检测常氧和乏氧状态下LoVo细胞系中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平及HIF-1α的蛋白水平。应用条件培养液培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察其形成血管的能力。结果成功构建pcDNA3.1-c-myc质粒;常氧、乏氧状态下转染pcD-NA3.1-c-myc质粒后,LoVo细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,VEGF的mRNA水平明显升高,HIF-1α蛋白水平明显增高。高表达c-myc的LoVo细胞上清液培养HUVECs细胞后能增强其成管能力。结论在LoVo细胞系中高表达c-myc,可以促进细胞HIF-1α和其下游的VEGF表达,从而促进血管生成。
- 陈成王桂华李兆明李小兰陶德定龚建平胡俊波
- 关键词：结肠癌C-MYC缺氧诱导因子-1Α
- 反式转录激活因子-氨基端24个氨基酸穿膜融合多肽对结直肠癌血管形成的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察反式转录激活因子-氨基端24个氨基酸（TAT-N24）穿膜融合多肽对结直肠癌血管形成的影响.方法 对结直肠癌细胞Lovo过表达p55PIK和/或同时给予p55PIK的特异性抑制剂TAT-N24后,通过Western blot法检测乏氧诱导因子-1α的表达,通过双荧光素酶报告系统检测血管内皮生长因子-A的启动子活性,并用酶联免疫吸附试验检测其蛋白分泌,最后通过体外血管形成实验检测p55PIK及TAT-N24对结直肠癌血管形成的影响.结果 过表达p55PIK促进结直肠癌细胞株Lovo中乏氧诱导因子-1α的表达,进而增强血管内皮生长因子-A的启动子活性（p55PIK组比对照组,常氧：9.1±1.1比1.0±0.2,乏氧：14.5 ±1.6比1.0±0.3）,并且促进其在培养基上清中的分泌[p55PIK组比对照组,常氧：（412±23） mg/L比（150±18） mg/L,乏氧：（859±203） mg/L比（233±12） mg/L],而且其条件培养基可促进脐静脉内皮细胞形成血管,而TAT-N24可拮抗上述过程,抑制结直肠癌的血管形成.结论 p55PIK可促进结直肠癌的血管形成,而TAT-N24作为其特异性抑制剂,可抑制结直肠癌的血管形成.
- 杨熹李海杰王桂华陈成杨锐龚建平胡俊波
- 关键词：结直肠癌血管形成血管内皮生长因子
- 姜黄素调控乳腺癌细胞增殖与转移机制研究被引量：6
- 2013年
- 目的研究姜黄素对人乳腺癌细胞MDA-MB-453中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其对肿瘤细胞增殖和转移的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法和细胞计数观察姜黄素抑制MDA-MB-453细胞增生作用;采用transwell侵袭小室测定姜黄素对MDA-MB-453转移的影响;采用Real-time PCR和Western blot印迹法检测常氧和乏氧状态下姜黄素对MDA-MB-453细胞系中HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平的影响,同时采用Real-time PCR和ELISA法检测姜黄素对HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平和蛋白表达水平的影响。结果姜黄素对MDA-MB-453细胞体外生长和转移具有抑制作用;常氧、乏氧状态下加入姜黄素后,MDA-MB-453细胞系中HIF-1α的mRNA水平无变化,但蛋白水平明显降低,VEGF mRNA水平和蛋白水平均明显降低。结论姜黄素通过HIF-1α调控MDA-MB-453细胞系增殖和转移。
- 蔡少鑫陈成杨熹李小兰李兆明胡俊波
- 关键词：姜黄素乳腺癌缺氧诱导因子-1Α细胞增殖细胞转移
- 肺转移瘤的诊断与手术指征探讨被引量：1
- 2009年
- 肺转移瘤是指肺外其他脏器的恶性肿瘤或部分良性肿瘤转移至肺部而形成的肿瘤，主要来源于结肠癌、直肠癌、骨肉瘤、软组织肉瘤、肾细胞癌等。传统观点多认为如果恶性肿瘤发生转移，已无手术治疗意义。但随着对肺转移性肿瘤的发生和发展机制不断的研究，以及肿瘤综合治疗手段的不断提高，使得人们对于肺转移瘤的手术治疗有了新的认识。肺部作为人体恶性肿瘤最常见的转移器官，
- 陈成赵波
- 关键词：肺转移瘤手术指征恶性肿瘤肺转移性肿瘤肿瘤综合治疗肿瘤转移
