赵明耀
- 作品数：96 被引量：327H指数：10
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学轻工技术与工程理学更多>>
- 对T细胞受体克隆型肽类的免疫应答(英文)被引量：10
- 1999年
- 目的：皮肤Ｔ细胞淋巴瘤（ＣＴＣＬ）是记忆性诱导Ｔ细胞肿瘤，表达独特的Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）的α和β链，两者各含有克隆性独特蛋白序列。这些序列由独特型或第３决定簇互补区（ＣＤＲ３）组成。理论上，来源于ＴＣＲＣＤＲ３的肽类可作为由主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅰ类分子提呈的肿瘤特异抗原。本研究旨在确定细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）是否识别ＣＤＲ３来源的肽类。方法：首先培育出能裂解２例ＣＴＣＬ病人自身的肿瘤细胞的ＣＴＬ（ＣＤ８＋）细胞株，然后检测这些ＣＴＬ对由原始Ｂ淋巴细胞提呈的源于自身恶性细胞ＴＣＲＣＤＲ３序列的合成肽产生应答的能力。结果：ＣＴＬ分泌肿瘤坏死因子（ＴＮＦα），对自身ＴＣＲβ链独特型肽产生应答，但对来源于其他ＴＣＲβ链独特型区的肽或对照肽不产生应答。抗ＭＨＣⅠ类分子的单克隆抗体（Ｗ６／３２）能阻断其肽的识别。结论：首先表明ＣＴＬ可识别具有ＣＴＣＬ病人个体独特性的恶性淋巴细胞克隆的特异ＭＨＣⅠ类分子相关肽并对其产生应答；又提示起刺激作用的肽来源于ＴＣＲβ链独特型区。该研究建立了这种机制，其他Ｔ细胞可通过此机制调解既定的抗原特异性Ｔ细胞。ＣＴＣＬ的肿瘤特异性表位的鉴定，可能有助开发强化或启动ＣＤ８介导的?
- 董子明张义国张义国赵明耀杨洪艳
- 关键词：皮肤肿瘤T细胞受体免疫应答
- 酪氨酸蛋白激酶p59fyn在白细胞介素-7诱导皮肤T细胞淋巴瘤信号传导中的作用(英文)
- 1999年
- 目的：探讨ＩＬ７对纯化瘤性Ｔ细胞群生长信号的刺激作用。白细胞介素（ＩＬ）７能刺激一些良性和恶性淋巴细胞群，包括来自皮肤Ｔ细胞淋巴瘤（ＣＴＣＬ）病人的肿瘤细胞。由于角化细胞产生ＩＬ７，因而ＩＬ７可能在ＣＴＣＬ和其他炎性皮肤病的生物学上起作用。方法：细胞从ＣＴＣＬ患者外周血中分离，体外ＩＬ７处理１～１０ｍｉｎ，ＤＮＡ合成法检测细胞的增殖。应用免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹技术，研究酪氨酸激酶类对ＩＬ７的信号应答。结果：与正常Ｔ细胞不同的是，在无丝裂原下用ＩＬ７体外培养的ＣＴＣＬ细胞增殖。ＩＬ７孵育之后细胞内不同底物快速发生酪氨酸磷酸化。ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ能抑制其细胞增殖和酪氨酸磷酸化。Ｓｒｃ家族蛋白之一酪氨酸激酶ｐ５９ｆｙｎ，在ＩＬ７处理１ｍｉｎ内发生酪氨酸磷酸化，而作为酪氨酸磷酸化可能候选的ＰＩ３激酶的ｐ８５亚基并未发生。结论：提示ＩＬ７诱导酪氨酸蛋白激酶ｐ５９ｆｙｎ是其介导信号传导途径的早期事件，且在ＣＴＣＬ的病理生理学中起重要作用。
- 董子明张义国杨洪艳杨洪艳赵明耀郑智敏
- 关键词：CTCLIL-7酪氨酸蛋白激酶信号传导
- 甲羟孕酮在复发转移性子宫内膜癌维持治疗中的临床应用被引量：2
- 2012年
- 目的评估甲羟孕酮在晚期子宫内膜癌维持治疗中的疗效。方法 40例一线化疗后的晚期子宫内膜癌患者,随机分为维持治疗组20例,口服甲羟孕酮片2次/日,500mg/次;对照组20例服用安慰剂,评价近期疗效和疾病进展时间。结果维持治疗组和对照组的有效率(RR)分别为0%和10%,疾病控制率(DCR)分别为100%和60%,中位PFS分别为25.7个月和13.2个月,差异有统计学意义。结论受体阳性晚期子宫内膜癌一线化疗后稳定的患者,使用甲羟孕酮维持治疗可使生存获益。
- 高湘玲赵明耀
- 关键词：子宫内膜癌甲羟孕酮雌激素受体孕激素受体
- 高转移结肠癌细胞微环境对人树突状细胞功能的影响
- 2009年
- 目的:探讨高转移结肠癌细胞SW620分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对人单个核细胞来源的树突状细胞(DC)分化发育的影响,为DC疫苗在结肠癌患者中的临床应用提供依据。方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的RPMI1640培养液诱导培养,第2天对照组同前培养,实验组在此基础上加入SW620条件培养基,均隔天半量换液,第4天加入超声破碎法制备的SW620抗原,第6天加入脂多糖。第8天收集对照组正常成熟DC和实验组肿瘤相关DC(TADC)。显微镜观察其形态,流式细胞仪检测其免疫表型,RT-PCR检测CD1amRNA的表达,混合淋巴细胞反应及体外杀伤活性实验检测其刺激T细胞增殖及杀伤能力。结果:TADC与正常成熟DC相比,细胞形态明显受到抑制。流式细胞仪检测PBMC、正常DC及TADCCD86及CD1a分子阳性率,差异均有统计学意义(F分别为46.95及19.09,P<0.001)。与正常DC比较,TADCCD86分子阳性率由(68.56±8.04)%降为(42.41±10.87)%,CD1a分子阳性率由(55.71±12.12)%降为(26.60±12.03)%(P均<0.05);CD1a基因表达降低,体外刺激T细胞增殖[(112.53±7.16)%vs.(91.26±6.62)%]及杀伤能力[(62.42±0.57)%vs.(50.37±2.21)%]均下降(t分别为6.17、17.41,P均<0.001)。结论:SW620条件培养基所营造的微环境对DC的诱导分化及其功能有明显的抑制作用,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一。
- 刘康栋秦珍珠路静杨洪艳黄幼田郑智敏赵明耀董子明
- 关键词：结肠癌树突状细胞肿瘤微环境SW620细胞
- 人直肠癌组织匀浆上清液对树突状细胞内皮化的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:观察人直肠癌组织匀浆上清液对人外周血来源的树突状细胞(DC)内皮化的影响。方法:用ELISA方法检测直肠癌组织、癌旁组织匀浆上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的含量。采集健康男性志愿者外周血单个核细胞,常规方法培养,分别在第1、3、7、10和14天收集细胞,流式细胞仪动态监测CD1a、CD31和CD34的表达。分3组培养DC细胞,分别在第3和7天加入直肠癌组织匀浆上清液、癌旁组织匀浆上清液及等体积生理盐水(对照组)。用免疫细胞化学方法检测3组细胞的CD1a、CD31及CD34双阳性和血管内皮细胞Ⅷ因子(vWF)的表达。结果:直肠癌组织匀浆上清液VEGF-A的含量[(0.837±0.345)μg/L]高于癌旁组织匀浆上清液[(0.236±0.216)μg/L](t=4.668,P<0.001)。不同培养时间收集的DC表面分子CD1a、CD31和CD34的阳性表达率差异均有统计学意义(F分别为1832.478、20.410和49.137,P均<0.001)。第3和7天,癌及癌旁组织匀浆上清液组CD1a+CD31+、CD1a+CD34+的表达率均高于对照组(F分别为342.21、544.70、107.09和189.72,P均<0.001);且癌及癌旁组织匀浆上清组第3天CD1a+CD31+、CD1a+CD34+的表达均高于第7天(t分别为13.110、25.480、9.115和21.550,P均<0.001)。癌[(6.3±1.1)个/HPF]、癌旁[(6.0±0.6)个/HPF]组织匀浆上清组vWF的表达均高于对照组[(0.8±0.1)个/HPF](F=176.57,P<0.001),但前2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:直肠癌组织匀浆上清液可促使未成熟DC发生内皮化。
- 吕丰收赵明耀蒋莉莉路静黄幼田杨洪艳郑智敏董子明
- 关键词：直肠癌树突状细胞内皮化
- 13种巴基斯坦草药对PC12细胞保护作用的研究
- 2011年
- 目的:选择13种巴基斯坦传统草药,观察其对PC12细胞增殖的影响,并探讨其对H2O2、谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用,为寻找神经细胞保护作用新药提供实验依据。方法:体外培养PC12细胞,应用不同浓度的H2O2、GLU,分别建立神经细胞损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率。结果:虎爪豆、诃子等能明显促进PC12细胞增殖作用(P<0.05);在H2O2 150μmol.L-1损伤模型中,药物组和模型组相比,罗勒、仙人掌、芦笋、灯油藤、诃子等能显著减轻H2O2的细胞损伤作用(P<0.05);在GLU 30mmol.L-1诱导PC12细胞损伤,与模型组比较,凤仙花、仙人掌、虎爪豆、诃子等均显示出损伤保护作用(P<0.05)。其中,诃子不仅能促进PC12细胞增殖,且在两种PC12细胞损伤模型中均具有较强的损伤保护作用。结论:具有促进PC12细胞增殖的药物为诃子、罗勒、虎爪豆;具有对抗H2O2损伤作用的药物有:诃子、凤仙花、仙人掌、芦笋、灯油藤、罗勒;具有减弱GLU诱导PC12细胞损伤的药物为:虎爪豆、诃子、凤仙花、仙人掌、芦笋、甘草;诃子在3种模型中均表现出较强的细胞损伤保护作用。本研究结果为神经退行性疾病药物的开发和选择提供了初步的实验依据。
- 梁岚孙丽华徐淑萍杨艳艳赵明耀Ahsana DarIqbal ChoudharyDr.BinaDr.Shaheen刘新民
- 关键词：PC12细胞H2O2谷氨酸
- 简便高效的原代HUVECs培养被引量：4
- 2009年
- 目的建立简便高效的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）体外分离、培养、冻存方法,以获得大量HUVECs为相关医学基础研究及组织工程学提供良好细胞来源。方法新鲜脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶消化,获得HUVECs,内皮细胞培养基（ECM）进行培养。倒置显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学、RT-PCR检测VWF、CD144的表达。HUVECs加入10%甘油的冻存液,置于液氮保存4周,冻存复苏后Western blot检测VWF、CD144蛋白水平的表达。结果HUVECs体外生长2-3 d可铺满单层,细胞呈梭形,漩涡状排列生长,传代后可见管腔样结构;高表达VWF和CD144;冻存后复苏的细胞分裂增殖旺盛,蛋白水平高表达VWF、CD144。结论脐静脉灌注胰蛋白酶消化法配合ECM培养可获取大量高纯度的内皮细胞,可作为相关研究良好的细胞来源。
- 路静赵军杨洪艳黄幼田郑智敏赵明耀董子明
- 关键词：脐静脉内皮细胞细胞冻存
- 牛膝多糖与锌对小鼠树突状细胞增殖分化和抗原提呈能力的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究牛膝多糖与锌单用及合用在异源性抗原负载的条件下对小鼠树突状细胞(DC)增殖分化和抗原提呈能力的影响,并通过体内实验证实其对荷瘤小鼠的免疫效应,探讨其发生机制。方法无菌处死正常小鼠获取其骨髓细胞,粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)体外诱导骨髓细胞生成DC,同时培养液中加入不同质量浓度的牛膝多糖(200、300、400μg/mL)、锌(0.02μg/mL)。通过显微镜、流式细胞检测技术观察牛膝多糖、锌单用与合用在异源性抗原负载的条件下对DC的影响,并通过体内实验观察对H22荷瘤小鼠脾指数、胸腺指数及肿瘤质量的影响。结果牛膝多糖和锌单用在异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓源性DC的分化、成熟及表面标记CD86、CD11a的表达,增强DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞反应,能够使荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的质量增加,明显抑制肿瘤的生长,并存在明显量效关系;中剂量为正性效应,高剂量为负性效应;但牛膝多糖和锌合用并不协同增强效应。结论牛膝多糖和锌在异源性抗原负载的条件下能够通过刺激DC的分化成熟,提高其抗原提呈能力,进而起到提高机体细胞免疫的作用。
- 孙丽莎冯婷路静黄幼田杨洪艳董子明赵明耀
- 关键词：牛膝多糖锌树突状细胞抗原负载
- DNA聚合酶β基因表达对NIH3T3细胞增殖影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察不同类型DNA聚合酶β(DNA Polymerase β,DNA pol β)在小鼠成纤维细胞(NIH3T3细胞)的表达及细胞增殖特性的变化。方法用脂质体转染的方法,将野生型(wild type,wt)和食管癌缺失突变型(delete mutional type,dmt)的polβ重组荧光载体pEGFP-C3-polβ转染NIH3T3细胞,建立稳定表达polβ的细胞系,通过荧光倒置显微镜观察其定位,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法绘制生长曲线,流式细胞仪测定其细胞周期。结果转染2种类型polβ的NIH3T3细胞株中,均有外源基因mRNA水平和蛋白水平的表达;荧光倒置显微镜结果显示,野生型的以细胞胞核为主,缺失突变型的polβ表达以细胞胞浆为主,从第3d开始,缺失突变型的细胞生长速度较野生型和对照组明显增快(P<0.05);转染缺失突变型NIH3T3细胞的S期细胞比例为68.29%,明显高于野生型的57.18%、对照组的58.12%和未转染NIH3T3细胞的57.35%(P<0.05)。结论外源野生型polβ基因表达后对NIH3T3细胞的增殖速度无明显影响,而缺失突变型则使其增殖速度加快。
- 赵军路静杨洪艳黄幼田赵继敏赵明耀赵国强张曦董子明
- 关键词：基因表达细胞增殖
- 中西医结合治疗糖尿病肾病的临床研究被引量：6
- 2009年
- 目的观察中西医结合治疗对糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)患者肾功能的保护作用,并初步探讨其作用的可能机制。方法将入选的214例糖尿病肾病患者采用随机分组对照法,分为中西医结合组采用益肾排浊汤配合贝那普利治疗和单纯贝那普利治疗组,两组给以相同饮食、运动、教育、降糖和对症处理,疗程均3个月,另设正常对照组,观察治疗24h尿蛋白总量(24-houruri naryprotein,24hUpro)、血肌酐(Serumcreatimine,Scr),肌酐清除率(Serumcre-atimi neclearancerat,Ccr)、尿素氮(BUN);血糖(Plasmaglucose,PG)、血脂;白细胞介素6(IL-6)的变化。结果治疗组和对照组均能降低Scr、24hUpro、BUN、PG、TGF-β升高Ccr(P<0.05orP<0.01),但治疗组疗效较对照组明显(P<0.05orP<0.01)。结论中西医结合治疗对肾功能改善优于单纯贝那普利方案,且治疗的机制可能与其下调白细胞介素6(IL-6)水平,升高Ccr有关。
- 王秀霞赵明耀
- 关键词：糖尿病肾病中西医结合肾功能IL-6
