胡维
- 作品数:7 被引量:38H指数:4
- 供职机构:首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- D-2聚体与脑血管的临床研究
- 2001年
- 目的:研究D-2聚体在脑出血和脑梗塞疾病中的诊断价值。方法:对60例脑梗塞60例脑出血病人进行了D-2聚体测定。结果:脑梗塞组D-2聚体的水平显著高于脑出血组。结论:该项检测时脑梗塞的诊断具有重要价值。
- 胡文立刘艳伟汪颜胡维
- 关键词:D-2聚体脑出血脑梗塞
- 苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达被引量:19
- 1998年
- 利用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术从欧芹总RNA分离制备了苯丙氨酸脱氨酶(PAL)cDNA,重组到质粒pBluescript及pET23b中,后者转化大肠杆菌JM109DE3获得PAL的高效表达。插入片段两端共920bp的测序结果与文献符合率为9978%。工程菌细胞裂解液用SDSPAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分析显示在分子量77kDa处有一条表达很强的蛋白区带,与PAL亚基分子量相符,约占菌体总蛋白的15%。用HPLC法检测到苯丙氨酸被PAL脱氨的产物肉桂酸,且该PAL酶活力特异性好,适于PKU治疗之用。
- 刘敬忠向华胡维朱章菱朱章菱李氢元
- 关键词:基因表达大肠杆菌苯丙酮尿症
- 欧芹苯丙氨酸脱氨酶cDNA在乳酸乳球菌中的表达研究被引量:10
- 1999年
- 将欧芹(Petroselinumcrispum)苯丙氨酸脱氨酶(PAL)cDNA亚克隆到组成型表达载体pMG36e启动子P32下游,电穿孔法转化乳酸乳球菌,获得有PAL表达活性的乳酸乳球菌工程菌(pMG36ePAL/L.lactisMG1363)。通过递归PCR合成了一段120bp的调控片段,用以将pMG36e改造为分泌型表达载体pXHS,以翻译偶联的方式表达PAL,可使PAL的N末端带上usp45信号肽,结果亦检测到PAL酶活性。自行分离克隆了乳酸乳球菌热休克蛋白基因dnaJ的启动子区域,构建了热诱导表达载体pXHJ,获得PAL热诱导表达工程菌(pXHJPAL/L.lactisIL1403),经30℃至37℃热诱导,可使PAL表达活性提高至2倍。
- 向华刘敬忠胡维祝锦祝锦
- 关键词:乳酸乳球菌基因表达苯丙酮尿症
- 酶联免疫吸附法检测肺炎支原体抗体IgG和IgM结果分析被引量:4
- 1999年
- 谭淑珍杨媛华胡维周艳刘敬忠
- 关键词:肺炎肺炎支原体IGGIGMELISA
- 用PCR法直接快速筛查重组阳性克隆被引量:8
- 2000年
- 目的:应用PCR法快速筛查插入有苯丙氨酸脱氨酶(PAL)cDNA重组阳性克隆。方法:用于PCR扩增的引物是位于载体pET23b启动子处的T7启动子引物和位于目的基因PALcDNA3′端终止密码TAA处的引物。以灭菌吸头挑一单菌落加入PCR体系扩增。结果:在筛查的3个克隆中,有2个阳性克隆,并且插入方向正确,经DNA序列测定得到进一步证实。结论:以PCR方法筛查重组阳性克隆,可以简便快速鉴定插入片段的大小和方向,不需提取质粒。
- 胡维向华周艳刘敬忠
- 关键词:基因克隆聚合酶链反应
- 乙型血友病患者的基因诊断
- 1997年
- 乙型血友病患者的基因诊断向华刘敬忠周艳卢大儒邱信芳薛京伦赵离钟胡维我们在新近建立的循环双脱氧指纹图谱法(cycle-dideoxyfingerprinting,cycle-ddF)的基础上,结合DNA自动测序技术,建立并完善了一套乙型血友病(HB)的...
- 向华刘敬忠周艳卢大儒邱信芳卢大儒赵离钟邱信芳
- 关键词:血友病乙型基因诊断
- 高苯丙氨酸血症大鼠基因疗法的实验研究被引量:4
- 2000年
- 目的 构建能表达活性苯丙氨酸脱氨酶 (PAL)的重组质粒 ,使其在乳酸乳球菌 (L .L)中表达 ,将苯丙氨酸 (phe)脱氨 ,从而减少外周血中phe的水平 ,达到治疗苯丙酮尿症 (PKU)或大鼠高苯丙氨酸血症的目的。方法 将欧芹PALcDNA重组到质粒pMG36e中 ,转化乳酸乳球菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)及高效液相色谱法 (HPLC)等技术筛选阳性表达株 ,将工程菌pMG36ePAL/L .L .制成不同剂型 ,“治疗”高苯丙氨酸血症模型大鼠。结果 获得了能表达PAL的乳酸乳球菌基因工程菌株。灌喂pMG36ePAL/L .L .制成的肠溶微囊及抗酸缓冲液体制剂 ,观察到高苯丙氨酸血症大鼠外周血phe水平明显降低 (2组治疗后 5d为 1 2 5mg % ,第 12d为 1 75mg% ) ,与对照组相比 (治疗后 5d为 3 75mg % ,第 12d为 2 9mg% )有显著性差异。不同剂型显示出的效果有差别。结论 能表达活性PAL的基因工程菌 (乳酸乳球菌 )的适当口服剂型 ,能够显著降低高苯丙氨酸血症大鼠外周血phe水平 。
- 贾兴元刘敬忠向华胡维周艳张鹏
- 关键词:苯丙氨酸苯丙酮尿症基因治疗