刘敬忠
- 作品数：185 被引量：739H指数：13
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 两种常见缺失型α-地中海贫血快速检测技术的研究被引量：9
- 2001年
- 目的 建立简便快速准确可推广使用的检测α 地中海贫血 (α Thal)右侧缺失型 ( α3 .7)和左侧缺失型 ( α4 .2 )的聚合酶链反应 (PCR)方法。方法 自行研究设计两组引物。优化PCR反应条件。PCR反应产物用 1%琼脂糖凝胶电泳分离 ,溴化乙啶染色 ,UVP凝胶成像仪下观察记录电泳图谱。结果 运用引物A′、B′、C3进行PCR ,出现 170 0bp扩增带表示 α3 .7,出现 190 0bp扩增带表示α 珠蛋白基因正常或为野生型。二条扩增带同时出现表示是 α3 .7缺失杂合子。无任何扩增带表示是东南亚型缺失纯合子。运用引物G′、E、F′进行PCR ,根据出现 15 80bp扩增带和 1180bp扩增带可诊断为 α4 .2 ,还可区分杂合子与纯合子。结论 本研究设计的两组引物及优化的PCR条件 ,可以简便准确地检测出α Thal标本中有无 α4 .2 和 α3 .7。
- 刘敬忠周桔王立荣周艳
- 关键词：Α-地中海贫血聚合酶链反应
- 苯丙氨酸脱氨酶在乳酸乳球菌NICE系统的高效表达及其实验动物研究被引量：13
- 2002年
- 为构建苯丙氨酸脱氨酶的一种更新更高表达的基因工程菌 ,取得治疗高苯丙氨酸血症大鼠的更佳疗效。将欧芹PALcDNA重组到质粒pNZ80 48中 ,构建翻译融合载体和转录融合载体 ,分别转化乳酸乳球菌NZ90 0 0。对两种高效表达菌株的酶活性差异进行比较 ,观察Nisin诱导的动态进程 ,并利用新鲜培养的p(NZ80 48 PAL) 1 NZ90 0 0工程菌进行了高苯丙氨酸血症大鼠 (称PKU动物模型 )的治疗实验。结果表明 :(1)翻译融合型菌株具有更高的酶活性 ;(2 )当Nisin的诱导时间达 6h时 ,产物肉桂酸生成量基本达到峰值 ;(3)给高苯丙氨酸血症大鼠灌喂新鲜培养的p(NZ80 48 PAL) 1 NZ90 0 0工程菌 (翻译融合型 ) ,观察到该工程菌能显著降低模型动物血中Phe浓度 。
- 张晶刘敬忠谭淑珍贾兴元周艳
- 关键词：乳酸乳球菌实验动物苯丙酮尿症基因治疗
- 遗传病等先天性疾病的基因诊断技术进展被引量：8
- 2002年
- 刘敬忠
- 关键词：遗传病先天性疾病基因诊断
- 十四味建中汤对再生障碍性贫血小鼠脾细胞基因表达的影响被引量：6
- 2003年
- 目的:从分子水平探讨补肾健脾中药十四味建中汤治疗再生障碍性贫血(再障)的作用机制。方法:建立再障小鼠模型,通过抑制差减杂交,分离十四味建中汤治疗组小鼠和模型对照组小鼠之间脾细胞的差异表达基因。结果:分离出10个经十四味建中汤治疗后表达上调的差异表达基因,3个经十四味建中汤治疗后表达下调的差异表达基因。十四味建中汤促进免疫球蛋白α链恒区、α珠蛋白、β^(maj)珠蛋白、层粘连蛋白受体、谷胱甘肽过氧化物酶、核糖体蛋白S6等基因表达,抑制鸟氨酸脱羧酶抗酶等基因表达。结论:十四味建中汤治疗再障小鼠有效,可促进再障小鼠造血和免疫器官脾脏等功能的恢复。中医补肾健脾疗法的机制可能与上述基因表达变化有关。
- 王国忠刘敬忠肖白
- 关键词：再生障碍性贫血小鼠脾细胞基因表达中医药治疗
- CD44在胃癌中异常表达的临床意义被引量：10
- 2001年
- 胃癌的转移和扩散是依靠细胞与细胞外间质及其他细胞的一系列的相互作用,其中肿瘤细胞表面的粘附分子在这一过程中起着重要作用[1].细胞粘附分子CD44是一种存在于细胞表面的跨膜糖蛋白,能介导淋巴细胞归巢并参与细胞-细胞间粘附[2],在肿瘤的发生、发展和转移中起重要的作用[3].人类CD44基因位于第¨号染色体短臂上,由20个高度保守的外显子构成,它包括10个组成型外显子和10个V区变异性拼接外显子.组成型外显子的转录片段存在于所有CD44转录子中,仅含有组成型外显子的CD44转录子称作标准型CD44S转录子.V区外显子在转录时可以随机拼接,也可以跳跃的方式拼接,这些有变异型拼接外显子插入的CD44转录子称为变异型CD44 V转录子[4,5 ].我们采用逆转录PCR(RT-PCR)结合Nested PCR技术对59例内镜下活检胃癌标本及其癌旁正常组织的CD44基因表达进行检测,旨在探讨其对胃癌的早期诊断及预测其预后转归的意义.
- 刘宇宏刘敬忠肖白王世鑫
- 关键词：胃癌CD44遗传学基因表达抗原
- 三氧化二砷改变多发性骨髓瘤细胞基因表达的研究被引量：8
- 2005年
- 目的 研究三氧化二砷(As2O3 )对多发性骨髓瘤(MM)细胞基因表达的影响,探讨As2O3 治疗MM的分子机制。方法 将MMU266细胞分成对照组和实验组。取培养48h的2组细胞提取总RNA后分离mRNA,应用抑制性差减杂交法分离差异表达基因,并连接于pGEM TEasyVector,转化大肠杆菌JM109,构成差减cDNA文库,经蓝白斑筛选后挑选白色菌落,提取质粒,序列测定后进行同源性比较分析。结果 第1次差减分离出5个下调的基因:①氨基肽酶N;②人类肿瘤翻译控制蛋白1;③人类ATP合成酶A链;④信号识别颗粒A10; ⑤线粒体ATP合成酶/ATP酶亚单位6。第2次差减分离出4个表达上调的基因:①钙结合蛋白A10;②角质素6A;③相对分子质量为45×103 的含MIP重复成分的剪接因子;④多聚腺苷酸结合蛋白。结论 As2O3 可能通过改变上述基因的表达,发挥其抑制MM细胞增殖、促进凋亡和诱导分化的作用。
- 李翠联陈世伦陈文明刘敬忠肖白张海波
- 关键词：AS2O3多发性骨髓瘤三氧化二砷ATP合成酶基因剪接因子
- 中国北方汉族人群哮喘患者受体基因多态性研究被引量：4
- 2001年
- 邢军王辰刘敬忠闫梅黄克武肖白
- 关键词：哮喘受体汉族
- 白血病p16基因失活的研究
- 1998年
- 为探讨白血病p16基因失活的发生率及其与疾病预后的关系,对48例初发或复发的白血病进行了p16基因失活研究。首先应用多重聚合酶链反应(MPCR)方法扩增p16基因纯合子缺失,然后用限制性内切酶-PCR方法检测p16基因甲基化。研究结果表明,48例患者中有p16基因失活者10例(占20.4％),其中p16纯合子缺失者5例(2例伴有9p丢失),p16基因甲基化者5例。有p16基因失活者,病情进展迅速,治疗效果差,患者在短期内死亡。结论提示:p16基因失活在部分白血病的发生、发展中起重要作用;有p16基因失活者预后较差;p16基因失活的检测对于判断预后具有重要意义。
- 陈文明朱嘉芷谭淑珍肖白戴红刘敬忠
- 关键词：白血病P16基因基因失活纯合子缺失基因甲基化
- 利用孕妇血浆DNA检测胎儿性别的研究被引量：15
- 2004年
- 本文探讨应用孕妇血浆中游离DNA进行无创性产前性别诊断的可行性。用柱分离法提取73例孕妇血浆中DNA,用巢式PCR技术检测其胎儿SRY基因。结果73位孕妇血浆DNA含量为0.0062～0.3399μg/μL。巢式PCR检测胎儿SRY基因的灵敏度为97.37%(37/38),假阴性率2.86%(1/35),特异度85.71%(30/35),假阳性率13.16%(5/38),总符合率91.78%(67/73)。采用孕妇血浆胎儿DNA和巢式PCR技术可以快速简便的进行无创性产前性别诊断,诊断结果的准确率为91.8%,对性连锁遗传病的预防具有重要意义。
- 陈振斌闫梅雷箴肖白梁燕朱章菱黄莉嘉刘敬忠
- 关键词：巢式PCR血浆DNA性别鉴定
- 增加ABI-377自动测序仪测序长度的改进措施
- 2002年
- 刘敬忠李文艳Steve S.Sommer
- 关键词：DNA测序技术
