翁幸鐾
- 作品数：100 被引量：466H指数：13
- 供职机构：宁波市第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省中医药管理局科研基金浙江省医药卫生科学研究基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 大肠埃希菌尿液分离株可移动遗传元件研究被引量：28
- 2010年
- 目的调查大肠埃希菌尿液分离株中质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件的存在情况。方法收集宁波市第一医院2008年10月～2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析10种可移动遗传元件:traA、trbC、tnpA、tnpU、tnp513、tnsA、merA、intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3。结果28株大肠埃希菌共检出3种基因:traA、trbC、intⅠ1,其余7种基因未检出;各种基因阳性率以traA最高25株(89.3%),intⅠ1次之19株(67.9%),trbC8株(28.6%);所有28株(100.0%)至少检出1种基因,各菌株基因阳性数1～3种,5株ECO同时检出3种基因,13株同时检出2种基因,10株仅检出1种基因。结论同时检测10种可移动遗传元件是国内首次报道,traA和intⅠ1基因阳性率较高,而trbC基因阳性率较低;可移动遗传元件介导各种耐药基因使受体菌表现为多药耐药,检出trbC基因为国内首次报道。
- 翁幸鐾糜祖煌
- 关键词：大肠埃希菌尿液转座子整合子可移动遗传元件
- 大肠埃希菌尿液分离株中检出gyrA基因新变异株被引量：13
- 2010年
- 目的调查大肠埃希菌尿液分离株中喹诺酮类耐药相关基因的存在与变化状况。方法收集宁波市第一医院2008年10月到2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株，采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法分析1种染色体介导的喹诺酮类耐药相关基因（gyrA基因）和5种质粒介导的喹诺酮类耐药相关基因[qnrA、qnrB、qnrS、aac（6′）-Ⅰb、qepA]。结果28株大肠埃希菌检测到1株aac（6′）-Ⅰb-Cr基因阳性株（经测序比对证实），qnrA、qnrB、qnrS、qepA基因均未检出。gyrA基因83位密码子28株菌都有突变（100．0％），其突变方式为TCG→83→TTG，导致氨基酸从丝氨酸（S）-83→亮氨酸（L）；87位密码子22株菌（78．6％）有突变，可分为两种突变方式：21株（75．0％）突变方式为GAC-87→AAC，导致氨基酸从天冬氨酸（D）-87→天冬酰胺（N）；5号株gyrA基因（3．6％）为新亚型，其突变方式为GAC-87→TAc，导致氨基酸从天冬氨酸（D）-87→脯氨酸（Y），另6株菌87位密码子无突变。结论本组大肠埃希菌gyrA基因突变率为100．0％，是喹诺酮类耐药的主要原因。其他耐药相关基因阳性率很低。
- 翁幸鐾糜祖煌
- 关键词：大肠埃希菌喹诺酮类多重耐药GYRA
- 磷霉素、米诺环素等抗生素对bla_(KPC-2)肺炎克雷伯杆菌的体外药敏研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究筛选治疗产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌的敏感性抗生素。方法用氯霉素、多西环素、磷霉素、米诺环素和替加环素对已知blaKPC-2菌株进行体外药敏试验。结果氯霉素、多西环素米诺环素、磷霉素和替加环素耐药率分别为20%、17%、15%、6%和5%。结论本研究所选用抗生素的耐药率明显低于常规抗生素。
- 史煜波胡丽庆翁幸鐾王盛
- 关键词：磷霉素米诺环素多西环素
- 多药耐药肺炎克雷伯菌尿液分离株检出gyrA基因新亚型被引量：4
- 2011年
- 目的了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景。方法采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒)遗传标记、抗菌制剂外排泵基因。结果该株多药耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类药物基因检出blaTEM,耐氨基糖苷类药物基因检出aph(3′)-Ⅰ,耐喹诺酮类药物基因检出gyrA,Ⅰ类整合子遗传标记检出intⅠ1,转座子遗传标记检出tnp513,接合性质粒遗传标记检出trbC;抗菌制剂外排泵基因检出qacE△1-sul1,gyrA基因是新亚型(GenBank登录号:JN232083),83位密码子突变方式为TCG→TTC,导致氨基酸从丝氨酸(S)→苯丙氨酸(F);87位密码子突变方式为GAC→GCC,导致氨基酸从天冬氨酸(D)→丙氨酸(A)。结论携带多药耐药基因和抗菌制剂外排泵基因是这株肺炎克雷伯菌呈多药耐药的主要原因,携带多种可移动遗传元件使细菌的耐药性在同种细菌菌株之间,甚至不同种细菌菌株之间得以快速传播。
- 陈刚糜祖煌翁幸鐾孙定河
- 关键词：多药耐药肺炎克雷伯菌耐药相关基因整合子转座子GYRA基因
- 20株泛耐药鲍氏不动杆菌亲缘性分析被引量：1
- 2011年
- 本研究在长江三角洲4家市级医院收集20株泛耐药鲍氏不动杆菌（pandrug—resistant Acinetobacter baumannii，PDR-ABA），为了解其亲缘性，对这20株菌中的21种β-内酰胺类耐药相关基因、15种氨基糖苷类耐药相关基因以及季胺类耐药相关基因进行分析。
- 翁幸鐾糜祖煌
- 关键词：鲍氏不动杆菌亲缘性分析
- 尿道分离产blaKPC-9型碳青霉烯酶大肠埃希菌的耐药基因研究被引量：1
- 2014年
- 大肠埃希菌是医院感染的重要病原菌，该菌可产生多种β-内酰胺酶，包括KPC-2、KPC-3及 KPC-9型碳青霉烯酶类，此酶可在质粒间传播。目前产blaKPC-9型大肠埃希菌株国内尚未见文献报道。我们在1株大肠埃希菌中检测到KPC-9型碳青霉烯酶，现报道如下。
- 胡丽庆王盛史煜波翁幸鐾
- 关键词：大肠埃希菌碳青霉烯酶尿道Β-内酰胺酶
- 多药耐药肺炎克雷伯菌毒力基因研究被引量：4
- 2015年
- 目的了解多药耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)中5种毒力基因存在情况,为临床治疗提供参考依据。方法收集2008年8月-2010年5月杭州市和湖州市6所医院共47株MDRKP,采用PCR及序列分析方法检测5种毒力基因(arr、magA、rmpA、hofA和ompT)。结果 47株MDRKP中检测到arr和magA两种毒力基因,检出率分别为29.8%和17.0%;6所医院A、B、C、D、E、F的MDRKP分离株中毒力基因arr的检出阳性率分别为26.7%、81.8%、0、14.3%、0、0,6所医院A、B、C、D、E、F的MDRKP分离株中毒力基因magA的检出阳性率分别为0、0、0、0、0、88.9%。结论 MDRKP中毒力基因arr和magA具有一定的携带率,在MDRKP中检出毒力基因arr和magA为国内首次报道。
- 姜如金朱健铭翁幸鐾吴康乐孔海深
- 关键词：肺炎克雷伯菌多药耐药毒力基因
- 耐药铜绿假单胞菌临床分离株β-内酰胺酶基因检测研究被引量：4
- 2020年
- 目的研究耐药铜绿假单胞菌临床分离株β-内酰胺酶基因的携带状况,及其对β-内酰胺类抗菌药物耐药性的作用。方法收集2018年3月至2019年5月浙江省杭州市和宁波市两个地区6所医院住院患者首次发现感染时临床分离的98株耐药铜绿假单胞菌,其中宁波地区39株,杭州地区59株。所有菌株采用琼脂稀释法对14种抗菌药物进行敏感性试验,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A、B、C、D四类共39种β-内酰胺酶基因携带情况,阳性基因测序后作BLAST比对。采用SPSS 24.0软件对数据进行分析。结果 98株耐药铜绿假单胞菌中,多重耐药(MDR)菌占81.63%,广泛耐药(XDR)菌占12.25%。所有菌株对多黏菌素B敏感,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为94.90%和82.65%,宁波地区分离株对阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素的耐药率高于杭州地区分离株(χ^2=31.962、22.440和29.671,P<0.01),杭州地区分离株对氨曲南和亚胺培南的耐药率均高于宁波地区分离株(χ^2=4.181和5.543,P<0.05)。共检出7种β-内酰胺酶基因,其中PDC和OXA-50群的检出率最高,均为100.00%,TEM、GES和OXA-10群只在宁波地区分离株中检出,KPC只在杭州地区分离株中检出。β-内酰胺酶基因阳性模式有7种,所有菌株均携带PDC和OXA-50群,55株(56.12%)只检出PDC和OXA-50群。检出PDC、OXA-50群基因为国内首次报道。结论携带PDC和OXA-50群基因是导致铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因。
- 朱健铭翁幸鐾张美琴凌莉萍袁杰
- 关键词：假单胞菌铜绿耐药Β-内酰胺酶基因PDC
- 黄芩水煎剂对尿道致病性大肠埃希菌的转录组影响分析被引量：13
- 2017年
- 目的探讨黄芩水煎剂抑制尿道致病性大肠埃希菌的分子机制。方法采用RNA-seq技术分析黄芩水煎剂对尿道致病性大肠埃希菌临床分离株(NB8)转录组的影响。设黄芩组和阴性对照组2个组,黄芩组用10倍MIC浓度的黄芩水煎剂(62.5 mg/mL)作用于尿道致病性大肠埃希菌NB8株30 min,对照组给等量生理盐水,提取细菌总RNA,去除rRNA,反转录合成cDNA,在HiSeq2000测序平台上进行转录组测序,利用BIGpre、Tophat、Cufflinks等生物信息学工具软件进行转录组数据处理;并将得到的表达谱作差异表达、GO和COG功能富集以及KEGG代谢通路分析。结果黄芩组和对照组之间差异表达基因共有1 665个,其中上调基因为1 169个,下调基因为496个;在黄芩水煎剂的作用下,尿道致病性大肠埃希菌NB8株糖酵解、三羧酸循环和脂肪酸生物合成等关键代谢途径的编码基因以及核糖体蛋白的编码基因显著下调,而细菌趋化性和鞭毛组装途径以及ABC转运蛋白通路相关基因表达显著上调。结论阐明了黄芩水煎剂抑制尿道致病性大肠埃希菌的分子机制,黄芩作用的靶位是糖酵解、三羧酸循环、脂肪酸的生物合成途径和蛋白质的翻译;此外,细菌趋化性、鞭毛组装途径和ABC转运蛋白在细菌对黄芩的应激反应中也具有重要作用。
- 朱健铭翁幸鐾姜如金吴晋兰贺子龙姚娜
- 关键词：黄芩尿道致病性大肠埃希菌转录组RNA-SEQ差异表达基因分子机制
- 2006-2008年大肠埃希菌耐药基因的研究被引量：14
- 2011年
- 目的了解耐药大肠埃希菌多药耐药机制的时间变化趋势。方法收集南京医科大学第一附属医院2006年3月-2008年11月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共60株,采用聚合酶链反应检测多种耐药基因,利用SPSS统计软件进行指标和样本聚类分析。结果除对亚胺培南敏感外,耐药大肠埃希菌对多种抗菌药物耐药;β-酰胺类耐药基因、氨基糖苷类耐药基因、喹诺酮类耐药基因和基因突变、消毒剂和灭菌剂相关基因、可移动元件遗传标记基因均有检出;2007年大多耐药基因检出率低于其他两年;qacE△1和intI1存在时间上的差异(P=0.045),2008年的检出率是最高的;3年间膜孔蛋白突变率、teha和mdfa检出率均为100.0%;聚类分析发现intI1和qacE△1、tnp513和ISCR1相对稳定,但质粒traA、trbC和插入序列IS26、ISEcp1的位置不固定;2008年菌株的同源性更明显。结论耐药基因时间变化特征不明显,但耐药机制同可移动遗传元件紧密相关。
- 金辉赵旺胜翁幸鐾糜祖煌
- 关键词：大肠埃希菌耐药基因可移动遗传元件聚类分析
