王若菡
- 作品数：37 被引量：88H指数：5
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗人脑髓鞘碱性蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2003年
- 陈建业刘戟王若菡陈俊杰
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 人脑髓鞘碱性蛋白cDNA重组质粒pRK41转化及全长编码区体外扩增被引量：1
- 1993年
- 作者将含人脑髓鞘碱性蛋白(MBP)编码区和3’端非翻译区(1.2kb)的重组质粒pRK41—1.2转化宿主菌E.coli JM109,用非同位素标记鼠MBP cDNA克隆片段作探针,经菌落原位杂交筛选出阳性克隆并以此为模板,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出含21.5kd MBP全长编码序列(600bp),又经限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ消化,电泳结果进一步证实该PCR产物的特异性,为人MBP全长编码序列。
- 程汉华陈俊杰王若菡李昌龙史英丽杨鲁川
- 关键词：CDNA分子杂交聚合酶链反应
- 癫痫患者血清髓鞘碱性蛋白及其抗体的变化被引量：11
- 1996年
- 癫痫患者血清髓鞘碱性蛋白及其抗体的变化周树舜王晓明陈俊杰周东张裕平王若菡李昌隆我们采用经改进的酶联免疫吸附同步测定法［１］，对７６例原发性癫痫、４０例外伤性癫痫、３０例闭合性颅脑损伤后遗症、４０例神经系统功能疾病、１５７例正常人髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）...
- 周树舜王晓明陈俊杰陈俊杰周东周东李昌隆
- 关键词：癫痫髓鞘碱蛋白抗体血清
- BDNF对H_2O_2诱导人成纤维细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2004年
- 目的研究脑源性神经营养因子 (BDNF)对H2 0 2 诱导人成纤维细胞 (hFB)凋亡的作用。方法 将含人Ⅰ型胶原a1链(COLIAl)基因启动子和增强子元件并在其 3′端接BDNFcDNA的微基因pSVCEPBFCAT ,经脂质体介导转染hFB并驱动BDNF异位表达 ,采用四唑盐 (MTT)显色法检测细胞增殖 ,吖啶橙荧光染色显微镜观察细胞形态的改变 ,琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂。结果 经 2 0 0 μmol/LH2 O2 作用 2 4h后 ,pSVCEPBFCAT转染组和对照组包括未转染hFB、空载体pSVCEPCAT转染hFB的细胞生长抑制率分别为 35 %和≥ 84 % ,p <0 .0 0 1;对照组hFB普遍可见凋亡细胞特有的形态学及生物化学改变 ,如胞浆和核固缩、染色质断裂、DNA电泳呈阶梯状条带 ,而pSVCEPBFCAT转染hFB未发现上述凋亡特征。结论 BDNF促进hFB增殖和拮抗H2 O2 诱导凋亡 ,明显抑制H2 O2 对hFB的细胞毒性。
- 陈建业王晓明唐中陈瑾歆刘戟王若菡刘智敏陈俊杰
- 关键词：BDNFH2O2成纤维细胞细胞凋亡
- 腺相关病毒介导人含脑源性神经营养因子基因在体外成纤维细胞中表达的研究
- 2001年
- 贺民毛伯镛陈俊杰高立达刘智敏李胜富王若菡游乐然陈娘
- 关键词：中枢神经系统疾病腺相关病毒脑源性神经营养因子成纤维细胞
- 老年期痴呆患者血清髓鞘碱性蛋白及其抗体的变化
- 1999年
- 目的探索老年期痴呆患者是否存在脑神经元髓鞘损害。方法应用简易的酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）测定法对１１３例老年期痴呆患者包括阿尔茨海默病（ＡＤ）７４例，多发性梗塞性痴呆（ＭＩＤ）３９例与６６名老年健康人的血清髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）及其抗体（ＡｎｔｉＭＢＰ）进行检测。结果本研究显示老年期痴呆患者组血清ＭＢＰ阳性率（３１９％）非常显著地高于老年健康人组（６１％），Ｐ＜０００５；而血清ＡｎｔｉＭＢＰ含量老年期痴呆患者组（１／Ａ６３０值＝６２１±２３９）与老年健康人组（１／Ａ６３０值＝５８８±１７９）的差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。结论老年期痴呆患者存在脑神经元进行性退变，脱髓鞘及血脑屏障通透性改变。
- 葛炜程吟梅张曙云叶善龙陈俊杰王若菡李昌隆
- 关键词：阿尔茨海默病髓鞘碱性蛋白抗体
- 人21.5kDa MBP基因对肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡作用研究
- 2009年
- 目的探讨人21.5kDa髓鞘碱性蛋白(MBP)对肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的影响。方法用含21.5kDa MBP基因的pSVCEP-MBP-CAT质粒转染肝癌细胞(HepG-2),设空质粒转染为对照组,用RT-PCR、Western blot杂交检测转染效果,后以H2O2处理上述细胞,通过MTT测定细胞增殖曲线,DNA琼脂糖电泳、免疫细胞化学分析、彗星电泳、TUNEL原位杂交等多种方法检测凋亡及相关蛋白的表达情况。结果人21.5kDa MBP基因在肝癌HepG-2细胞转染成功,MTT测定细胞增殖曲线显示阳性转染组细胞有增殖和抗凋亡的作用,DNA琼脂糖电泳显示对照组有大量的DAN ladder形成,Caspase-3免疫组化证实对照组细胞Caspase-3表达显著升高,彗星电泳和TUNEL原位杂交显示对照组DNA损伤及凋亡严重而转染组较轻。结论人21.5kDa MBP对肝癌HepG-2细胞有促进增殖和抗凋亡的作用。
- 潘虹任思冲何宣霖尉艳霞王若菡杨荫刘戟
- 关键词：髓鞘碱性蛋白凋亡HEPG-2转染彗星电泳
- 3种方法提取洋葱中的类黄酮物质对肝癌细胞株HepG2的作用被引量：12
- 2008年
- 目的研究3种方法提取洋葱中的类黄酮物质对肝癌细胞株HepG2的作用。方法采用水煎煮法、50%乙醇回流法及50%乙醇冷浸法从洋葱中提取类黄酮物质,将其分别加入处于对数生长期的HepG2肝癌细胞中培养,以PBS为对照组,20、30、40、50、70μg.ml-1的类黄酮物质为实验组,用MTT法分别测定给药前及给药72 h后各浓度组在490 nm处的吸光度。结果水煎煮法、50%乙醇回流法及50%乙醇冷浸法提取的类黄酮物质抑制HepG2肝癌细胞生长的起始浓度分别为40、50、40μg.ml-1,随着浓度的增加,抑制作用显著增强。结论洋葱中类黄酮物质对体外培养的HepG2肝癌细胞表现出明显的抗肿瘤活性,50%乙醇冷浸法所提类黄酮物质的抗肿瘤活性最强。
- 尉艳霞何宣霖王若菡刘戟
- 关键词：类黄酮物质洋葱HEPG2肝癌细胞
- 脑源性神经营养因子基因转染培养肌母细胞的表达被引量：1
- 2001年
- 目的 了解含脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT在培养肌母细胞中的表达情况及LipofectAMINE阳离子脂质体介导的转染效率。 方法 按每 2 μg表达质粒PSVCEPBDNF CAT由 2 0 μlLipofectAMINE包裹后转染至细胞浓度为 2× 1 0 8个 /L的3 .5cm培养皿培养的肌母细胞中 ,连续观察细胞形态 ,48h后用免疫细胞化学和免疫电镜的方法来检测其表达情况。结果 培养肌母细胞在转染 6h吞噬脂质体最显著 ,转染 48h后 ,40 %的肌母细胞胞质内有BDNF基因表达 ,免疫电镜结果证实表达在细胞质近胞膜处。结论 含BDNF微基因的表达质粒PSVCEPBDNF CAT可以在培养肌母细胞中表达 ,脂质体转染的方法简便、有效。
- 刘艳辉毛伯镛陈俊杰王若菡高立达程永忠张杰李胜富
- 关键词：脑源性神经营养因子基因转染免疫细胞化学BDNF
- 人神经生长因子基因在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 为进一步研究神经生长因子 (β- NGF)及其基因的结构及功能奠定基础。方法 自行设计合成一对特异引物 ,直接从人血细胞基因组 DNA中 PCR扩增出 NGF基因片段 ,克隆至 p GEM- T Easy载体 ,p GEM- T- NGF克隆片段再定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T,构建的重组体 p5 TNF转化大肠杆菌 JM10 9并经IPTG诱导表达。结果 经限制性酶谱和 DNA测序确证 ,p GEM- T- NGF克隆片段为 β- NGF全长编码序列(380 bp) ;SDS- PAGE、分光光度计扫描和 Western印迹显示 ,p5 TNF转化菌有 40 .5× 10 3u特异区带 ,融合蛋白表达量为 5 0 3.2 mg/ L,占菌体可溶性蛋白总量 (7.4g/ L) 6 .8% ,该产物具 NGF抗原活性。结论 本研究成功克隆 β-NGF基因全长编码序列并在大肠杆菌中获稳定表达 ,同时证实国人 β-
- 何晓嫱陈俊杰王若菡游乐然刘戟陈建业林佳
- 关键词：神经生长因子大肠杆菌基因表达基因治疗
