王梦莹
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学部地方病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管细胞黏附分子-1在大骨节病软骨细胞异常分化过程中的作用被引量：4
- 2018年
- 目的观察血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1）在氧化应激诱导的肥大软骨细胞、大骨节病（KBD）儿童和成人关节软骨以及低硒和T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨的表达变化，探讨VCAM-1在大骨节病深层软骨细胞坏死以及分化异常中的作用。方法采用1％混合液（含10mg/L胰岛素、5．5mg／L转铁蛋白、6．7μg/L亚硒酸钠）对小鼠软骨前体细胞ATDC5作用21d，诱导为肥大软骨细胞，选择5-氨基-3-（4-吗啉基）-1，2，3-恶二唑盐酸盐（3-morpholino-sydnonimine hydroehloride，SIN-1）作为自由基供体构建氧化应激致肥大软骨细胞坏死模型。采用荧光定量（Real-time）PCR检测不同浓度SIN-1诱导的肥大软骨细胞中VCAM-1mRNA表达情况。采用免疫组织化学技术检测KBD儿童、成人及对照组关节软骨各层软骨细胞VCAM-1表达情况。采用免疫组织化学技术检测低硒和T-2毒素中毒KBD大鼠动物模型膝关节软骨及骺板软骨各层软骨细胞VCAM-1的表达水平。结果随SIN-1浓度梯度（0、1、3、5mmoL／L）增高，诱导的小鼠关节软骨肥大细胞中VCAM-1mRNA表达降低（1．00±0．00、1．22±0．20、0．71±0．22、0．37±0．16），组间比较差异有统计学意义（F=27．788，P〈0．05）；KBD儿童关节软骨表层、中层VCAM-1阳性细胞率[（16．08±5．20）％、（19．20±9．71）％]高于对照组[（0．00±0．00）％、（0．00±0．00）％]，深层VCAM—1阳性细胞率[（7．00±4．40）％]低于对照组[（51．60±20．58）％，t表、中、深=-10．972、-6．249、6．564，P均〈0．05]。KBD成人关节软骨表层VCAM-1阳性表达率[（7．92±4．29）％]高于对照组[（3．12±1．12）％]，中层[（17．54±8．27）％]表达低于对照组[（31．75±13．30）％]，组间比较差异有统计学意义（t表、中=-3．824、3．037，P〈0．05）。动物实验中，与对照组[（1．89±1．76）％]比较。低硒
- 邵明明邵明明张迎张迎张丹张莹刘慧中何颖王梦莹卢洁孙健陈静宏
- 关键词：大骨节病血管细胞黏附分子-1
- 核心蛋白聚糖表达减少与大骨节病软骨坏死的相关性研究被引量：2
- 2016年
- 目的 观察大骨节病（KBD）儿童手指关节软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠膝关节软骨核心蛋白聚糖（Decorin）的表达,以及T-2毒素和硒对培养软骨细胞Decorin表达的影响,分析Decorin与KBD软骨坏死的相关性.方法 以5例尸检KBD儿童（KBD组）和5例因车祸死亡或畸形手术儿童（对照组）手指关节软骨为研究对象,采用免疫组织化学染色法检测儿童手指关节软骨Decorin的表达情况.选取雄性健康SD大鼠32只,按体质量采用随机数字表法分为常规组、低硒组,每组16只,常规组饲料硒含量为101.5 μg/kg,低硒组饲料硒含量为1.1 μg/kg,30 d后常规组又分为常规组和常规＋T-2组,低硒组分为低硒组和低硒＋T-2组,每组8只,T-2毒素（100 μg/kg,每日2次）采取灌胃饲养,30 d后处死大鼠,取左侧膝关节,用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞Decorin表达.体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞,加入不同浓度的T-2毒素（0、1、6、12 μg/L）和硒（0、0.1 rmg/L）作用72 h,采用实时荧光定量PCR法检测Decorin mRNA表达.结果 KBD组儿童手指关节软骨表、中、深层Decorin阳性软骨细胞密度[（1.75土0.95）％、（8.92±3.45）％、（0.00±0.00）％]均低于对照组[（21.27±3.44）％、（78.70±8.82）％、（93.12±6.99）％,t=11.76、12.87、31.09,P均＜0.05].低硒＋T-2组大鼠膝关节软骨Decorin表达阳性率[（19.33±2.82）％]明显低于常规组、低硒组及常规＋T-2组[（62.67±5.33）％、（53.17±2.41）％、（34.50±2.64）％,P均＜0.05].在硒为0 mg/L时,6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（0.38±0.01、0.26±0.03）明显低于0μg/L T-2毒素（对照）组（1.00±0.00,P均＜0.05）.在硒为0.1 mg/L时,0、6、12 μg/L T-2毒素作用下软骨细胞Decorin mRNA表达（1.53±0.06、1.92±0.04、2.50±0.01）高于相同剂量单纯T-2毒素组（1.00±0.00、1.00±0.00、1.00±0.00,P均＜0.05）.结论 KBD儿童和低硒�
- 王梦莹陈静宏刘慧中王伟王治伦杨占田杨浩杰薛森海
- 关键词：大骨节病核心蛋白聚糖T-2毒素
- T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响，为大骨节病软骨损伤研究提供依据。方法用分化培养基（常规培养液含1％ITS）分别诱导鼠软骨前体细胞系ATDC50、7、14、21d，实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）检测胶原蛋白Ⅱ（ColⅡ）、胶原蛋白X（Col X）的mRNA水平．确定其处于软骨不同分化层；T-2毒素（含量分别为1、5、10、20、50、100μg／L）和T-2毒素＋硒（0．1mg／L）分别作用于ITS诱导0、7、14、21d的ATDC5细胞24、48h，噻唑蓝（MTr）法检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响。结果ITS诱导ATDC5细胞14、21d，软骨细胞C01UmRNA（10．73±4．55、3．16±0．19）均高于0d（1．00±0．00，P均〈0．05）；ITS诱导ATDC5细胞21d，软骨细胞ColXmRNA（49．21±9．54）显著高于0d（1．00±0．00，P〈0．05）。低含量T-2毒素（1、5、10μg／L）作用不同分化层细胞24h出现代谢性补偿现象刺激细胞增殖，作用48h无代谢补偿现象；中高含量T-2毒素（20、50、100μg／L）作用不同分化层细胞24、48h，T-μ2毒素对21d细胞的抑制率[24h：（13．92±2．47）％、（47．78±4．22）％、（67．24±2．48）％，48h：（15．84±2．85）％、（55．31±0．50）％、（70．89±9．88）％]均低于0d[24h：（38．46±6．14）％、（53．20±6．20）％、（73．94±1．93）％，48h：（74．83±1．80）％、（88．98±1．51）％、（92．68±0．42）％]、7d[24h：（24．15±1．27）％、（45．19±1．29）％、（71．79±0．94）％，48h：（47．91±4．71）％、（77．84±0．52）％、（89．41±0．52）％]、14d[24h：（25．87±5．41）％、（62．50±2．50）％、（75．34±1．81）％，48h：（59．53±1．13）％、（80．32±4．54）％、（95．22±1．22）％，P均〈0．05]。T-2毒素＋硒作用不同分化层细胞48h，中高含量T-2毒素（20、50、100μg／L）＋硒时，T-2毒素对21d细胞的抑�
- 何颖陈静宏张丹王梦莹曹峻岭张莹马天有张迎刘慧中
- 关键词：T-2毒素硒大骨节病
- 低硒对T-2毒素致大鼠关节软骨细胞死亡形式的影响被引量：4
- 2017年
- 目的探讨低硒条件下T-2毒素中毒大鼠关节软骨细胞死亡形式。方法选择32只雄性健康SD大鼠，按体质量采用随机数字表法分为2组，每组16只，分别给予硒含量为101．5、1．1μg／蚝的常规和低硒饮食。30d后，将常规饲料组分为对照组和T-2组，低硒饲料组分为低硒组和低硒＋T-2毒素组，每组8只大鼠。T-2毒素组和低硒＋T-2毒素组每日给予T-2毒素（100μg／kg）灌胃饲养。30d后处死大鼠，取左侧膝关节，HE和番红0固绿染色，光镜下观察大鼠膝关节软骨病理学改变；原位缺口末端（TUNEL）法检测软骨细胞凋亡，计算凋亡指数；免疫组织化学法检测大鼠关节软骨细胞活化caspase-3和RIP3的表达。结果光镜下，低硒＋T-2毒索组关节软骨深层可见片状坏死，软骨细胞死亡变为“红色影子”细胞或红染的无结构区域。TUNEL染色，低硒＋T-2组与对照组、低硒组、T．2毒素组比较，表、中层关节软骨细胞凋亡指数差异有统计学意义[（7．474-0_34）％比（4．68±0．54）％、（2．67±O．64）％、（2．56±O．54）％；（72．06±6．15）％比（16．10±3．00）％、（19．57±3.49）％、（19．33±5．19）％，P均〈0．05]；表、中层活化caspase．3阳性率差异有统计学意义[（4．75±0．67）％比（1．24±0．25）％、（0．00±0．00）％、（0．00±O．00）％；（51．13±4．18）％比（10．97±3．01）％、（15．36±4．37）％、（15．23±3．13）％，P均〈0．05]；中层RIP3阳性率差异有统计学意义[（25．91±13．39）％比（1．59±1．14）％、（4．32±2．91）％、（7．50±5．00）％，P均〈0．05]。4组大鼠关节软骨深层细胞凋亡指数及活化caspase-3、RIP3表达水平比较，差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论低硒条件下T-2毒素中毒大鼠关节软骨中层软骨细胞的死亡形式为坏死性凋亡与凋亡共同存在。
- 张迎蒋卓澄方倩王文君张萌王梦莹何颖张丹张莹马天有陈静宏
- 关键词：大骨节病坏死T-2毒素硒
- 基质金属蛋白酶与大骨节病的相关性研究被引量：4
- 2014年
- 目的：观察基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases，MMPs）在大骨节病（Kashin-Beck disease， KBD）儿童软骨和低硒条件下T-2毒素中毒大鼠软骨中的表达，以及T-2毒素对软骨细胞MMP-13启动子的激活作用，探讨MMPs与KBD发病的关系。方法以5例尸检KBD儿童（KBD组）和5例因车祸死亡或畸形手术的正常儿童（对照组）手指节软骨为研究对象，采用免疫组织化学染色的方法，检测软骨中MMP-1和MMP-13的表达。雄性健康SD大鼠32只，按体质量采用随机数字表法分为常规饲料组、低硒饲料组，每组各16只。常规饲料硒含量为101.500μg/kg，低硒饲料硒含量为1.118μg/kg。大鼠低硒动物模型建造成功后，常规饲料组分为常规组和常规＋T-2组，低硒饲料组分为低硒组和低硒＋T-2组，每组8只。 T-2毒素（100μg·kg-1·d-1）灌胃饲养，30 d后处死大鼠，取左侧膝关节，用免疫组织化学染色方法检测大鼠关节软骨细胞MMP-1和MMP-13的表达水平。体外培养人软骨细胞系C28/I2细胞，分成空载体组、MMP-13启动子载体组、MMP-13启动子载体＋T-2毒素20μg/L组、MMP-13启动子载体＋T-2毒素40μg/L组，将-1602/＋20-MMP13-Luc启动子重组荧光素酶报导质粒以及空载体瞬时转染C28/I2细胞，24 h后，加入20μg/L和40μg/L T-2毒素，继续培养24 h，用荧光素酶报告基因检测T-2毒素对MMP-13启动子的作用。结果 KBD组儿童关节软骨表层和中层MMP-1表达阳性率[（29.73±10.12）%、（28.27±0.91）%]均高于对照组[（2.47±0.11）%、（0.00±0.00）%，P均〈0.05]，KBD组儿童关节软骨表层和中层 MMP-13表达阳性率[（13.21±4.32）%、（41.85±6.32）%]明显高于对照组[（5.72±0.31）%、（0.00±0.00）%，P均〈0.05]。低硒＋T-2毒素组大鼠关节软骨MMP-13在表层和中层表达水平[（13.21±4.32）%、61.85±8.68）%]明显高于常规组和低硒组[（2.43±0.22）%、（5.89±0.69）%，（3.03±0.29）
- 陈静宏曹峻岭王治伦马天有王梦莹何颖杨占田陈晨
- 关键词：大骨节病基质金属蛋白酶T-2毒素硒
