王建伟
- 作品数：118 被引量：343H指数：10
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教委科研基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理轻工技术与工程更多>>
- 不同组合细胞因子与人参总皂苷对体外培养CD34^+细胞分化的诱导效应(英文)被引量：1
- 2007年
- 背景:造血生长因子可分别作用于不同的造血细胞和细胞的不同分化阶段。红细胞生成素可促进晚期红系祖细胞的增殖分化,白细胞介素3为多潜能集落刺激因子,对多种造血细胞的分化成熟具有促进作用。目的:观察细胞因子的不同组合及人参总皂苷对CD34+细胞体外定向诱导分化为红系血细胞的影响。设计:观察对比实验。单位:重庆医科大学。材料:实验于2002-07/2004-01在重庆医科大学组织胚胎学教研室、基础医学研究所、重庆市生物化学与分子药理学重点实验室完成。正常人骨髓细胞来自第三军医大学大坪医院胸外科无血液系统疾病患者手术摘除的肋骨,所有患者知情同意。人参总皂苷和试剂由重庆中药研究所惠赠。胎牛血清、FITCCD34+抗体、FITC标记同型对照小鼠IgG1为BectonDickinson公司产品,CD71+抗体为SantaCruz公司产品,血小板生成素、Flt-3配基、干细胞因子、白细胞介素-3为SantaCruz公司产品,红细胞生成素为Amgen公司。方法:应用阴性分选策略,以StemsepTM系统从正常人骨髓细胞中分离CD34+造血干/祖细胞。经造血细胞因子不同组合(白细胞介素3+红细胞生成素、干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素、Flt-3配基+血小板生成素+干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素)进行液体培养,并以干细胞因子+白细胞介素3+红细胞生成素为对照组,在其中加入终浓度分别为10,20,50,70,100mg/L人参总皂苷为加药组,检测细胞总数、CD71+细胞比例;在CD34+细胞培养体系中加入不同剂量的人参总皂苷(剂量同前)为药物组,以不加人参总皂苷为对照组,通过甲基纤维素半固体培养法检测人参总皂苷诱导CD34+造血干/祖细胞向红系祖细胞(早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞)增殖与分化能力。主要观察指标:①不同的细胞因子组CD34+细胞体外增殖情况。②人参总皂苷对CD34+细胞定向诱导分化为红系�
- 王建伟张华姜蓉王亚平
- 关键词：人参总皂苷诱导分化
- 过氧化损伤及抗氧化能力时间动态变化与造血干/祖细胞衰老的相关性被引量：5
- 2013年
- 目的探讨增龄过程中小鼠Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+HSC/HPC)过氧化损伤及抗氧化能力的动态变化与其衰老的关系。方法 C57BL/6J雄性小鼠分为幼年组(3～4周龄),青年组(2月龄),中年组(6月龄),中老年组(12月龄),老年组(18月龄)。提取各组小鼠骨髓单个核细胞,免疫磁性吸附细胞分选法(MACS)分离纯化Sca-1+细胞群,WST法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量,TNB显色法检测细胞总谷胱甘肽(GSSG+GSH)含量,WST-1法检测超氧化物含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比,造血祖细胞混合集落培养比较各年龄组Sca-1+细胞形成集落能力。结果总SOD活力值、GSSG+GSH含量、超氧化物含量吸光度、MDA含量、SA-β-Gal阳性细胞百分比及混合集落形成率分别在幼年组为(27.51±1.11)U/g、(28.78±0.77)μmol/L、(0.114±0.005)、(2.06±0.54)nmol/mg、(2.26±0.65)%、(8.79±0.56);青年组为(38.23±3.50)U/g、(31.48±2.03)μmol/L、(0.109±0.005)、(0.81±0.35)nmol/mg、(9.08±2.74)%、(9.48±0.74);中年组为(28.85±0.65)U/g、(47.62±4.93)μmol/L、(0.133±0.002)、(2.69±0.62)nmol/mg、(11.58±0.89)%、(5.14±0.89);中老年组(12.67±0.89)U/g、(25.63±1.23)μmol/L、(0.151±0.009)、(11.44±1.19)nmol/mg、(35.34±2.50)%、(1.56±0.23);老年组为(17.52±1.27)U/g、(39.10±2.19)μmol/L、(0.141±0.005)、(7.06±0.95)nmol/mg、(15.76±1.23)%、(0.98±0.50)。结论随年龄增加Sca-1+HSC/HPC的SA-β-Gal阳性细胞百分比逐渐增高,混合集落形成能力下降,SOD活性、GSSG+GSH含量逐步降低,而超氧化物、MDA含量逐渐增加,提示在增龄过程Sca-1+HSC/HPC过氧化损伤,抗氧化能力逐渐降低是造血干细胞衰老的可能机制之一。
- 耿珊张琛徐春燕姜蓉王璐王建伟王亚平
- 关键词：祖细胞谷胱甘肽超氧化物
- 人参皂苷Rb1、Rg1、Re对白血病细胞株KG1α增殖的影响被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响。方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KGIα细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC50值,以此浓度为工作浓度,设常规培养组和处理组,台盼蓝计数法观察对KG1α细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果:MTT、台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1、Rg1可抑制KG1α细胞增殖,呈浓度依赖性,以Rb1抑制效应最佳,于作用48h抑制率最高。台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1-120μmol/L作用48h时抑制率达50.22%;流式细胞术结果提示,与对照组比较,Rbl-120μmol/L组G2/M期KG1α细胞比例增加(P<0.05)。结论:Rb1可抑制KG1α细胞体外增殖,其增殖抑制作用与将KG1α细胞阻滞于G2/M期有关。
- 王红宁左国伟陈地龙官涛李春莉姜蓉李静雷翠蓉顾恒伟王建伟
- 关键词：G2/M期阻滞增殖抑制
- 包装袋
- 1.本外观设计产品的名称：包装袋。;2.本外观设计产品的用途：本外观设计产品用于食品包装袋。;3.本外观设计产品的设计要点：在于本包装袋的图案。;4.最能表明设计要点的图片或照片：主视图。;5.本外观设计产品为薄型产品，...
- 王建伟郭红丽高思婷姚玲
- 人参皂苷Rg1抑制白血病细胞K562增殖并诱导分化的分子机制被引量：7
- 2014年
- 目的研究人参皂苷的重要单体Rg1对人白血病细胞K562的增殖抑制作用并诱导其向成熟分化的分子机制。方法取对数生长期K562细胞,分设人参皂苷Rg1组和常规培养组,以流式细胞仪检测24、48、72 h Rg1对K562细胞增殖的影响;Wright’s染色测定细胞形态和酶标仪测定血红蛋白合成来观察Rg1作用24、48、72 h后K562细胞向成熟细胞分化的特征;激光共聚焦显微镜检测Rg1作用48 h对K562细胞STAT5蛋白分布的影响;Western blot法检测Rg1作用24、48、72 h对K562细胞STAT5蛋白表达的影响。结果流式细胞仪检测提示Rg1作用后K562细胞S期比例增加,48 h达高峰(P<0.05);酶标仪测定显示Rg1作用后,K562细胞合成血红蛋白(Hb)的量与对照组相比具有显著性提高(P<0.05);Wright’s染色显示经Rg1诱导后,K562细胞体积缩小,细胞核直径减小,细胞核和细胞质的比例降低,细胞向成熟方向分化;激光共聚焦显微镜观察显示经Rg1诱导后,K562细胞细胞质内的STAT5荧光强度增加,而细胞核内STAT5荧光强度减弱;Western blot法检测显示Rg1作用K562细胞后,细胞质内STAT5的表达水平增加,细胞核内STAT5的表达水平减少,作用48 h变化最明显。结论人参皂苷单体Rg1可抑制人白血病细胞K562增殖并诱导其向成熟方向分化;Rg1改变K562细胞内STAT5的分布和减少K562胞核中STAT5的表达,这可能是Rg1抑制K562细胞增殖并诱导其分化的作用机制之一。
- 柯大智王红宁陈地龙顾恒伟王亚平王建伟龙轩李春莉罗春燕
- 关键词：增殖抑制诱导分化STAT5
- 6-姜辣素改善老年大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的研究被引量：2
- 2022年
- 研究6-姜辣素改善自然衰老糖脂代谢紊乱大鼠脂肪组织胰岛素抵抗的作用。将27只老年雄性SD大鼠随机分为3组(每组9只):老年模型组(aged)、6-姜辣素低剂量组(G-L,0.05 mg·kg^(-1))和6-姜辣素高剂量组(G-H,0.2 mg·kg^(-1)),另6只青年雄性SD大鼠作为青年对照组(NC),各组大鼠灌胃给药7周。ELISA法检测血浆游离脂肪酸(NEFA)和胰岛素的含量,计算脂肪组织胰岛素抵抗指数(Adipo-IR);采用HE染色法检测附睾周围脂肪组织(eWAT)脂肪细胞的大小;Western blot法检测附睾周围脂肪组织中脂联素(adiponectin,APN)信号通路、胰岛素信号通路和炎症因子相关蛋白如脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)、腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化AMPK(苏氨酸172位点)(AMPKα;)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、总蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(丝氨酸473位点)(p-Akt^(Ser473))、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-Jun氨基末端激酶1/2(JNK1/2)、磷酸化JNK1/2(苏氨酸183/络氨酸185位点)(p-JNK^(Thr183/Try185))、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的蛋白质表达;real-time PCR法检测它们基因的表达水平。结果显示,高剂量6-姜辣素给药7周可显著降低禁食血浆NEFA和胰岛素的含量,降低脂肪组织胰岛素抵抗指数;高剂量6-姜辣素组显著升高eWAT中APN、AdipoR1、PGC-1α、PI3K蛋白和mRNA的表达,以及p-AMPK;、p-Akt^(Ser473)的相对表达,显著降低eWAT中TNF-α、IL-1、IL-6蛋白和mRNA的表达,以及p-JNK1、p-JNK2的相对表达;结果说明6-姜辣素能够改善糖脂代谢紊乱大鼠的脂肪组织胰岛素敏感性,其机制可能与增强PI3K/Akt信号通路、抑制脂肪组织的炎症、增加脂肪组织APN的合成、增强AdipoR1的表达并激活其下游AMPK/PGC-1α信号通路有关。
- 詹权操刘宇哲席雨蒙曾颜田伽瑜刘丽李冬JOHJI Yamahara王建伟
- 关键词：胰岛素抵抗APN脂联素受体1
- 造血干细胞工程及应用领域
- 2004年
- 造血干细胞 (HSC)是最原始的造血细胞 ,它既能自我更新 ,又能产生所有造血细胞和某些非造血细胞。HSC起源于胚胎干细胞 ,它又是一种成体组织干细胞。近年来 ,造血干、祖细胞的体外扩增和诱导分化技术不断完善 ,并已广泛有效地应用于干细胞移植。
- 王建伟王亚平
- 关键词：造血细胞HSC祖细胞干细胞移植自我更新体外扩增
- 人参总皂甙体外诱导CD34^+造血干/祖细胞增殖的作用被引量：13
- 2006年
- 目的：探讨人参总皂甙(TSPG)协同造血生长因子体外诱导CD34^+造血干/祖细胞(HSC/HPC)增殖的作用。方法：收集人脐血细胞,采用Stemsep TM干细胞分选系统分离纯化CD34^+HSC/HPC,经不同剂量TSPG加入不同造血生长因子组合进行培养,检测细胞总数、CD34^+细胞及集落形成细胞总数(CFCs)的变化。结果：TSPG 10、20、50和70μg/ml均可不同程度地提高细胞总数、CFCs和CD34^+细胞扩增倍数,TSPG 50μg/ml是最佳刺激浓度,可使细胞总数、CFCs和CD34^+细胞分别增至(2470．50±79．96)倍、(53．96±4．29)倍和(21．86士3．09)倍。结论：合适剂量的TSPG能够促进CD34^+造血干/祖细胞体外增殖。
- 王建伟李荣王亚平王莎莉姜蓉牛春雨
- 关键词：人参总皂甙增殖
- 6-姜烯酚改善老年大鼠肝脏胰岛素抵抗作用的研究被引量：2
- 2021年
- 目的:研究6-姜烯酚对老年大鼠肝脏胰岛素抵抗(IR)的作用及其机制。方法:用网络药理学方法查找6-姜烯酚作用靶点和IR相关基因,构建6-姜烯酚——IR基因调控网络并使用分子对接技术进行验证。20月龄SD雄性大鼠随机分为模型对照组、6-姜烯酚0.5 mg/kg组;另取3月龄SD雄性大鼠作为正常对照组。RT-PCR和Western blot法检测肝脏中相关基因和蛋白的表达。结果:6-姜烯酚作用靶点与IR基因密切相关,且主要富集在PI3K/AKT信号通路上;且与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝脏磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)、总脂肪酸转位酶(t-CD36)和细胞膜脂肪酸转位酶(m-CD36)的表达显著上调,磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、葡萄糖转运蛋白(GLUT)2和细胞浆脂肪酸转位酶(p-CD36)的表达显著下调,6-姜烯酚0.5 mg/kg可提高模型对照组大鼠肝脏胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)mRNA的表达(P<0.05);6-姜烯酚0.5 mg/kg显著逆转了这些蛋白的表达。结论:6-姜烯酚可改善老年大鼠肝脏IR,其机制可能与抑制IRS1(ser307)的磷酸化、促进AKT(ser 473)的磷酸化、抑制细胞膜CD36的表达和调节其质-膜转位、以及上调GLUT 2的表达有关。
- 席雨蒙轩晨张军张军靳雅倩郭红丽姚玲姚玲罗先钦王建伟
- 关键词：衰老肝脏胰岛素抵抗葡萄糖转运蛋白
- 辐射损伤导致造血干/祖细胞衰老的机理研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨辐射损伤导致骨髓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老的可能机制。方法雄性C57BL/6J小鼠随机分为辐照组和假辐照组,辐照组小鼠经6.5 Gy的X射线全身一次性辐照,假辐照组小鼠处理同辐照组,但不辐照。辐照后24 h免疫磁珠分选法分离并计数两组小鼠的Sca-1+造血干/祖细胞细胞(Sca-1+HSC/HPC),流式细胞术检测细胞周期,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分率;混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养观察分选细胞增殖分化能力,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测辐照导致细胞的DNA损伤,RT-PCR检测细胞衰老相关基因p16INK4a、p19Arf、p53、p21Cip1/Waf1mRNA的表达;Westernblot法检测p16INK4a、p21Cip1/Waf1蛋白表达。结果免疫磁性分析法分离纯度的Sca-1+HSC/HPC可达94%,辐照后小鼠每支股骨的Sca-1+HSC/HPC数量急剧下降,细胞出现G1期阻滞;形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显降低;SA-β-Gal染色阳性率显著增高,彗星实验显示细胞拖尾明显延长;p16INK4a、p19Arf、p53、p21Cip1/Waf1mRNA表达明显增强,p16INK4a、p21Cip1/Waf1蛋白的表达水平上调。结论辐射导致HSC/HPC DNA的损伤和衰老相关生物学改变,p16INK4a-Rb和p19Arf-p53-p21Cip1/Waf1信号通路可能起一定作用。
- 张琛孙可耿珊刘典锋张先平刘俊徐春燕王建伟王亚平
- 关键词：造血干祖细胞电离辐照细胞衰老DNA损伤
