王吉村
- 作品数：54 被引量：421H指数：10
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 异种同源钙激活Cl^-通道DNA疫苗抑制哮喘小鼠气道黏液高分泌的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 钙激活Cl-通道 (CLCA)家族中小鼠mCLCA3与人hCLCA1是异种同源蛋白 ,两者表达于气道上皮杯状细胞。拟探讨hCLCA1DNA疫苗对哮喘小鼠气道黏液高分泌状况的影响。方法 构建重组真核表达质粒pSecTag2B/hCLCA1,将其作为疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠 (隔 2周 1次 ,共4次 )。当酶联免疫吸附法 (ELISA)证实血清中有能结合mCLCA3胞外肽段 (ED)的抗体产生时 ,卵蛋白致敏法制备接种小鼠的哮喘模型。引喘 5d后 ,PAS特染黏蛋白法观察气道杯状细胞数量及分泌功能 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测黏蛋白MUC5ACmRNA水平的变化。设接种pSecTag2B/mCLCA3、空载体pSecTag2B和生理盐水为对照组。结果 ELISA证实疫苗接种 3次后的小鼠血清抗体 ,能有效结合mCLCA3的 3个ED。其中抗体与N 端和C 端ED的结合滴度大于与中间ED的结合滴度。与同样被诱发哮喘的对照组相比 ,疫苗接种组小鼠气道的杯状细胞数量和黏液分泌量明显减少 ,MUC5ACmRNA转录水平下降。结论 hCLCA1DNA疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3胞外肽段的抗体 ,并因此有效减轻了哮喘气道黏液高分泌。
- 宋立强李妍戚好文刘新平王吉村
- 关键词：DNA疫苗哮喘小鼠气道黏液
- PH结构域的结构和功能研究进展被引量：2
- 1998年
- ＰＨ结构域是一种存在于多种信号转导蛋白和细胞骨架蛋白中的大约由１２０个氨基酸组成的功能性区域．不同蛋白质中的ＰＨ结构域在一级结构上的同源性并不很高，但其空间结构中肽链主链的折叠方式基本相同，而主要差别存在于其中的三个可变环上，含有这些环的侧面带有正电荷，被认为可能是其配体的结合部位．目前已知的配体有Ｇ蛋白βγ亚单位（Ｇβγ）、蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和磷脂酰肌醇衍生物（ＰＩＰ２或ＩＰ３），所以ＰＨ结构域可能介导信号蛋白与这些分子间的相互作用，参与细胞信号转导网络的构成．
- 王吉村药立波
- 关键词：PH结构域信号转导蛋白激酶CG蛋白
- 钙激活Cl-通道基因疫苗对哮喘小鼠气道高反应性的预防作用被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨hCLCA1DNA疫苗对哮喘小鼠气道高反应性(AHR)的影响。方法:构建重组真核表达载体pSecTag-2A/hCLCA1,将其作为DNA疫苗肌注法接种给BALB/c小鼠(每2周1次),并采用间接ELISA法检测血清抗体。卵蛋白致敏法复制接种小鼠的哮喘模型。引喘5d后,测定小鼠气道压力峰值-时间指数(APTI)和离体气管环收缩最大张力,并计数肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞的数量。设接种空载体pSecTag-2A对照组、生理盐水组和正常小鼠对照组。结果:间接ELISA法证实疫苗接种3次后,小鼠产生能结合mCLCA3胞外肽段的血清抗体,其滴度为1∶800-1∶1000。疫苗组、空质粒组和生理盐水组的APTI、气管环收缩张力和BALF中嗜酸性粒细胞含量均明显高于正常小鼠(P<0.01);但疫苗组的这些指标显著低于空载体组(P<0.01)。空载体组与生理盐水组结果相似。结论:人源hCLCA1基因疫苗能诱导小鼠产生结合自身mCLCA3的交叉抗体,并因此阻断了上皮对哮喘AHR的促进作用,从而在一定程度上抑制了哮喘AHR的发生。
- 宋立强李妍戚好文王吉村张乐宁
- 关键词：哮喘疫苗氯化物通道钙激活
- 哮喘气道上皮杯状细胞合成GM-CSF及其调控机制的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 观察哮喘小鼠气道上皮杯状细胞合成粒细胞 /巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)的能力 ,探讨钙激活Cl-通道(CLCA)在合成中的调控作用。方法 取成年雄性BALB/c小鼠 ,采用卵蛋白致敏法制备哮喘模型。AB PAS特染法检测哮喘小鼠小支气管杯状细胞的分布 ;同一解剖部位采用免疫组化染色法检测GM CSF的表达。体外培养人气道黏液上皮细胞系NCI H2 92 ,采用含人hCLCA1的重组质粒pIRES2 EGFP/hCLCA1转染该细胞。筛选到稳定表达hCLCA1的细胞后 ,免疫组化法及RT PCR法检测该细胞GM CSF的表达、转录水平。设非转染细胞和CLCA阻断剂NFA干预的转染细胞为两个对照组。结果 哮喘小鼠气道杯状细胞GM CSF免疫组化染色为阳性。转染hCLCA1细胞的GM CSF表达与转录水平明显高于两个对照组 ;NFA能抑制转染细胞GM CSF的表达和转录。结论 哮喘气道上皮杯状细胞能合成GM CSF ,特定CLCA表达升高是促进GM CSF合成的机制之一。
- 宋立强戚好文李妍王吉村张健
- 关键词：哮喘气道杯状细胞
- 从蛋白质相互作用研究方法的发展看人们认识事物的过程被引量：2
- 2000年
- 王吉村药立波
- 关键词：蛋白质相互作用研究方法
- 一种胶质瘤相关的酸性成纤维细胞生长因子mRNA同源物被引量：2
- 2001年
- 目的 克隆胶质瘤相关基因 .方法 取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果 获得一胶质瘤相关的酸性成纤维生长因子基因同源物 .结论 该酸性成纤维生长因子基因同源物是酸性成纤维生长因子 m RNA的不同拼接产物 ,可能参与胶质瘤的形成 .
- 邓艳春药立波王吉村刘新平聂晓燕季少平李福洋
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤相关基因酸性成纤维细胞生长因子MRNA
- 一氧化氮在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用被引量：8
- 1996年
- 目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中的作用．方法：采用双重结扎、切断大鼠胆总管造成梗阻性黄疸模型．分别给不同组大鼠腹腔注Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）或Ｌ－精氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ），７ｄ后观察肝组织匀浆ＮＯ－２，丙二醛（ＭＤＡ），肝功能及肝组织形态改变．结果：胆道梗阻一周后，肝组织ＮＯ－２和ＭＤＡ含量均升高；注射Ｌ－Ａｒｇ［３００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］组大鼠肝组织ＮＯ－２含量较单纯胆道梗阻组增加显著（Ｐ＜０．０１），而肝组织ＭＤＡ和血清ＡＬＴ，ＡＳＴ活性显著降低（Ｐ＜０．０５），肝组织损伤减轻；注射Ｌ－ＮＡＭＥ［７０ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］组大鼠肝组织ＮＯ－２含量下降（Ｐ＜０．０１），而肝组织ＭＤＡ含量和血清ＡＬＴ，ＡＳＴ活性却显著增加（Ｐ＜０．０１），肝组织损伤加重．结论：ＮＯ在大鼠梗阻性黄疸肝损伤中似有保护作用．
- 刘鹏李开宗付由池王吉村周群
- 关键词：一氧化氮梗阻性黄疸肝损伤
- 抗氧化剂药膜对烧伤后继发性损伤的影响
- 1997年
- 烧伤后继发性氧化损伤可能与自由基介导的脂质过氧化有关,超量自由基引起的氧化应激反应具有细胞毒作用,使创面进一步加深,会影响创面的愈合。这一过程一般发生在烧伤的早期。我们以往的研究表明,超氧化物歧化酶(SOD)及其化学修饰物(月桂酰超氧化物歧化酶,AC—SOD)、SOD 模拟物(原儿茶醛缩氨基硫脲酮络合物,PTC)
- 孙淑芬莫简王多宁骆文博施炯苏映军王吉村郭正仁刘健贺诗华林英华
- 关键词：烧伤继发性损伤
- 用改良消减杂交筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中高表达基因被引量：6
- 2001年
- 为了研究类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞 (fibroblast- like synovialcells,FLS)过度增殖和破坏软骨的分子机理 ,利用改良消减杂交法以骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)病人滑膜细胞为对照 ,筛选 RA滑膜细胞中的高表达基因 .将得到的基因片段克隆入质粒载体 ,通过反向点杂交排除假阳性克隆后 ,将阳性克隆进行核酸序列分析 ,最后用 Northern杂交方法检测一些高表达基因在 RA和 OA病人滑膜细胞中的表达水平 .结果显示 ,共分离到 1 50个 RA高表达基因片段 ,其中长于 1 0 0 0 bp的片段占 8% (1 2 /1 50 ) ,长于 40 0 bp的片段占 36.7% (55/1 50 ) ,在大于 40 0 bp的片段中 ,假阳性率为 2 3.7% (1 3/55) .在测序的 1 8个片段中 ,已知基因有 1 2个 ,其中包括 IGF- 1结合蛋白 (IGFBP)特异性丝氨酸蛋白酶、层粘连蛋白受体和组织蛋白酶 B等 .新序列有 6个 ,其中两个序列分别与 Ring- box蛋白 1和 SON DNA结合蛋白同源 .对 IGFBP特异性丝氨酸蛋白酶、层粘连蛋白受体和组织蛋白酶 B基因的 Northern杂交分析显示 ,在 RA病人滑膜细胞中 ,这些基因的表达水平高于 OA病人滑膜细胞 .这些结果提示 ,这种改良消减杂交法是一种简便有效的分离差异表达基因的方法 ;IGF- 1结合蛋白特异性丝氨酸蛋白酶。
- 王吉村药立波吕厚山刘新平邓艳春聂晓燕孙铁铮燕太强
- 关键词：类风湿性关节炎滑膜细胞高表达基因
- 人脑胶质瘤Tenascin基因表达与侵袭相关性被引量：1
- 2000年
- 目的 探讨 Tenascin和 Ki- 6 7在不同级别人脑胶质瘤细胞表达情况 ,分析它与胶质瘤细胞的侵袭相关性 .方法 采用原位杂交和免疫组织化学方法 ,检测不同级别人脑胶质瘤组织5 0例中 Tenascin和 Ki- 6 7表达 ,以细胞核增殖抗原 Ki- 6 7阳性细胞数分析胶质瘤细胞的增殖情况 .结果 胶质瘤与其增生血管内皮细胞均表达 Tenascin,Tenascin基因表达与肿瘤细胞增殖指数呈显著正相关 ,随胶质瘤恶性程度提高 ,Tenascin和 Ki-6 7表达均增强 .结论 Tenascin在人脑胶质瘤组织有异常表达 ,它可能是刺激肿瘤细胞恶性增殖和血管新生的重要因素 ,在人脑胶质瘤侵袭性生长中起重要作用 。
- 吕学明费舟章翔吴景文邓燕春王吉村
- 关键词：脑胶质瘤TENASCIN基因表达KI-67肿瘤侵袭
