聂晓燕
- 作品数：21 被引量：179H指数：5
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种胶质瘤相关的酸性成纤维细胞生长因子mRNA同源物被引量：2
- 2001年
- 目的 克隆胶质瘤相关基因 .方法 取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果 获得一胶质瘤相关的酸性成纤维生长因子基因同源物 .结论 该酸性成纤维生长因子基因同源物是酸性成纤维生长因子 m RNA的不同拼接产物 ,可能参与胶质瘤的形成 .
- 邓艳春药立波王吉村刘新平聂晓燕季少平李福洋
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤相关基因酸性成纤维细胞生长因子MRNA
- 小鼠颌下腺神经生长因子的制备和活性鉴定被引量：1
- 1998年
- 目的：制备具有生物活性的NGF．方法：以小鼠颌下腺为原料，采用FPLC方法分离神经生长因子，SDS-PAGE电泳检测NGF的分子质量和纯度，采用脊髓和背根神经节培养方法检测NGF的生物活性．结果：经FPLC柱纯化的NGF在SDS—PAGE电泳显示为一条分子质量14ku的区带，NGF得率可达600μg／g，比活性达2×105／mg，具有明显的促进细胞增殖的活性．结论：本方法可用于NGF的制备．
- 王国华陈南春惠宏襄聂晓燕白玉杰刘新平药立波杨浩
- 关键词：颌下腺神经生长因子
- 用改良消减杂交筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中高表达基因被引量：6
- 2001年
- 为了研究类风湿性关节炎 (rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞 (fibroblast- like synovialcells,FLS)过度增殖和破坏软骨的分子机理 ,利用改良消减杂交法以骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)病人滑膜细胞为对照 ,筛选 RA滑膜细胞中的高表达基因 .将得到的基因片段克隆入质粒载体 ,通过反向点杂交排除假阳性克隆后 ,将阳性克隆进行核酸序列分析 ,最后用 Northern杂交方法检测一些高表达基因在 RA和 OA病人滑膜细胞中的表达水平 .结果显示 ,共分离到 1 50个 RA高表达基因片段 ,其中长于 1 0 0 0 bp的片段占 8% (1 2 /1 50 ) ,长于 40 0 bp的片段占 36.7% (55/1 50 ) ,在大于 40 0 bp的片段中 ,假阳性率为 2 3.7% (1 3/55) .在测序的 1 8个片段中 ,已知基因有 1 2个 ,其中包括 IGF- 1结合蛋白 (IGFBP)特异性丝氨酸蛋白酶、层粘连蛋白受体和组织蛋白酶 B等 .新序列有 6个 ,其中两个序列分别与 Ring- box蛋白 1和 SON DNA结合蛋白同源 .对 IGFBP特异性丝氨酸蛋白酶、层粘连蛋白受体和组织蛋白酶 B基因的 Northern杂交分析显示 ,在 RA病人滑膜细胞中 ,这些基因的表达水平高于 OA病人滑膜细胞 .这些结果提示 ,这种改良消减杂交法是一种简便有效的分离差异表达基因的方法 ;IGF- 1结合蛋白特异性丝氨酸蛋白酶。
- 王吉村药立波吕厚山刘新平邓艳春聂晓燕孙铁铮燕太强
- 关键词：类风湿性关节炎滑膜细胞高表达基因
- 一步反转录PCR法从组织及细胞中扩增HEK5被引量：3
- 1998年
- 聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术诞生后不久即用于ＲＮＡ的扩增［１］。这种方法需要首先将ＲＮＡ逆转录（ＲＴ）为ｃＤＮＡ链后再进行常规ＰＣＲ扩增，程序较繁琐，且需逆转录酶及ＲＮＡ酶抑制剂等成本较高试剂。有研究表明Ｔａｑ聚合酶及ＴｔｈＤＮＡ聚合酶有逆转录功能，且...
- 张晓光阎小君苏成芝聂晓燕聂晓燕
- 关键词：肿瘤聚合酶链反应
- NDR2 mRNA在肿瘤组织中的差异表达被引量：4
- 2002年
- 检测NDR2基因在人类正常组织及相应肿瘤组织中的表达分布 ,为进一步研究该基因功能提供线索。提取人脑与胶质瘤、肺与肺癌、胃与胃癌、结肠与结肠癌组织总RNA ,用RT PCR方法半定量分析NDR2基因在上述组织中的表达水平。在人脑和胶质瘤组织、肺与肺癌组织、胃与胃癌组织、结肠与结肠癌组织中均有NDR2mRNA表达 ,其表达水平以脑组织为最高。NDR2mRNA在正常脑和肺组织的表达水平分别显著高于胶质瘤与肺癌组织 ,而结肠与结肠癌组织 ,胃与胃癌组织NDR2mRNA表达水平则无显著差别。以上结果表明 ,NDR2基因可能广泛表达于人体正常组织内 ,而在胶质瘤与肺癌中的表达较相应正常组织减低 ,提示该基因可能与神经系统与呼吸系统肿瘤的发生发展有关。
- 李剑药立波林树新刘新平邓艳春聂晓燕
- 关键词：MRNA表达RT-PCR法脑质瘤结肠癌肿瘤组织
- 噬菌体展示法筛选抗人PTA1单克隆抗体结合肽被引量：2
- 2001年
- 目的从噬菌体展示文库中筛选能与抗人PTA1单克隆抗体(mAbs)特异性结合的短肽。方法采用protein-A亲和层析法纯化系列抗人PTA1mAbs，通过流式细胞术检测筛选出能够阻断PTA1-Fc融合蛋白与其天然配体结合的mAb，经过三轮亲和筛选，从噬菌体随机12肽库中筛选可特异性结合mAb的重组噬菌体阳性克隆，进而对这些克隆的短肽序列进行测定和分析。结果确定了能够阻断PTA1-Fc融合蛋白与其天然配体结合的mAb为LeoA1，得到了13个具有特异性结合LeoA1的重组噬菌体阳性克隆，序列测定结果发现，这些可结合LeoA1的短肽，有较保守而集中的模式序列，即WPXHHX序列。结论这些具有保守模式序列的短肽，有可能模拟PTA1分子的功能表位，成为其天然配体拮抗剂的候选肽段。此外，PTA1分子与其配体结合的功能表位的确定，也为今后寻找天然配体和进一步深入研究PTA1分子的结构和功能提供了实验依据。
- 杨琨金伯泉贾卫张新海欧阳为明朱勇刘雪松张晓光聂晓燕
- 关键词：PTA1单克隆抗体抗原表位噬菌体展示
- NDR2基因在人类正常组织及肿瘤中的表达
- NDR家族基因是新近发现的一族基因.因为最初发现NDR基因时,观察到在N-myc基因变异的小鼠胚胎内,其表达发生明显上调,故命名为N-myc downstream regulated gene,意即位于N-myc下游并受...
- 李剑药立波林树新刘新平邓艳春聂晓燕
- 文献传递
- 人脑内一含有ACP样结构域新基因的发现被引量：122
- 2001年
- 为寻找脑内新基因 ,以正常成人全脑cDNA为模板 ,采用锚定PCR方法进行扩增 ,将经琼脂糖DNA电泳鉴定获得的一约 12 0 0bp大小的特异性条带回收 ,并克隆入Teasy载体 .用 310GeneticAnalyzer进行自动测序 .所得序列进行生物信息学分析 :BLAST相似性分析结果证明所得序列为新序列 ,读框分析表明 ,该序列中存在一完整编码区 ,编码含 35 7个氨基酸的蛋白质 .ProDom软件分析发现其含有酰基携带蛋白 (ACP)样结构域 .随后 ,经 3′RACE法克隆到该基因的全长cDNA ,其全长为 2 0 2 4bp ,染色体定位在 14q11 2 ,含有 16个外显子 ,15个内含子 ,该基因已登录到GenBank .经设计编码区引物 ,从Teasy载体扩增出编码区后再克隆入pGEX 4T1表达载体 ,经异丙基硫代 D 乳糖苷 (IPTG)化学诱导表达 .其编码区克隆入 pGEX 4T1表达载体后 ,转入JM10 9宿主菌 ,经IPTG诱导已得到表达 .点杂交及RNA印迹表明 ,该基因在正常成人脑内广泛高表达 .
- 邓艳春药立波刘新平聂晓燕王吉村张晓光苏成芝
- 关键词：基因生物信息学
- 用改良消减法克隆类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因
- 2001年
- 王吉村药立波吕厚山刘新平邓艳春赵忠良聂晓燕孙铁铮燕太强
- 关键词：滑膜细胞基因表达
- 结合酪氨酸蛋白激酶受体EphB2的功能短肽的筛选
- 2000年
- 目的筛选能结合酪氨酸蛋白激酶受体 Eph B2的功能短肽。方法 PCR扩增 Eph B2的配体结合区 ,定向克隆到融合表达质粒载体 p RSET A中 ,阳性克隆经 IPTG诱导表达融合蛋白 ,并利用 Ni- NTA金属螯合亲和层析在变性条件下对表达的蛋白进行纯化 ,以此纯化蛋白为靶 ,将其包被于 EL ISA板上 ,进行 3轮亲和筛选。结果电泳分析表明 :表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在 ,纯化蛋白质的纯度大于 95 %。从噬菌体随机 12肽库中筛选到 13个噬菌体阳性克隆。结论获得了具有结合 Eph
- 张晓光韩炯韩景田刘新平药立波聂晓燕苏成芝
- 关键词：EPHB2配体噬菌体表面呈现
