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(His)_6-eIF3s4融合蛋白在人乳腺癌细胞Bcap37中的表达被引量：3: 2007年; 目的:构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位(eIF3s4)真核表达载体用于进一步功能研究。方法:设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对后,将该cDNA序列亚克隆于真核表达载体pcDNA4/HisMaxB载体,构建成(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达载体,用LipofectamineTM2000瞬时转染人乳腺癌细胞株Bcap37,利用Westernblot方法检测(His)6-eIF3s4融合蛋白的表达。结果:DNA序列测定表明,利用RT-PCR方法克隆的eIF3s4全长编码区cDNA序列与GenBank数据库序列一致,Westernblot结果证实(His)6-eIF3s4融合蛋白在Bcap37细胞中获得预期表达。结论:成功地构建了eIF3s4的真核表达载体并在人乳腺癌细胞Bcap37中表达,为建立稳定的eIF3s4高表达细胞系,进而研究eIF3s4与肿瘤细胞多药耐药相关性打下了基础。; 魏群朱逢佳王以陈萍王林波曹江; 关键词：克隆融合蛋白

P-糖蛋白表达质粒的构建及转基因细胞系的建立: 2001年; 目的　构建 P-糖蛋白表达质粒 ,建立转基因 P-糖蛋白细胞系。方法　将 p MDRA1c DNA片段亚克隆至表达载体 pc DNA3.1(+) ,用 Superfecttransfection reagent将重组质粒 pc DNA3.1(+) /MDR1转染到中国人乳腺癌细胞 Bcap37,经 G418筛选获得抗性克隆 ,并扩大成系。通过药敏试验验证转基因细胞的功能。结果　酶切结果显示表达质粒构建正确。药敏试验未转染与转染的 Bcap37细胞对阿霉素的 IC50 分别为 (0 .11± 0 .0 7) μg/ml和(5 1.2 4± 13.0 1) μg/m l(P<0 .0 5 )。结论　建立了转基因 P-糖蛋白细胞系 ,为药物转运和肿瘤多药耐药性研究提供了较为理想的体外实验模型。; 王以曹江曾苏; 关键词：P-糖蛋白多药耐药基因质粒转基因恶性肿瘤

活性指导下的鸡肝散提取物及其制剂的质量研究: 目的：研究鸡肝散提取物及其制剂的体内外吸收、代谢作用特点，为新药质量控制提供科学依据。方法：将鸡肝散提取物分别与Caco-2细胞、鼠肝微粒体共孵育，测定鸡肝散提取物中主要成分木犀草素苷和苷元的体外吸收转运和葡...; 应景艳麻佳蕾徐亚萍曾苏王以陈亚坤姚彤炜; 关键词：鸡肝散 CACO-2细胞药代动力学; 文献传递

多药耐药细胞K562/ADR中Annexin-I和EF-Tu的表达变化(英文): Objective:To identify more factors associated with tumor cell multidrug resistance (MDR) for a more thorough u...; 朱逢佳王以魏群曾苏Xiaoyun Fu王林波曹江; 文献传递

活性指导下的鸡肝散提取物及其制剂的质量研究: 目的研究鸡肝散提取物及其制剂的体内外吸收、代谢作用特点,为新药质量控制提供科学依据。方法将鸡肝散提取物分别与Caco-2细胞、鼠肝微粒体共孵育,测定鸡肝散提取物中主要成分木犀草素苷和苷元的体外吸收转运和葡醛酸结合代谢活性...; 应景艳麻佳蕾徐亚萍曾苏王以陈亚坤姚彤炜; 关键词：鸡肝散 CACO-2细胞药代动力学; 文献传递

药物转运细胞模型的建立、应用和相关机制的初步研究: 本论文建立了Caco-2体外肠道吸收模型和稳定的高表达P-糖蛋白细胞系。建立了耐阿霉素的K562/ADR细胞，并用双向电泳和质谱寻找与K562/ADR细胞转运机制相关的蛋白。研究了普萘洛尔对映体在Caco-2细胞单层的转...; 王以; 关键词：槲皮素山奈酚普萘洛尔蛋白质组学药物吸收药物转运

中药与天然药物代谢活性筛选技术平台研究: 姚彤炜曾苏陈枢青蒋惠娣陈亚坤王以钱鸣蓉徐亚萍阮昊麻佳蕾; 一、建立模拟人肠道的Caco-2细胞和P-gp转基因细胞，模拟人肝药物代谢酶的CYP和UGT转基因细胞，作为体外药物吸收代谢研究试验模型。培养21天的Caco-2细胞单层跨膜电阻达500Wcm2；标志性药物Lucifer...; 关键词：; 关键词：天然药物中药

高效液相色谱法测定细胞内三种银杏黄酮苷元: 本文建立了能同时测定细胞内三种银杏黄酮的反相高效液相色谱法,该方法灵敏准确,有助于研究此类黄酮的跨膜转运情况,它们与一些转运蛋白的相互作用以及探究药物进入肿瘤细胞后的分子事件.; 王以曹江翁建华曾苏; 关键词：山萘酚异鼠李素银杏黄酮药物浓度; 文献传递

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王以