牛凯 作品数:10 被引量:341 H指数:6 供职机构: 安徽理工大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
桃仁药理作用研究近况 被引量:285 2015年 桃仁为祖国医学活血化瘀要药,有着较多明确的药理活性,临床功效显著。文章将桃仁化学成分及药理作用的研究近况作一综述,为进一步开发桃仁的药用价值提供参考和指导。 赵永见 牛凯 唐德志 梁倩倩 舒冰 李晨光 卢盛 王拥军 郑为超关键词:桃仁 心血管 低密度脂蛋白 丙二醛 羟基红花黄色素A 去卵巢致肾虚的腰椎间盘退变模型的实验研究 被引量:13 2013年 目的:观察去前肢卵巢对大鼠腰椎间盘和椎体骨密度的影响,建立大鼠肾虚型腰椎间盘退变模型,探讨椎间盘退变的内在机制、椎间盘退变和骨质疏松之间的关系。方法:选择1月龄雌性SD大鼠30只,随机分为正常对照组、腰椎间盘退变组、肾虚型腰椎间盘退变组(复合模型组),每组10只。腰椎间盘退变组大鼠去除双前肢,肾虚型腰椎间盘退变组大鼠在去除双前肢3个月后,再去除双卵巢。8个月后,通过Micro-CT扫描观察椎体骨密度,藏红O-快绿染色法观测椎间盘组织形态学改变,免疫组织化学法观察Ⅱ、Ⅹ胶原在椎间盘中的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测细胞外基质相关基因的表达,以评价去除双前肢和双卵巢对椎间盘退变和椎体骨密度的影响。结果:Micro-CT扫描发现,肾虚型腰椎间盘退变组动物椎体骨质疏松明显;藏红O-快绿染色法显示椎间隙变窄,肾虚型腰椎间盘退变组椎间盘组织退变明显,软骨板发育不全;免疫组织化学染色显示肾虚型腰椎间盘退变组相对于正常对照组,椎间盘内Ⅹ型胶原表达增加,Ⅱ型胶原表达降低;RT-PCR分析发现,腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)基因的表达较正常对照组低,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000﹚;腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白聚糖(aggrecan-1,Agc1)基因的表达较正常对照组低,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000﹚;腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组Ⅹ型胶原(type X collagen,Col10al)基因的表达较正常对照组高,差异无统计学意义;肾虚型腰椎间盘退变组基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达较正常对照组和腰椎间盘退变组高,3组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);腰椎间盘退变组和肾虚型腰椎间盘退变组聚集蛋白� 姚长风 赵永见 牛凯 孙悦礼 李晨光 唐德志 舒冰 卢盛 周重建 梁倩倩 施杞 王拥军关键词:腰椎 椎间盘 卵巢 SPRAGUE-DAWLEY 桃仁-红花药对干预IL-1β诱导的大鼠IVDD细胞的影响及机制研究 目的椎间盘退变是椎间盘退变性疾病最根本的病理基础,多见于中老年患者,随着人们生活和工作方式的不良改变,该类疾病逐渐趋于年轻化,严重影响患者的生活质量。 前期研究证实红花单体羟基红花黄色素A(Hydroxy safflo... 牛凯关键词:羟基红花黄色素A 苦杏仁苷 文献传递 鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法 本发明公开了一种鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法,用PBS配制浓度为2wt%的琼脂糖凝胶,与含10wt%FBS的DMEM培养液按体积比1:1混合形成三维培养胶;将从活体C57品系小鼠上剪切下来的鼠尾立即消毒并剥皮后投入P... 李晨光 王拥军 赵永见 施杞 杨燕萍 牛凯文献传递 苦杏仁苷对IL-1β诱导后大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响 被引量:6 2013年 目的观察不同浓度的苦杏仁苷对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,并进一步探讨其作用的可能机制。方法从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养,经鉴定后,随机分组为正常组、诱导组、苦杏仁苷10-2、10-3、10-4、10-5mol·L-1给药组,CCK-8法检测各组对大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖的影响。Real-time PCR(RTPCR)检测聚集蛋白聚糖(aggrecan-1)、Ⅱ型胶原(type II collagen,Col2a1)、Ⅹ型胶原(type X collagen,Col10al)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)基因的表达情况。细胞免疫荧光检测分析Col2a1、Col10al的表达,流式细胞仪检测其对软骨终板细胞凋亡的影响。结果苦杏仁苷10-2mol·L-1给药组能够抑制椎间盘软骨终板细胞的增殖,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式分析,其细胞凋亡比例较诱导组及正常组均较高。RT-PCR检测结果显示一定浓度的苦杏仁苷能够上调Aggrecan、Col2a1mRNA的表达,下调Col10al、MMP-13 mRNA的表达,与诱导组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。一定浓度的苦杏仁苷能够上调Col2a1蛋白的表达,下调Col10al蛋白的表达。结论一定浓度的苦杏仁苷能够抑制IL-1β诱导大鼠椎间盘软骨终板细胞发生退变,起到延缓椎间盘退变的作用。 牛凯 赵永见 姚长风 梁倩倩 李晨光 张宇 郑为超 王拥军关键词:苦杏仁苷 椎间盘 退变 软骨终板 IL-1Β 苦杏仁苷对IL-1β诱导后大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响 被引量:7 2014年 目的观察不同浓度的苦杏仁苷对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响,并进一步探讨其作用的可能机制。方法从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养,经鉴定后,随机分为正常组、诱导组、苦杏仁苷10-2、10-3、10-4、10-5mol·L-1给药组,采用流式细胞仪检测大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡,Real-time PCR(RT-PCR)检测凋亡相关基因的表达情况,Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果不同浓度的苦杏仁苷能够拮抗IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡。流式分析显示各浓度的苦杏仁苷可以降低IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例;RT-PCR结果提示苦杏仁苷各浓度组可拮抗IL-1β上调Bax mRNA的表达,下调Bcl-2 mRNA的表达,各组与诱导组相比较,其差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot检测结果显示苦杏仁苷10-4mol·L-1给药组能够拮抗IL-1β上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。结论苦杏仁苷能够拮抗IL-1β诱导大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡,起到延缓椎间盘退变的作用。 郑为超 牛凯 赵永见 张雷 王拥军关键词:椎间盘退变 IL-1Β 凋亡 线粒体 羟基红花黄素A调控退变软骨终板细胞周期的作用研究 被引量:3 2018年 目的研究羟基红花黄素A(hydroxy safflower yellow A,HSYA)对退变软骨终板细胞周期的影响及相关机制。方法用10μg·L^(-1)的IL-1β诱导软骨终板细胞建立炎症退变模型,分别制备不同浓度的HSYA培养基作为干预措施,采用CCK-8法检测不同浓度HSYA对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测HSYA对细胞周期的影响;real-time PCR检测细胞周期及凋亡相关基因p53、Bax、Bcl-xl表达;Western blot检测细胞周期相关蛋白PCNA、p53、p21表达。结果 HSYA具有促进退变软骨终板细胞增殖的作用;HSYA降低退变组细胞周期S期比例;HSYA下调退变细胞p53、Bax mRNA表达,上调Bcl-xl mRNA表达;HSYA下调退变细胞周期蛋白p53、p21表达,上调PCNA表达。结论 HSYA具有改变退变软骨终板细胞周期及抑制其凋亡的作用。 张宇 郑为超 李冬 牛凯关键词:软骨终板 细胞周期 凋亡 椎间盘 退变 苦杏仁苷联合羟基红花黄色素A对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响 被引量:10 2014年 本文探讨了中药单体苦杏仁苷(amygdalin)联合羟基红花黄色素A(HSYA)对IL-1β诱导退变的大鼠椎间盘软骨终板细胞的影响,寻找可能的作用机制。从1月龄SD大鼠椎间盘中分离软骨终板并培养软骨终板细胞,经鉴定后选择第3代软骨终板细胞用于实验,随机分为正常组、诱导组、苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组和联合用药组。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,Real-time PCR(RT-PCR)检测Aggrecan、Col 2α1、Col 10α1、MMP-13、IL-1βmRNA的表达,细胞免疫荧光检测II型胶原、X型胶原的表达。结果表明,与正常组比较,IL-1β诱导组软骨终板细胞增殖降低,细胞凋亡增加(P<0.05),下调Aggrecan、Col 2α1 mRNA的表达,上调Col 10α1、MMP-13、IL-1βmRNA的表达(P<0.05);同时II型胶原蛋白的表达降低、X型胶原蛋白的表达升高。与IL-1β诱导组比较,苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组和联合用药组均能在抑制软骨终板细胞凋亡的同时促进软骨终板细胞的增殖(P<0.05),上调Aggrecan、Col 2α1 mRNA的表达的同时下调Col 10α1、MMP-13、IL-1βmRNA的表达(P<0.05);促进II型胶原蛋白的表达增强、X型胶原蛋白的表达降低。联合用药组作用的效果明显优于苦杏仁苷组、羟基红花黄色素A组(P<0.05)。苦杏仁苷联合羟基红花黄色素A可抑制IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞发生退变,优于苦杏仁苷、羟基红花黄色素A单独用药。 牛凯 赵永见 张雷 李晨光 王拥军 郑为超关键词:苦杏仁苷 羟基红花黄色素A 椎间盘 退变 软骨终板 T-bet佐剂对Ag85B抗结核DNA疫苗的免疫调节 被引量:7 2012年 目的:构建以Th1转录因子T-bet为基因佐剂的Ag85B新型DNA疫苗,并研究其免疫调控作用。方法:RT-PCR法扩增出Ag85B基因和T-bet基因,克隆入pcDNA3.1质粒构建T-bet和Ag85B真核表达质粒,脂质体法转染重组质粒至RAW264.7细胞系,Western blot法检测质粒蛋白表达情况。3次肌肉注射免疫BALB/c小鼠,末次免疫2周后,ELISA法检测血清中抗Ag85B抗体滴度。同时将脾脏淋巴细胞悬液于Ag85B刺激下培养,ELISA法检测培养液中细胞因子分泌情况。结果:质粒蛋白成功表达,并且质粒剂量与质粒蛋白表达水平呈正相关。此外,T-bet/Ag85B不仅诱导IgG2a滴度显著增高伴随IgG1显著降低,而且还刺激IL-2/IFN-γ(Th1类)分泌增加伴随IL-4/IL-10(Th2类)减少。结论:T-bet增强抗Ag85B特异性IgG2a抗体反应,并诱导显著的Th1细胞优势免疫。 陈丽萍 张荣波 胡东 吴静 张金凤 吴汉霞 李昕 牛凯关键词:AG85B 疫苗 结核 免疫调节 羟基红花黄色素A与心血管作用研究进展 被引量:11 2012年 羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)是从传统的活血化瘀类名药红花(Carthamus tinctorius L)中分离出来的,也是红花发挥药理作用的主要物质。HSYA对心血管的作用主要有降压、保护心肌、抗凝、调节血管内皮细胞增殖的作用,文章对此最新进展进行综述。 牛凯 张宇 郑为超关键词:羟基红花黄色素A 血管内皮细胞 一氧化氮 抗凝