焦豫良 作品数:102 被引量:209 H指数:7 供职机构: 淮海工学院 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 文化科学 更多>>
海洋细菌LP621右旋糖苷酶分批发酵动力学研究 被引量:2 2012年 对海洋细菌Pseudoalteromonas tetraodonis LP621右旋糖苷酶进行了50L发酵罐分批发酵的代谢特性的研究。结果表明LP621右旋糖苷酶合成和菌体生长呈部分生长偶联型。据分批发酵试验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程建立了描述菌株生长、产酶以及葡萄糖底物消耗分批发酵动力学模型。动力学模型计算值结果与实验值拟合良好,较好反映了菌株右旋糖苷酶分批发酵过程的动力学特征。 葛亮 房耀维 吴文惠 王淑军 吕明生 焦豫良 刘姝关键词:海洋细菌 发酵动力学模型 LOGISTIC方程 优良山楂酒酿造酵母菌株的筛选与鉴定 被引量:7 2011年 为筛选适合酿造山楂果酒的优良酿造酵母,对来自连云港花果山野生山楂样品中的酵母菌进行富集培养、稀释涂布和划线纯化,获得酵母菌株16株。通过杜氏管发酵法进行初筛,产酒精能力测试复筛,获得酵母菌株HTY06。产酒精能力测试结果表明,该酵母菌发酵10 d即可产酒精10.5%(体积分数)。并对菌株HTY06发酵力、凝聚性进行测试,结果表明该菌株发酵力较强,凝聚性强。通过形态学、生理生化及18 S rDNA序列同源性分析将菌株鉴定为酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。 刘姝 房耀维 焦豫良 吕明生 王淑军关键词:山楂果酒 酵母 Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶Asp186定点突变对酶活性的影响 被引量:1 2012年 为确定超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶(TSA)中特定氨基酸及所在位点与酶活性间的关系,以含TSA基因的pEt-28a-His6质粒为模板,利用定点突变技术,将第186位点的天冬氨酸(Asp)突变为天冬酰胺(Asn),突变子转化至E.coli BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,测定突变前后的酶活性,定点突变后的TSA无酶活性;采用DNAStar和Deepview蛋白分析软件,预测突变前后TSA蛋白的二级结构和三级结构,结果表明Thermococcus siculi HJ21 α-淀粉酶的186位点对维持TSA的酶活性具有重要意义,它的突变导致酶蛋白二级结构组件及氢键网络的改变。 吕明生 杨帆 胡建恩 房耀维 焦豫良 王淑军 刘姝关键词:Α-淀粉酶 定点突变 酶活性 海洋稀有放线菌Salinispora arenicola CNP193基因组新颖NRPS基因簇的异源表达初步研究 利用基因组发掘技术,从海洋稀有放线菌S.arenicola CNP193基因组序列中发掘新颖NRPS基因簇,并将基因簇在放线菌中异源表达,为新颖非核糖体多肽的发现和利用组合生物合成技术对化合物结构进行改造奠定基础。在利用... 房耀维 王淑军 刘姝 吕明生 焦豫良 陈国强 潘建梅文献传递 液体海洋右旋糖苷酶复合稳定剂及其应用 本发明是一种液体右旋糖苷酶复合稳定剂,它由以下重量比的原料混合制成:乙酸钠3-24、柠檬酸钠10-26、甘油6-16、对羟基苯甲酸复合酯钠0.02-0.07。本发明稳定剂加入液体右旋糖苷酶后可在4℃下保存4个月后其相对酶... 王淑军 吕明生 王德龙 王小贝 焦豫良 房耀维 刘姝文献传递 多结构域酶的结构域进化关系 被引量:1 2012年 近年来随着生命科学新技术、新方法的涌现,酶蛋白结构和功能研究逐渐深入。具有多结构域的酶蛋白中各个结构域常具有独立的催化或结合底物的功能,在重组酶和组合生物合成研究中具有极大的研究和应用价值。这些结构域功能和组织方式的多样性,是研究分子进化的基础。对结构域进行进化分析对于研究多结构域酶的进化过程、功能相近酶之间的关系,以及对酶的分类鉴定等有重要意义。本文从结构域的重复性、结构域的水平基因转移和结构域的重组等方面出发,对多结构域酶中结构域之间进化关系的研究成果进行综述。 焦豫良 王淑军 吕明生 房耀维 刘姝关键词:分子进化 水平基因转移 新型聚酮合酶基因簇的分离与部分鉴定 被引量:5 2008年 目的从海洋沉积物中分离新型聚酮合酶(PKS)基因簇,并解析其基因结构,为研究PKS的组合生物合成提供新组件。方法采集中国东海沉积物样本,并提取宏基因组DNA,以其为模板,通过简并PCR扩增新型PKS片段,用地高辛标记正确的扩增片段作为探针,然后从本研究中构建的海洋沉积物样本Fosmid宏基因组文库中筛选完整基因簇,测序、结构分析。结果(1)所分离得到的海洋沉积物宏基因组DNA可直接作为PCR模板,简并PCR扩增得到26个新型KS编码片段,并成功提交GenBank;(2)所得DNA构建成滴度约5×108cfu/ml的Fosmid文库,插入片段平均长度约为40kb;(3)将其中的一个KS片段(GenBank登录号DQ942531)用地高辛标记并筛选部分文库,得到4个克隆,测序得到7981bp的序列(GenBank登录号EF568935),结构分析发现含典型的I型PKS组件,如酮缩酶(KS)、酰基转移酶(AT)、酰基载体蛋白(ACP)等。结论简并引物扩增、宏基因组文库筛选、测序、结构分析,在本研究中被证明是有效的分离新PKS基因簇的途径;通过系统进化树分析得出26条新KS片段属于Ⅰ型KS片断和杂合PKS/NRPS基因簇,主要来自放线菌门、δ变形菌门、蓝藻门和β变形菌门的微生物。 焦豫良 王梁华 董晓毅 宗英 高云 任娜 郭爱芸 张兴群 焦炳华关键词:海洋沉积物 聚酮合酶 基因簇 组合生物合成 新型酰基转移酶AT-EF080951的重组表达及底物结合分析 2008年 目的研究新型聚酮合酶(PKS)基因簇EF568935(GenBank登录号)中酰基转移酶(AT)EF080951(GenBank登录号)底物特异性,为PKS的功能研究及组合生物合成研究提供新组件。方法从酰基转移酶AT-EF080951结构域两端的连接肽区设计引物,通过PCR克隆其结构域基因at-EF080951;连接入原核表达载体pMAL-c2X,与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达;直链淀粉树脂柱亲和层析纯化MBP-AT-EF080951;融合蛋白用Xa因子切除MBP,得到AT-EF080951单体;以MBP、小牛血清白蛋白(BSA)为对照蛋白,用紫外分光光度法测定MBP-AT-EF080951与AT-EF080951对底物的结合能力,计算结合常数(Ka,μmol/L),分析其结合底物的特异性。结果(1)MBP-AT-EF080951与底物的结合常数为:甲基丙二酰辅酶A,0.0049±0.001;丙二酰辅酶A,0.0049±0.003;乙酰辅酶A,0.107±0.002;辅酶A,0.005±0.003。(2)AT-EF080951与底物的结合常数为:甲基丙二酰辅酶A,0.005±0.002;丙二酰辅酶A,0.0041±0.002;乙酰辅酶A,0.120±0.001;辅酶A,0.0042±0.003。结论MBP-AT-EF080951和AT-EF080951都特异性结合乙酰辅酶A,AT-EF080951可能是乙酰转移酶。 焦豫良 王梁华 董晓毅 宗英 高云 任娜 郭爱芸 张兴群 焦炳华关键词:聚酮合酶 酰基转移酶 乙酰基转移酶 组合生物合成 网络教学平台在研究生“高级微生物学”教学中的应用实践 被引量:4 2018年 网络教学平台资源丰富,功能强大,越来越多地运用于高校教学。探索将网络教学平台引入研究生"高级微生物学"课程的教学改革。结果表明,"高级微生物学"网络教学平台激发了研究生的学习兴趣,提高了学生的自主学习能力,增加了师生互动,增强了学生的创新意识。 房耀维 刘姝 吕明生 焦豫良 王淑军关键词:网络教学平台 教学改革 一种微生物发酵生产牡蛎水解液的方法 本发明公开了一种微生物发酵制备牡蛎水解物的方法,其特征在于,它利用米曲霉<I>Aspergillus</I><I>oryzae</I>发酵太平洋牡蛎制备牡蛎水解物,制备时取新鲜牡蛎肉、洗净、匀浆后接种米曲霉发酵;发酵结束... 房耀维 王淑军 刘姝 吕明生 焦豫良