潘秋辉
- 作品数:69 被引量:296H指数:8
- 供职机构:上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 牛膝促进成骨细胞增殖的作用与机理研究被引量:44
- 2004年
- 目的 :研究牛膝对成骨细胞株HFOB1 19的促增殖作用及其分子机制。方法 :制备牛膝含药血清 ,醇提法制备牛膝脱皮甾酮 ,MTT法检测二者对体外培养的HFOB1 19的促增殖作用 ,RT PCR检测PKARⅠ β的表达。结果 :牛膝含药血清与牛膝脱皮甾酮均能促进成骨细胞的增殖 ,并导致PKARⅠ β表达的上调。结果 :初步判定牛膝在体外有促进人成骨细胞增殖的作用 ,其主要作用成份为脱皮甾酮 ,并有可能是通过cAMP介导的信号传导途径进行的。
- 孙奋勇潘秋辉洪岸
- 关键词:牛膝成骨细胞增殖作用药理中药
- 小鼠Qa-1基因有效shRNA干扰质粒的构建与筛选
- 2008年
- 本研究构建3个针对小鼠Qa-1基因的小发夹RNA(shRNA)表达质粒,观察其对Qa-1基因的沉默作用,筛选出有效靶位。通过美国Ambion公司提供的siRNA web设计工具,选择3段针对Qa-1的siRNA,交由晶赛公司合成3个小发夹表达质粒,采用脂质体转染法转染NIH3T3细胞,第1、2、3组细胞分别转染3个小发夹表达质粒,第4组细胞单纯加入脂质体作为阴性对照,收集转染后24、48、72小时的细胞,用RT-PCR技术及流式细胞术对Qa-1在RNA水平的变化和细胞表面表达进行分析,筛选最有效的干扰片段。结果表明:成功构建了3个针对小鼠Qa-1的小发夹表达质粒。RT-PCR及流式细胞术检测证实,转染后3个组shRNA载体均可抑制Qa-1基因的表达,但抑制程度不一:24、48、72小时3个组细胞表面Qa-1表达减低率分别为H2-T231:60.9%,81.9%,43.6%;H2-T232为:64.5%,73.9%,61.1%;H2-T233为:61.9%,71.2%,47.5%.其中H2-T232组在3个时间点抑制作用均最明显。结论:构建的3个针对Qa-1的小发夹表达质粒均能抑制Qa-1的表达,其中H2-T232具有最有效抑制作用。
- 程子禾方建培徐宏贵潘秋辉
- 关键词:人类白细胞抗原-ERNA干扰真核表达质粒
- 小鼠Gas6启动子的克隆与功能鉴定
- 2008年
- 目的:探讨软骨分化的负性转录因子Gas6基因启动子调控的分子机制。方法:采用5′RLM-RACE技术克隆Gas6的转录起始位点,利用生物信息学的方法对Gas6潜在启动子区域在小鼠、人与大鼠之间进行同源性比较,对Gas6上游序列进行系列缺失突变,构建Luciferase基因报告载体,转染细胞后检测Luciferase的表达水平。结果:Gas6的转录起始位点为碱基C,在小鼠、人与大鼠之间存在两个高度保守序列A-box与B-box,缺失A-box,B-box的后1/2区域以及NF-Y结合位点后,潜在启动子的转录活性明显下降。结论:A-box,B-box及NF-Y结合位点与Gas6的转录活性有关。
- 杨松海孙奋勇潘秋辉
- 关键词:GAS6启动子BMP-2软骨分化
- 吡啶钌(II)配合物作为抗肿瘤药物的应用
- 本发明涉及吡啶钌(II)配合物作为抗肿瘤药物的应用,具体测试了两种吡啶钌(II)配合物对高转移人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)、人肝癌细胞(HepG2)、人食管癌细胞(EC-1)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、正常乳...
- 孙奋勇梅文杰温传俊潘秋辉
- 文献传递
- 牛膝含药血清促进人T细胞增殖的作用与分子机制研究被引量:3
- 2005年
- 目的 :研究牛膝对体外培养的人 T淋巴细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法 :制备牛膝含药血清 ,3 H-Td R掺入法检测其对体外培养的 T细胞的促增殖作用 ,RT-PCR检测 PKAR β的表达。结果 :牛膝含药血清能明显促进 T细胞的增殖 ,并导致 PKAR β表达的增加。结论 :初步认为牛膝在体外有促进人 T细胞增殖的作用 ,并有可能通过 c AMP介导的信号传导途径进行。
- 孙奋勇潘秋辉
- 关爱儿童呼吸健康, 从早期诊断开始——访上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科主任潘秋辉教授
- 2023年
- 引起呼吸道感染的病原体种类繁多,由于临床症状缺乏特异性,给疾病的诊断带来了一定的困难,因此,呼吸道感染早期精确诊断就显得尤为重要。正值多种呼吸道疾病叠加流行的冬季,中华医学会《健康世界》邀请上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科主任潘秋辉教授,从呼吸道感染早期诊断作为切入点,向我们介绍呼吸道病原体检测技术,加强对疾病本质的认识,增强自我防护意识,掌握防护技能,远离呼吸道感染。
- 本刊编辑部潘秋辉
- 关键词:疾病本质呼吸道疾病检验科主任呼吸道病原体自我防护意识
- 使用一种新策略在大肠杆菌中高效表达hbFGF(英文)被引量:4
- 2002年
- 翻译起始区 (TIR)的二级结构是影响翻译效率的决定性因素 ,同时密码子的偏好性问题也是个至关重要的方面。基于以上两点考虑 ,对hbFGF 5’末端 35个碱基进行了改造 ,对其中 4个位点进行了定点突变 ,另有 4个位点进行了随机点突变。这些突变都可能造成TIR二级结构变化。这 4个随机突变共有 32种组合 ,使用RNA结构预测软件DNASISv2 .5对这 32种序列分别模拟其二级结构且计算其自由能 ,并选取了 10条自由能最高的序列。根据这10条序列 ,分别设计引物引入突变 ,克隆至表达载体pET 3c上 ,然后转化宿主菌E .coli,通过诱导表达纯化及生物测活等常规实验方法 ,最后确定有两株为高表达菌株 ,从某种程度上证明了用计算机辅助设计定点突变的方法来优化外源基因在E .coli中的表达是有效且很有潜力的。
- 宋照雷潘秋辉汪炬杨媛朱大明陈小佳刘翠兰洪岸
- 关键词:翻译起始区计算机辅助分析密码子偏好性HBFGF大肠杆菌
- 骨形态发生蛋白2通过Smad途径上调Osterix的表达被引量:12
- 2008年
- Osterix(Osx)是一种重要的调控成骨细胞分化的具有锌指结构的转录因子.骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP 2)能够上调Osx的表达,但其分子机制并不清楚.采用实时定量RT-PCR方法检测到BMP2诱导成骨相关细胞C3H10T1/2,MC3T3-E1,C2C12中Osx的转录水平显著上调,并且与成骨分化指标Col1a1,osteocalcin具有相似的表达动力学特征.而且,在C3H10T1/2细胞中过表达负显性(dominant negative,DN)Osx基因,能够有效抑制BMP2诱导的成骨分化.过表达BMP/Smad信号通路抑制蛋白Smad6,能够抑制Osx转录水平的上调.但是通过荧光素酶报告载体对Osx的启动子-1254^+85区域进行分析后未发现接受BMP通路调控的启动子区域.上述结果表明,BMP2能够通过Smad途径上调Osx的表达,并对成骨分化的过程具有十分重要的作用.
- 潘秋辉李益广杨松海马纪谢在春于永春孙奋勇
- 关键词:OSTERIX成骨细胞骨形态发生蛋白2
- 转录因子Osterix对成骨细胞Col1a1基因的反式激活作用被引量:5
- 2007年
- Osterix(Osx)是一种具有锌指结构的转录因子,对骨形成十分重要.但到目前为止,直接接受Osterix调控的靶基因尚不清楚.用骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导原代培养小鼠成骨细胞的骨分化,定量RT-PCR检测Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ a1,Col1a1)与Osx的转录水平.结果发现,二者的转录时相具有相同的变化模式.为了确定二者之间的关系,采用腺病毒表达系统在原代成骨细胞中过表达Osx.数据表明,Osx能够明显上调Col1a1的转录水平.用EMSA(electromobility shift assay)检测这些过表达Osx基因的成骨细胞核抽提物,迁移条带的出现表明,Osx能够直接与Col1a1的启动子相结合.结果提示,在原代培养的成骨细胞中,Osterix通过直接与启动子相结合,调控Col1a1基因的转录.
- 潘秋辉马纪于永春孙奋勇
- 关键词:成骨细胞OSTERIX骨形态发生蛋白2
- 糖化血红蛋白及糖化白蛋白在妊娠期糖尿病诊断中的价值被引量:29
- 2014年
- 目的:评估糖化血红蛋白(HbA1 c )和血清糖化白蛋白(GA)在妊娠期糖尿病(GDM)患者早期监测中的作用。方法根据美国糖尿病协会(ADA)建议,以口服75 g葡萄糖耐量试验(OGTT)测定值作为诊断GDM的标准,将98例妊娠妇女(孕期22~24周)分为正常妊娠组50例、GDM组48例,同时测定2组的HbA1 c和GA,并进行统计学分析及受试者工作特征(ROC )曲线分析。结果 GDM组的HbA1 c和GA明显高于正常妊娠组(P<0.01)。当HbA1c的Cut-off值为5.15%时,ROC 曲线下面积为0.954±0.020,敏感性为87.5%,特异性为92.0%。当GA的Cut-off值12.50%时,ROC曲线下面积为0.910±0.029,敏感性为81.3%,特异性为84.0%。HbA1c和GA联合诊断GDM的敏感性为70.8%、特异性为98.0%。结论当HbA1c >5.15%和GA>12.50%时,诊断GDM的敏感度和特异性较高。HbA1 c和GA联合检测对GDM有重要价值。
- 程晨张越何奖图肖伟凡高艳李静潘秋辉
- 关键词:糖化血红蛋白糖化白蛋白妊娠期糖尿病