孙奋勇
- 作品数:166 被引量:548H指数:12
- 供职机构:同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 利用一种新型反应器——BelloCell培养动物细胞被引量:3
- 2010年
- 利用BelloCell这种新型的生物反应器,来培养COS7细胞和昆虫Sf 9细胞。COS7细胞和昆虫Sf 9细胞分别用T75培养瓶及spinner flask培养之后,经细胞计数接入BelloCell之中,同时检测并分析培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸和氨浓度变化情况。COS7细胞初始接种量为4.208×107cells,最终在培养156h后细胞数量达到了4.68×108cells,是初始细胞量的11倍。sf 9细胞初始接种细胞量为1×108cells,在培养192h时,细胞总量达到了最高为4.01×109cells,是最初细胞量的40倍。培养基的代谢物进行有规律的变化。BelloCell适合COS7细胞和昆虫Sf 9细胞高密度大规模培养,为动物细胞高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础。
- 郑云程吴建虹孙奋勇廖美德谢秋玲
- 关键词:COS7细胞昆虫细胞细胞培养
- Sirtuin6在食管癌中发挥致癌作用并诱导自噬
- 目的:Sirtuin6(Sirt6)是Sirtuin 家族成员,通过催化启动子区域组蛋白脱乙酰化来抑制HIF1α和MYC 诱导的基因转录,进而抑制有氧糖酵解过程以及细胞生长。有文献报道Sirt6 在前列腺癌,乳腺癌以及非...
- 王欣悦孙奋勇
- 关键词:食管癌
- 二氢杨梅素对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外抗增殖作用被引量:12
- 2012年
- 0引言二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY),化学名为3,5,7,3′4′5′-六羟基-2,3双氢黄酮醇,是从藤茶(Ampelopsis grossedentata)等植物茎叶中提取的一种二氢黄酮醇化合物。
- 周防震张晓元孙奋勇郭勇
- 关键词:二氢杨梅素人乳腺癌细胞抗增殖细胞凋亡金属基质蛋白酶
- 一种重组人骨形成蛋白-2的表达方法
- 本发明公开了一种重组人骨形成蛋白-2的表达方法。包括目的基因hBMP-2的合成;用Nde I和BamH I双酶切hBMP-2基因与载体,连接构建重组载体,转化宿主菌,构建hBMP-2基因工程菌;培养hBMP-2基因工程菌...
- 汪炬孙奋勇戴云谢秋玲
- 文献传递
- 一种循环肿瘤细胞的检测方法
- 本发明涉及一种循环肿瘤细胞的检测方法:采集人体液样本,用甲醛固定后增加细胞膜通透性,将细胞加入若干组PCR多联管中,每管加有携带ID1的逆转录引物,逆转录成cDNA分子后,收集细胞混合加入另一组PCR多联管中,每管中加有...
- 孙奋勇潘秋辉江赐忠吴棋黄楠崔中奇
- hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定被引量:3
- 2002年
- 目的 :将人表皮生长因子 (hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子 (hbFGF)的C端连接 ,构建出既可与肝素结合 ,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5 端的 2 31bp的片段连接 ,克隆到表达载体pJN ,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL2 1(DE3)表达菌株 ,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果 :融合蛋白表达产量为 30 % ,融合蛋白不仅能与肝素结合 ,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为 5 2。结论 :本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白 ,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子 ,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。
- 余榕捷张玲林剑谢秋玲孙奋勇蒲含林李志英
- 关键词:尿抑胃素成纤维细胞生长因子HEGF
- 基于邻位交换介导的多色编码成像系统及其在RNA修饰空间分辨多重成像中的应用
- 本发明公开了基于邻位交换介导的多色编码成像系统及其在RNA修饰空间分辨多重成像中的应用,包括:将标记有RNA m<Sup>6</Sup>A抗体的PH1探针、Target特异性识别的PH2探针与待测样本进行孵育;标记有RN...
- 朱小立毛东升唐晓晨李文星张润驰潘秋辉孙奋勇
- 碱性成纤维细胞生长因子对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的抑制作用被引量:3
- 2002年
- 目的 :利用体外培养的PC12表现出神经细胞的特性 ,用Aβ2 5-3 5诱导PC12细胞凋亡 ,建立神经细胞毒性作用的模型 ,来探索bFGF对Aβ2 5-3 5作用和治疗老年性痴呆 (AD)的机制。方法 :通过Giema’s、PI染色法、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot及流式细胞仪研究了加入Aβ2 5-3 5培养的以及Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞的形态和分子生物学改变及凋亡相关基因Bcl- 2 ,Bax表达的变化。结果 :Aβ2 5-3 5可诱导PC12细胞核DNA发生降解 ,出现染色质浓缩成块状、胞浆浓缩、胞膜内陷、凋亡小体形成等 ;而Aβ2 5-3 5和bFGF共培养的PC12细胞则能缓解这种形态学上的变化 ,细胞凋亡率减少 ,Bcl- 2的表达量上调而Bax的表达量下调。结论 :bFGF能抑制Aβ2 5-3 5对神经细胞的毒性作用 ,其机制可能是通过调控Bcl- 2、Bax的表达来实现的。
- 朱大明宋照雷孙奋勇杨媛段锐林剑洪岸
- 关键词:成纤维细胞生长因子细胞凋亡淀粉样Β蛋白
- 二氢杨梅素诱导MDA-MB-231细胞凋亡被引量:7
- 2012年
- 为了探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的机制,利用倒置显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞仪检测DMY对MDA-MB-231细胞的致凋亡能力和细胞内钙离子浓度和线粒体膜电位(ΔΨm)的改变,用蛋白质印迹(Western blotting)分析检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的变化。结果表明:MDA-MB-231细胞随DMY质量浓度加大而变圆变小,细胞存活数减少;流式细胞仪检测显示随DMY质量浓度的增加,DMY对MDA-MB-231细胞有促凋亡作用,胞内钙离子浓度逐渐增加,而线粒体跨膜电位(ΔΨm)逐渐减少;Western blotting结果显示DMY可诱导MDA-MB-231细胞中caspase-3和caspase-9蛋白质活化,并呈现浓度依赖关系。表明DMY可通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡。
- 周防震张晓元孙奋勇郭勇
- 关键词:细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3二氢杨梅素
- YAP与O-糖基化修饰系统相互促进使糖尿病诱发肝癌的机制研究
- Objective:O-糖基化(O-GlcNAcylation)由O-糖基化转移酶OGT催化,将N-乙酰葡萄糖胺转移到目标蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基上.O-糖基化和磷酸化由于都发生于蛋白的丝氨酸和苏氨酸上,所以它们之间一般...
- 张骁王佳谊孙奋勇