江丽
- 作品数：30 被引量：95H指数：7
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 大鼠脂肪干细胞诱导分化为类许旺细胞的表型和功能特征被引量：4
- 2007年
- 目的研究大鼠脂肪干细胞(ADSCs)在体外分化为类许旺细胞的表型和功能特征,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法采用β-疏基乙醇、全反式视黄酸、forskolin、血小板源生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和heregulin依次联合诱导,双重免疫荧光细胞化学法和Western blot鉴定神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100蛋白等许旺细胞标志蛋白的表达,与原代背根神经节(DRG)感觉神经元共培养研究诱导后细胞的功能。结果诱导后ADSCs形态类似许旺细胞。双重免疫荧光细胞化学法显示S-100和GFAP的最高表达率分别为(78.08±6.08)%和(72.38±6.43)%,双重表达率为(60.76±6.43)%。Western blot显示诱导后细胞同时表达这两种蛋白。诱导后细胞能明显增加DRG神经元的突起向外生长。结论诱导后ADSCs的表型和功能特征证实大鼠ADSCs在体外可分化为类许旺细胞。
- 江丽朱家恺刘小林项鹏胡军余伟华
- 关键词：脂肪干细胞许旺细胞神经元表型
- 自体脂肪干细胞复合胶原海绵多孔支架构建大鼠乳腺脂肪组织的初步研究
- 2011年
- 目的 探讨自体脂肪干细胞复合胶原海绵多孔支架构建大鼠乳腺脂肪组织的可行性.方法 采用胶原酶消化、离心方法分离并培养6只雌性SD大鼠的脂肪干细胞.对脂肪干细胞进行成骨、成脂诱导及鉴定.将自体脂肪干细胞复合Ⅰ型胶原海绵多孔支架进行体外培养.将自体脂肪干细胞复合Ⅰ型胶原海绵多孔支架移植到大鼠右上侧乳腺（实验组）,将Ⅰ型胶原海绵多孔支架移植到大鼠左上侧乳腺（对照组）,共移植6例.12周后观测有无新生脂肪形成；测量新生脂肪组织湿质量；组织切片行HE及油红0染色.结果 SD大鼠脂肪干细胞增殖能力强；具有成骨及成脂分化能力；体外培养2周,胶原支架内可见ASC生长.实验组可见乳腺与胸肌之间有脂肪样新生组织形成,平均湿质量为（121±9） mg.对照组见乳腺与胸肌之间有胶原海绵样组织形成,平均湿质量为（77±6） mg,两组间湿质量存在统计学差异,P＜0.05.HE及油红O染色证实,实验组新生组织主要为成熟脂肪组织；而对照组主要为胶原纤维.结论 自体脂肪干细胞复合Ⅰ型胶原海绵多孔支架可在大鼠乳腺区域形成脂肪组织.
- 许澍洽许扬滨江丽朱家恺
- 关键词：脂肪干细胞
- 异体脂肪干细胞复合去细胞异种神经修复猕猴周围神经缺损的实验研究
- 黄喜军朱庆棠江丽郑灿镔朱昭炜路庆森许银峰顾立强刘小林
- 文献传递
- 大鼠化学去细胞异体神经再血管化的实验研究被引量：9
- 2009年
- 目的观察化学去细胞异体神经移植修复大鼠坐骨神经缺损后再血管化的过程。方法成年雄性SD大鼠80只。取16只SD大鼠坐骨结节至胫、腓神经分叉处的坐骨神经干,制备去细胞神经移植物。取64只SD大鼠随机分为实验组及对照组,每组32只。制备大鼠右侧1.0 cm坐骨神经缺损模型后,实验组采用去细胞神经移植物进行桥接修复;对照组采用自体神经原位桥接修复。观察大鼠术后一般情况,并于术后5、7、10、14、21、28 d及2、3个月,取材行大体观察及ALP染色观察。结果两组大鼠切口均Ⅰ期愈合,术后两组大鼠出现右足拖行,足趾不能伸展,术后6周改善。大体观察见两组移植物均与两端神经连接良好,移植物外观与正常神经相似。术后5 d ALP染色观察,实验组移植物内无微血管长入,对照组移植物内可见微血管长入;7 d实验组移植物内可见微血管长入,但两组移植物中部均未见微血管;10 d、14 d及21d分别见少量纵行微血管贯穿两组移植物;28 d,两组移植物内微血管网未见明显差别;2个月和3个月两组移植物内微血管构筑与正常神经相似。结论化学去细胞同种异体神经移植修复周围神经缺损后,新生微血管能及时长入移植物内。
- 牛晓锋刘小林胡军江丽
- 关键词：周围神经缺损去细胞神经异体移植再血管化
- 携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染大鼠脂肪干细胞被引量：5
- 2014年
- 目的探索脂肪干细胞（ADSCs）的标记方法，观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性ADSCs（EGFP—ADSCs）的体外活性、干细胞特性及体内短期活性。方法用携带增强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因的慢病毒载体（Lv-eGFP）在感染复数（MOI）为0、1、5、25、50、100时，转染SD大鼠ADSCs12h，荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率和荧光强度；Mrrr法评价转染后细胞活性；EGFP—ADSCs分别行成脂分化及油红O检测、成骨分化及茜素红染色；将EGFP—ADSCs注射到去细胞神经构建组织工程化神经，修复大鼠坐骨神经缺损，术后1周取材进行冰冻切片观察细胞在体内存活情况。结果转染4d后，EGFP阳性率及荧光强度达到高峰；EGFP基因表达不随细胞传代而消失。MOI=0、1、5、25、50、100时，EGFP阳性转染率分别为0．13％、31．09％、75．33％、92．66％、96．70％、98．38％。实验组阳性率与对照组（MOI=0）选择相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）；MOI=25、50、100时，组问阳性率差异无统计学意义（P〉0．05），但与MOI=1、5比时差异（P〈0．05）。MTT试验观察10d内MOI=25、50、100组细胞增值活性与非转染细胞差异无统计学意义（P〉0．05）。选择MOI=25作为最佳转染滴度进行后续实验。转染后ADSCs成骨、成脂分化20d，茜素红染色见橘红色钙沉积，油红O染色见橙红色脂滴。1周冰冻切片观察细胞于体内呈梭形，均匀分布。结论慢病毒载体转染EGFP基因不影响ADSCs活性及成骨成脂分化能力，能为组织工程化神经修复缺损提供示踪种子细胞的方法。
- 李绍磊刘云江牛晓峰许银峰易建华杨有优江丽
- 关键词：脂肪干细胞转染绿色荧光蛋白慢病毒载体周围神经
- 重组PGL3-转化生长因子β_1基因转染兔骨髓基质干细胞体外诱导向软骨细胞分化的实验研究被引量：23
- 2006年
- 目的探讨将编码细胞转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)的重组PGL3-TGF-β1质粒转染兔骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs),体外通过自分泌、诱导作用向软骨细胞方向分化的可行性,为基因加强组织工程学修复软骨损伤提供体外实验依据。方法兔MSCs体外密度梯度离心及贴壁筛选法分离培养,脂质体法转染重组PGL3-TGF-β1,转染后绘制不同时期细胞生长曲线,MTT法分析转染后细胞(实验组)生长活性,以未转染空载体细胞为实验对照组,未转染细胞为空白对照组;转染后第2、7天,分别进行抗TGF-β1和抗型胶原蛋白的免疫组织化学染色(SABC法),以未转染细胞为实验对照组,PBS作为一抗为空白对照组,进行图像定量分析。结果MSCs体外分离培养,脂质体法转染后,生长曲线显示转染后细胞生长活性较对照组降低,MTT法显示实验组及实验对照组吸光度(A)值较空白对照组低,差异有统计学意义(P<0.01);实验组转染细胞第2天,抗TGF-β1免疫组织化学染色可见细胞内阳性颗粒,实验对照组及空白对照组均为阴性;转染细胞第7天,抗型胶原免疫组织化学染色实验组可见细胞内阳性颗粒,实验对照组及空白对照组均为阴性。图像分析示,实验组抗TGF-β1及抗型胶原免疫组织化学染色阳性值与实验对照组及空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论脂质体法重组PGL3-TGF-β1基因可成功转染兔MSCs,但对细胞生长有一定影响,转染细胞表达TGF-β1,通过其自分泌、诱导作用,细胞分泌型胶原蛋白,表现出软骨细胞样生理特征,并向软骨细胞方向分化。
- 雷磊廖威明盛璞义黄纲江丽
- 关键词：组织工程软骨骨髓基质干细胞基因转染
- 富血小板血浆对大鼠许旺细胞生物学行为的影响被引量：8
- 2013年
- 目的观察不同浓度的富血小板血浆（PRP）对体外培养的许旺细胞（SCs）增殖、分泌功能及迁移的影响，探讨其促进周围神经再生的可能作用机制。方法从SD大鼠心脏穿刺取血，利用二次离心法制备PRP，对全血和PRP中血小板计数和血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）和转化生长因子（TGF-B1）浓度测定；取3～5d龄的大鼠坐骨神经培养纯化SCs，将P1细胞分为实验组与对照组分别进行处理，实验组以含40．0％、20．0％、10．0％、5．0％和2．5％PRP的条件培养液干预，并设立空白对照组。于干预不同时间点采用CCK-8法测定SCs增殖活性情况，用实时荧光定量PCR方法检测细胞神经生长因子（NGF）和胶质细胞源神经营养因子（GDNF）mRNA表达的变化，ELISA检测SCs分泌NGF和GDNF的水平，Transwell小室检测各组SCs的迁移能力。结果PRP血小板回收率达65％，PDGF．BB和TGF-β1浓度明显高于血清（P〈0．01）；与空白对照组相比，低于20．0％浓度的PRP呈浓度依赖性促进SCs增殖和迁移，而40．0％浓度组细胞增殖和迁移受到抑制；SCs分泌的NGF和GDNF和其mRNA表达均较对照组明显增加，同样在低于20．0％浓度的范围内呈现量效关系，40．0％浓度组则显示抑制作用。结论PRP在适当浓度范围可以促进SCs的分裂增殖，合成分泌NGF和GDNF以及迁移的能力，具有潜在的促周围神经再生的作用。
- 郑灿镔朱庆棠刘小林黄喜军何彩凤江丽周翔朱昭炜
- 关键词：富血小板血浆神经生长因子许旺细胞细胞迁移周围神经
- 制备去细胞人体肌腱支架材料的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的探索化学萃取法制备去细胞人体肌腱支架材料的实验方法。方法用1．0％磷酸三丁酯[tri（n—butyl）Phosphate，TnBP]分别联合0％、0．25％、0．50％及1．00％曲拉通-100（TritonX-100）对人体肌腱进行去细胞处理，通过组织学、扫描电镜观察、生物力学和羟脯氨酸含量测定，并与新鲜人体肌腱对比，评价去细胞人体肌腱支架材料的特性。结果肌腱去细胞处理后色泽光亮，腱膜完整，韧性好；1．00％TnBP加0％TritonX-100组仍有少量细胞存留，其余3个处理组去细胞彻底，1．00％TnBP加0．25％TritonX-100组胶原纤维完整、走形规则。1．00％TnBP加0．50％TritonX-100与1．00％TnBP加1．00％TritonX-100组胶原纤维完整，但间隙略增宽，最大载荷分别为（385．220±80．316）N、（398．220±127．195）N，抗张强度分别为（46．690±16．295）Mpa、（46．20±5．517）Mpa，羟脯氨酸含量分别为（0．2826630±0．0110109）μg/mg、（0．2793550±0．0102129）μg/mg，分别和新鲜对照组[最大载荷（533．280±135．774）N、抗张强度（65．560±14．401）Mpa、羟脯氨酸含量（0．2928820±0．0100988）μg/mg]相比，力学性能降低、羟脯氨酸含量减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论1．oo％TnBP加0．25％Tritonx-100处理是较理想的制备去细胞人体肌腱的方法。
- 许银峰胡军肖良宝江丽易建华牛晓锋
- 关键词：肌腱化学萃取去细胞磷酸三丁酯
- 大鼠脂肪干细胞生物学特性的研究被引量：14
- 2007年
- 目的研究大鼠脂肪干细胞的生物学特性,为外周神经组织工程应用提供实验基础。方法从F344大鼠的脂肪组织分离得到脂肪干细胞,体外培养并扩增,倒置相差显微镜观察其形态、绘制生长曲线研究增殖能力,流式细胞仪检测表面标志,核型分析研究遗传学性能,最后以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)进行体外标记。结果脂肪干细胞形态以梭形为主,CD11b、CD45、CD49d、CD80、CD86表达阴性,MHC I、MHCⅡ表达弱阳性,CD29、CD44、CD54的表达阳性。第11代以前的脂肪干细胞有较强的活力和增殖能力,体外培养至第10代,其细胞仍稳定为二倍体核型。BrdU可标记其核。结论脂肪干细胞具有较强的自我更新能力,其形态和表面标志均类似大鼠骨髓间充质干细胞。
- 江丽朱家恺刘小林项鹏余伟华
- 关键词：脂肪干细胞细胞培养
- 复合异体脂肪干细胞的异种去细胞神经修复猕猴周围神经缺损被引量：8
- 2014年
- 目的 探讨复合异体脂肪干细胞（ADSCs）的去细胞异种神经修复猕猴桡神经缺损的效果.方法 于2010年3月至2012年5月,从雄性猕猴腘窝脂肪组织中分离出ADSCs,采用显微注射法将ADSCs种植在经化学萃取的去细胞猪胫神经上.用10只健康雌性猕猴,制成15侧上臂桡神经25 mm缺损模型,分为A、B、C三组（5侧/组）,分别用复合了雄性猕猴ADSCs的去细胞猪胫神经、未复合ADSCs的去细胞猪胫神经、自体神经进行修复.术后5个月进行伸腕功能评定及电生理学检测,并取材作神经移植体和伸腕肌组织学检查. 结果 术后5个月A、B、C三组伸腕角度恢复率分别为（80.53±15.30）％、（69.06±7.02）％和（99.91±22.16）％,电生理学检测显示桡神经恢复电传导功能,组织学检查显示移植体内有再生神经纤维通过,各项检测指标显示A组的修复效果优于B组,而C组则优于A组和B组,但各组的差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 去细胞猪胫神经能有效修复猕猴25 mm长的桡神经缺损,复合异体ADSCs的去细胞猪胫神经其修复效果可能更优.
- 黄喜军朱庆棠江丽郑灿镔朱昭炜路庆森许银峰顾立强刘小林
- 关键词：去细胞神经脂肪干细胞异种移植猕猴
