林靖凯
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
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- 相关领域：农业科学经济管理生物学医药卫生更多>>
- 胎儿弯杆菌表面蛋白(SapA)基因的分段表达及其免疫原性分析被引量：7
- 2008年
- 应用PCR方法扩增出胎儿弯杆菌表面蛋白基因(SapA)的2个基因片段SapA-N(1398bp)和SapA-C(1422bp),采用DNA重组技术,将2个基因片段分别连接于表达载体pET32a(+),并在大肠杆菌中诱导表达(rSapA-N和rSapA-C),用金属鳌合层析的方法纯化蛋白。以Western blot检测重组蛋白的免疫学活性,ELISA试验分析2种蛋白用于胎儿弯杆菌病血清学诊断的可能性。结果表明,以可溶形式表达的2部分蛋白分子量大小约66ku,与预期大小相符。纯化的蛋白均具有良好的免疫学活性,但蛋白rSapA-N比蛋白rSapA-C的免疫学活性高,rSapA-N具有良好的胎儿弯杆菌病血清学诊断的应用价值。
- 赵海玲刘思国刘慧芳王春来司微杜艳芬杨金国林靖凯
- 关键词：原核表达纯化ELISA
- 牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究
- 为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spacer oligotyping,Spoligotyping)和数目可变串联重复序列-结核分枝杆菌散在分布重复单元(variable number tandem repeats-mycob...
- 杜艳芬林靖凯刘思国王春来刘慧芳司微王聃赵海玲
- 关键词：牛分枝杆菌SPOLIGOTYPINGVNTR基因分型
- 文献传递
- 牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究
- 为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spacer oligo-typing,Spiligotyping)和数目可变串联重复序列-结核分枝杆菌散在分布重复单元(Variable number tan-dem repeats-myc...
- 杜艳芬林靖凯刘思国王春来刘慧芳司微王聃赵海玲
- 文献传递
- 村镇银行主发起人制度研究
- 村镇银行是我国商业银行的一种，是我国单体规模最小、服务对象最为基层的银行机构，也是我国最为典型的普惠型银行机构。村镇银行主发起人制度是村镇银行的核心制度，同时也是我国的一项重要银行业法律制度，对我国的普惠金融事业发展、“...
- 林靖凯
- 关键词：村镇银行
- 利用Red重组系统敲除大肠杆菌菌株ClpP基因方法的研究被引量：1
- 2011年
- 为了研究ClpP基因的功能,试验利用Red系统的重组功能,通过PCR扩增出两端与大肠杆菌菌株ClpP基因上、下游序列同源,中间为氯霉素抗性基因cat的DNA片段,电击转化含质粒pKD46的大肠杆菌菌株DH091,筛选替换ClpP基因的阳性转化子,再导入质粒pCP20去除氯霉素抗性基因。结果表明:成功敲除大肠杆菌菌株ClpP基因。
- 司微刘慧芳王春来彭玮赫明雷杜艳芬赵海玲王聃杨金国林靖凯倪洪波刘思国
- 关键词：RED重组系统基因敲除
- 抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备被引量：2
- 2010年
- 林靖凯赵海玲杜艳芬王春来刘慧芳司微王聃刘思国李广兴
- 关键词：单克隆抗体
- 放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测被引量：1
- 2010年
- 为了筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白在肺泡上皮细胞上的作用受体,应用酵母双杂交技术构建诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,进行酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-omp在酵母双杂交系统中的自激活和毒性作用。结果表明,成功构建了诱饵质粒载体pGBKT7-omp,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。表明pGBKT7-omp可应用在酵母双杂交系统中,用于寻找猪肺泡上皮细胞cDNA文库中与omp相互作用的蛋白质。
- 倪宏波刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳王春来司薇常月红彭玮王聃赫明雷
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白自激活作用
- 比较蛋白组学分析两株不同基因型的结核分枝杆菌
- 本文应用双向电泳技术，对来源于同一牛群的这2株不同基因的结核分枝杆菌的胞内蛋白进行了分离，挑选了26个有表达差异的蛋白进行解析，利用串联质谱技术鉴定出21个差异蛋白。其中，15个蛋白与生物体的多个关键代谢过程有关，包括小...
- 亓英芳王春来刘思国杜艳芬林靖凯刘慧芳赫明雷司微尹录欧阳凤菊倪洪波
- 关键词：结核分枝杆菌基因表达双向电泳技术
- 文献传递
- 牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究被引量：1
- 2009年
- 为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)和数目可变串联重复序列-结核分枝杆菌散在分布重复单元(VNTR-MIRU)基因分型法用于国内牛分枝杆菌的基因分型研究,初步了解我国牛分枝杆菌基因型种类、分布以及2种方法在我国应用的可行性。本研究收集东北、西北、华北、华南4个地区分离的10株牛分枝杆菌分离株,分别采用Spoligotyping和VNTR-MIRU对这些分离株进行基因分型,比较两种方法的分型效果,评价其在牛分枝杆菌基因分型中的应用。结果表明,使用Spoligotyping方法,10株牛分枝杆菌呈现出4种基因型,使用VNTR-MIRU方法,10株分离株也呈现4种基因型;当两种方法联合使用时,可以分为5种基因型,其中的2个菌株具有独特的基因型,显示来自不同地区的牛分枝杆菌存在主要的流行型为BCG家族。将Spoligotyping和VNTR-MIRU联合使用,可有效提高牛结核病的分子流行病学调查和病原学的监测效果。
- 杜艳芬林靖凯刘思国王春来刘慧芳司微王聃赵海玲
- 关键词：牛分枝杆菌SPOLIGOTYPINGVNTR基因分型
- 胎儿弯杆菌表面蛋白SapA抗原单克隆抗体的制备
- 2009年
- 用原核表达的重组胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(rSapA-N)免疫小鼠,采用细胞融合技术,共获得2株抗rSapA-N的单克隆抗体(MAb),经Ig亚类鉴定,均为IgG1,轻链为κ链;Western blot证实这2株MAb均能与rSapA-N发生特异性反应,而与其它蛋白则不发生反应;以这2株MAb的杂交瘤细胞制备腹水,效价达到1∶100 000和1∶60 000。本研究制备的MAb,为研究和检测胎儿弯杆菌提供了一种重要的手段。
- 赵海玲林靖凯杜艳芬刘慧芳司微王春来王聃赫明雷彭玮杨金国刘思国
- 关键词：免疫单克隆抗体
