杨永广
- 作品数：41 被引量：17H指数：2
- 供职机构：吉林大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学核科学技术自动化与计算机技术更多>>
- NOD/SCID小鼠巨噬细胞排斥人红细胞的机制研究
- 研究背景:具有人红细胞组成的人源化小鼠模型的建立对于研究由胚胎干细胞分化而来的人红细胞的应用以及研究人红细胞相关疾病(如疟疾等)都具有重要意义。将人造血干细胞(HSC)移植入NOD/SCID小鼠建立的人源化小鼠中虽然具有...
- 陈冰胡正杨永广
- 关键词：人红细胞补体
- 文献传递
- 针对人源化动物单细胞转录组测序的非人细胞过滤系统
- 本发明公开一种针对人源化动物单细胞转录组测序的非人细胞过滤系统，包括：数据采集模块、数据比对模块、数据处理模块和数据过滤模块，其中，数据采集模块、数据比对模块、数据处理模块和数据过滤模块依次连接；数据采集模块用于采集测序...
- 付聪董帅侯欣彤胡正杨永广
- 一种在屏障环境内使用的小型猪运输装置
- 本实用新型公开了一种在屏障环境内使用的小型猪运输装置，该装置包含：移动升降平台，其可升降且可移动；外笼，其滑动设置在移动升降平台上；以及内笼，其滑动设置在外笼内。其中，外笼的一端设有传递舱门，其内侧底面为向下凹的弧形面，...
- 李志满杨永广孙丽光王美芳
- 文献传递
- 携带hTERT-P2A-EGFP基因真核表达质粒的构建和鉴定
- 2017年
- 目的:构建真核表达质粒hTERT-P2A-EGFP,探讨其在HEK293FT细胞中的表达和转染效率。方法:利用pBABE-puro-hTERT和pRRLSIN-cPPT-MSCV-EGFP质粒构建重组质粒。以该质粒为模板采用PCR法获取hTERT、P2A和EGFP基因,采用重叠PCR法获得目的片段hTERT-P2A-EGFP,经酶切后目的片段与真核表达载体pRRLSIN-cPPT-MSCV-EGFP连接,得到并鉴定含有hTERT-P2A-EGFP基因的重组质粒。经脂质体介导重组质粒转染到HEK293FT细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)在细胞中的表达。结果:PCR检测目的基因hTERT、P2A和EGFP的片段长度分别为3 400、110和720bp。酶切后目的基因片段hTERT-P2A-EGFP约4 300bp。测序分析,目的基因1 547位点发生了突变。利用定点突变技术成功诱变,再次测序后目的基因序列与GenBank公布的基因序列完全一致。重组质粒转染HEK293FT细胞后在荧光显微镜下可以观察到GFP。流式细胞术检测,重组质粒转染HEK293FT细胞的效率为44.8%。结论:成功构建携带目的基因hTERT-P2A-EGFP的重组质粒,且可用于细胞转染。
- 陈晓娜王晓丹孙丽光方芳崔巍巍杨永广刘娅
- 关键词：人端粒酶逆转录酶绿色荧光蛋白质粒构建
- 应用聚合酶链反应方法对人T淋巴细胞抗原受体
- 杨永广
- Modeling human disease and immunotherapy in humanized mice
- <正>Mouse models are the most commonly used in vivo systems for biomedical research,in which immune disorders a...
- 杨永广
- 文献传递
- 利用抗人CD19分子的嵌合抗原受体修饰的巨噬细胞靶向杀伤B淋巴细胞白血病细胞的作用及机制研究
- 背景:巨噬细胞是一种重要的抗肿瘤效应细胞,可以直接杀伤肿瘤细胞,或者通过呈递肿瘤相关抗原诱导机体免疫应答从而清除肿瘤.嵌合抗原受体(CAR)技术可不受MHC分子限制靶向杀伤肿瘤细胞,其应用于巨噬细胞能否促进巨噬细胞对肿瘤...
- 王轶楠刘岩厚万继亚杨永广
- 关键词：CD19巨噬细胞
- 几种成年小鼠胸腺上皮细胞分离和富集方法效果的比较
- 2016年
- 目的:通过比较几种成年小鼠胸腺上皮细胞(TECs)分离和富集方法的效果,寻找一种具有准确体内代表性的高效TECs富集方法。方法:27只6~8周龄BABL/c小鼠分为9组,每组3只。1分离实验分为5个分离组,包括1.0g·L^(-1) collagenaseⅤ组和0.5、0.7、1.0及2.0U·mL^(-1) LiberaseTM组,按照相应的酶工作浓度对胸腺组织进行消化处理;2富集实验分为4个富集组,包括对照组和免疫磁珠(MACS)、Percoll及Ficoll富集组,各组用1.0U·mL^(-1) LiberaseTM消化胸腺组织后,将所得的单细胞悬液分别用MACS、Percoll和Ficoll法进行细胞富集(对照组除外)。分离组通过流式细胞术检测细胞活力及胸腺基质细胞(TSCs)的产量;富集组通过流式细胞术检测细胞活力、TSCs比例和TSCs中TECs重要标志上皮细胞黏附分子(EpCAM)的表达丰度,检测Percoll富集组和对照组TECs的2个亚群——皮质TECs(cTECs)和髓质TECs(mTECs)比例。结果:1.0U·mL^(-1) Liberase TM组中TSCs的产量明显高于0.5和0.7U·mL^(-1) LiberaseTM组(P<0.01),且其细胞活力及消化时间均优于1.0g·L^(-1)collagenaseⅤ组(P<0.01)。3个富集组的细胞活力均较高,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,3个富集组TECs比例明显增加(P<0.05或P<0.01);在3个富集组中,Percoll富集组富集的TECs比例高于其他2个富集组(P<0.01);与对照组比较,Percoll富集组cTECs和mTECs的百分比及cTEC/mTEC比值无明显变化(P>0.05)。结论:Liberase TM较collagenaseⅤ更适用于消化成年小鼠胸腺,其最适消化浓度为1.0U·mL^(-1)。本研究采用的3种富集方法均可以提高TECs比例,对细胞的破坏均较小;Percoll富集法最有效,在富集后不影响TECs亚群细胞比例,便于后续实验操作。
- 齐慧慧陈冰陈晓娜王瑶琪佟青玥孙丽光杨永广
- 关键词：胸腺上皮细胞流式细胞术
- 人源化小鼠模型构建和应用的研究进展被引量：8
- 2018年
- 人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性较高。人源化小鼠模型在艾滋病、癌症、传染病和血液病研究领域等均有广泛的应用。具有人造血免疫系统组成的人源化小鼠模型已经被证明在解码人类疾病奥秘中具有巨大的优势和广泛的应用前景。本文从免疫系统人源化小鼠模型演变的历史过程、具体的分类方法及模型的应用等几个方面进行综述。
- 陈冰刘昊川李龙云赵国庆王震杨永广李凯胡正
- 关键词：肿瘤传染性疾病自身免疫性疾病
- 斯坦曼的树突细胞与诺贝尔奖被引量：1
- 2012年
- 2011年10月3日北京时间17点30分，瑞典皇家科学院诺贝尔奖委员会在瑞典卡罗琳斯卡医学院宣布，美国科学家布鲁斯·巴特勒（Bruce A．Beutler）、卢森堡科学家朱尔斯·霍夫曼（Jules A．Hoffmann）和加拿大科学家拉尔夫·斯坦曼（Ralph M．Steinman）因在免疫系统研究领域的贡献获得2011年度诺贝尔医学生理学奖。
- 王轶楠孙丽光杨永广
- 关键词：诺贝尔奖树突细胞美国科学家加拿大科学家免疫系统
