杨云鹏
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市医学科研计划项目重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗对鱼藤酮慢性帕金森病小鼠的治疗作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨优化人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)核酸疫苗pVAX1-IL4/SYN-B对鱼藤酮慢性帕金森病小鼠的治疗效果。方法采用鱼藤酮1 mg/kg给予背部皮下注射,1次/d,连续注射40 d,建立慢性帕金森病小鼠模型。建模后小鼠随机分为3组:核酸疫苗组、空质粒组、PBS组(n=8)。于小鼠双侧后肢胫前肌部位,分别注射pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗,空质粒pVAX1,PBS各100μL,共免疫3次,每次间隔3周。末次免疫后2周,观察小鼠行为学变化;免疫组化方法检测小鼠脑黑质致密部α-syn表达和酪氨酸羟化酶阳性细胞数目变化;RT-PCR检测α-syn mRNA表达情况。结果行为学观察各组小鼠自由活动实验显示,核酸疫苗组与空质粒组及PBS组小鼠移动格子数和下肢站立次数均有明显改善(P<0.05)。免疫组化检测发现核酸疫苗组小鼠与空质粒组、PBS组相比,TH阳性细胞数增加51.43%、59.00%(P<0.05),α-syn表达减少45.64%、43.28%,(P<0.05)。RT-PCR检测发现核酸疫苗组α-syn mRNA表达水平(0.37±0.17)较空质粒组(0.80±0.01)及PBS组(0.74±0.05)明显减少(P<0.05)。结论 hα-syn核酸疫苗有较强改善帕金森病小鼠行为学的作用;能有效改善鱼藤酮神经毒素对黑质多巴胺能神经元的损害,能对帕金森病小鼠产生较好的免疫治疗作用。
- 杨旭杨云鹏马英周长青张玉平陈中美彭国光
- 关键词：帕金森病核酸疫苗鱼藤酮
- 鱼藤酮和MPTP慢性帕金森病小鼠黑质共同差异蛋白研究被引量：2
- 2011年
- 目的通过比较鱼藤酮和1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)两种慢性帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型小鼠与对照组小鼠黑质蛋白表达谱,找出两种PD模型小鼠共同的差异蛋白,探索筛选出PD的疾病特异性蛋白。方法构建鱼藤酮和MPTP慢性PD小鼠模型组以及其各自的对照组1和对照组2,并进行行为学评价以及黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫组化。分别挖取黑质,提取总蛋白,进行双向凝胶电泳。运用PDQuest 8.0图像分析软件对鱼藤酮组与对照组1、MPTP与对照组2的电泳图谱分别进行分析,找出各自的差异表达蛋白。差异蛋白酶切后,MALDI-TOF-MS进行质谱鉴定。最后将所得到的肽质量指纹图(PMF)进行数据库搜索以及生物信息学分析。结果鱼藤酮组与对照组1、MPTP组与对照组2小鼠间行为学差异具有统计学意义(P<0.05),且黑质TH阳性细胞计数差异也具有统计学意义(P<0.05)。鱼藤酮组与对照组1比较发现有22个差异蛋白,MPTP组与对照组2比较发现有28个差异蛋白,其中有7个为共同的差异蛋白。我们成功鉴定其中3个共同的差异蛋白:PPP2R1A、吡哆醛激酶、peroxiredoxin-2。结论鉴定出3个在PD蛋白质组学中少见报道的蛋白。这些蛋白水平的上调或下调可能与PD的发病密切相关,可作为PD的疾病特异性蛋白。
- 周长青杨旭杨云鹏万金城赵臣勇彭国光
- 关键词：蛋白质组学
- pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗预防接种对慢性鱼藤酮损害小鼠的神经保护作用被引量：3
- 2011年
- 目的探讨优化人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)核酸疫苗(pVAX1-IL4/SYN-B)预防接种对慢性鱼藤酮损害小鼠的神经保护作用。方法将小鼠随机分为3组:核酸疫苗组、空质粒组、PBS对照组,在小鼠双侧后肢胫前肌部位分别注射pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗,空质粒pVAX1,PBS各100μl,共免疫3次。末次注射3周后全部小鼠背部皮下注射鱼藤酮1 mg/kg,1次/d,连续注射40 d。最后一次注射后,观察小鼠行为学变化;免疫组化方法检测小鼠中脑黑质致密部α-syn表达和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数目变化;RT-PCR检测α-syn mRNA表达情况。结果行为学观察发现,各组小鼠自由活动实验显示核酸疫苗组,空质粒组,PBS对照组小鼠移动格子数及下肢站立次数明显改善,并有显著差异(P<0.05)。免疫组化发现核酸疫苗组小鼠与空质粒组、PBS对照组相比,TH阳性细胞数增加63.27%、55.34%(P<0.05),α-syn表达减少55.68%,55.34%(P<0.05)。RT-PCR发现核酸疫苗组α-syn mRNA相对表达水平0.38±0.03较空质粒组0.77±0.05及PBS对照组0.73±0.01明显减少(P<0.05)。结论 pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗能有效防止鱼藤酮神经毒素对黑质多巴胺能神经元的损害,对多巴胺能神经细胞具有保护作用。
- 杨旭杨云鹏周长青马英张玉平陈中美彭国光
- 关键词：Α-突触核蛋白核酸疫苗鱼藤酮
- 优化hα-syn核酸疫苗免疫反应效果及安全性的评价被引量：2
- 2011年
- 目的评价pVAX1-IL-4/SYN-B核酸疫苗对C57BL/6J小鼠免疫反应的效果和安全性。方法采用C57BL/6J小鼠模型,应用ELISA法、免疫组织化学、RT-PCR技术,比较PBS对照组、空质粒组、优化核酸疫苗组、全长核酸疫苗组小鼠动物行为学及免疫学指标的差异。结果①优化核酸疫苗组小鼠血清中α-syn抗体明显增加;②优化核酸疫苗组中IL-4较高,IFN-γ较低,其他3组无明显差异;③免疫组织化学法显示疫苗产生的抗体可与帕金森模型小鼠脑切片中α-syn阳性包涵体发生特异性结合反应,而对照组和空质粒组无反应;④RT-PCR显示优化核酸疫苗组COX-2表达量明显少于全长核酸疫苗组(P<0.05),与对照组、空质粒组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论优化核酸疫苗可在小鼠体内产生高效价α-syn抗体,主要引起体液免疫反应;比全长核酸疫苗更有效、更安全,为优化核酸疫苗的进一步筛选奠定了基础。
- 杨云鹏杨旭陈中美彭国光周长青马英张玉平王法祥
- 关键词：帕金森病核酸疫苗Α-突触核蛋白
- 帕金森病的免疫治疗研究进展被引量：1
- 2012年
- 帕金森病的发病机制尚不完全清楚,目前还没有根本有效的药物治疗。近年来免疫治疗在帕金森疾病的治疗方面显示出良好的前景。免疫治疗主要通过三个方面:一是α-突触核蛋白抗体的被动免疫治疗;二是依赖T淋巴细胞的疫苗免疫治疗;三是核酸疫苗主动免疫治疗。
- 杨云鹏彭国光
- 关键词：帕金森病Α-突触核蛋白核酸疫苗免疫治疗
- 优化核酸疫苗对慢性MPTP帕金森病小鼠的免疫作用被引量：5
- 2012年
- 目的评价优化核酸疫苗(pVAX1-IL-4/SYN-B)预防接种对小鼠MPTP损害的免疫保护作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、PBS模型组、空质粒模型组、优化核酸疫苗模型组4组,分别在小鼠双后肢胫前肌注射PBS、PBS、空质粒、pVAX1-IL-4/SYN-B各100μl,共3次。末次注射3周后,后3组注射MPTP构建慢性帕金森病小鼠模型,正常对照组注射同体积的PBS。末次给药后观察小鼠行为学变化;免疫组织化学、Western blot检测小鼠黑质部酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达情况;RT-PCR检测小鼠黑质TNF-α、IL-1β的mRNA水平。结果与PBS模型组、空质粒模型组相比,优化核酸疫苗模型组小鼠运动症状明显改善;TH丢失减少;TNF-α、IL-1β的mRNA水平表达降低;差异有统计学意义。结论优化核酸疫苗预防接种对小鼠的慢性MPTP损害有一定的神经保护及抗炎作用。
- 陈中美杨云鹏杨旭周长青李凤群雷朋钟玲彭国光
- 关键词：帕金森病免疫神经保护炎症
